Cтраница 1
Активный метионин можно также расщепить ферментативным путем на 5 -метилтио - 5 -дезоксиаденозин и а-амино - - - бутиролак-тон. Эта реакция протекает через стадию нуклеофильного замещения, происходящего в результате атаки связанного с серой атома углерода карбоксильным анионом. [1]
Механизм ферментативного синтеза активного метионина все еще не выяснен. [2]
С другой стороны, представляется неправдоподобным, чтобы метилирование никотинамида активным метионином, в процессе которого отщепления протона не происходит, протекало по описанному выше пути. [3]
Структура описанного выше производного гомоцистеина была подтверждена [94] получением из него активного метионина при реакции с йодистым метилом в уксусной кислоте. Полученный таким образом активный метионин очищался через рейнекат, который при обработке сульфатом серебра переходил в соответствую. Полученное Вещество было идентифицировано методом хроматографии на бумаге и превращением его под действием воды при 90 в 5 - деЗокси - 5 -метилтиоаденозин. Этот второй способ синтеза активного метионина очень удобен для препаративных целей. [4]
АДЕНОЗИЛМЕТИОНЙН [ 8 - ( 5 -дезоксиаденозин - 5 -ил) - метионин, активный метионин; активный метил ], донор метильных групп при трансметилировании ( переносе метильных групп на разл. Группа СН3 у атома 8 легко отщепляется; энтальпия р-ции 41 868 кДж / моль. [5]
На основании этих данных нуклеозиду была приписана структура S-аденозилметионина [228, 229], которая была подтверждена синтезом активного метионина. Более удачным оказался метод, в котором 2 3 - О-изопропилиден - 5 - О-п-толуолсуль - фониладенозин вводили в реакцию с гомоцистеином натрия. [6]
Таким образом, оказалось, что аденозинтрифосфат не является необходимым ( за исключением его участия в превращении метионина в активный метионин) для осуществления указанных реакций метилирования. [7]
В присутствии фермента, выделенного из печени свиньи и названного Кантони никотинамидметилферазой ( фермент, вызывающий трансметилирование), этот активный метионин метилировал никотинамид до N-метилникотинамида в отсутствие аденозинтрифосфата или любого иного фосфата, содержащего богатые энергией связи ( см. стр. [8]
Структура описанного выше производного гомоцистеина была подтверждена [94] получением из него активного метионина при реакции с йодистым метилом в уксусной кислоте. Полученный таким образом активный метионин очищался через рейнекат, который при обработке сульфатом серебра переходил в соответствую. Полученное Вещество было идентифицировано методом хроматографии на бумаге и превращением его под действием воды при 90 в 5 - деЗокси - 5 -метилтиоаденозин. Этот второй способ синтеза активного метионина очень удобен для препаративных целей. [9]
Ферментативный синтез активной аминокислоты из L-метио-нина и аденозин-5 - трифосфата сопровождается выделением в сте-хиометрическом количестве всего фосфора, содержащегося в адено-зин-5 - трифосфате, в виде неорганического фосфата и образованием свободного от фосфора продукта, обладающего ультрафиолетовым спектром поглощения, характерным для производных аденозина. При действии на активный метионин азотистой кислоты происходит дезаминирование ( с образованием производного гипоксан-тина), а при кислотном гидролизе образуется аденин, гомосерин и метилтиорибоза. Гидролиз при рН 6 приводит к гомосерину и 5 -дезокси - 5 -метилтиоаденозину. [10]
Благодаря исследованиям Кантони [79, 80] удалось объяснить описанные выше явления и установить, что влияние, оказываемое аденозинтрифосфатом, не зависит от образования фосфорилированного производного метионина. При добавлении метионина, аденозинтрифосфата, ионов магния и глутатиона к ферментному препарату, приготовленному из печени крысы, свиньи, быка или кролика, и соответствующем разделении образовавшейся сложной смеси Кантони получил вещество, названное им активным метионином; он показал также, что при этом выделяется ортофосфорная кислота. [11]
Имеется доказательство, что он также образуется из неорганических соединений селена в биологических условиях. Мад и Кантони [98] недавно показали, что в присутствии аденозинтрифосфата, избытка пирофосфотазы и открытого Кантони фермента, активирующего метионин [99] ( этот фермент может быть приготовлен из печени кролика или из дрожжей), селенометионин CH3SeCH ( NH2) COOH превращается в активный селенометионин ( Se-аденозинил-метионин) и что скорость этого превращения такая же, как и скорость образования активного метионина в тех же условиях. [12]
Таким образом, оказалось, что аденозинтрифосфат не является необходимым ( за исключением его участия в превращении метионина в активный метионин) для осуществления указанных реакций метилирования. В фильтрате, не содержавшем фосфата, находился активный метионин, который затем можно было легко выделить. Показано, что он не содержит фосфора. [13]
Кантони считал, что D-метионин не способен метилировать никотияамид в присутствии фермента, содержащегося в ткани печени, а также, по-видимому, не может в указанных условиях принимать участие в образовании S-аденозинилпроизводного. Следует, кроме того, подчеркнуть, что до настоящего времени не было известно случаев участия активного метионина Кантони [109] в процессах метилирования, происходящих в растениях; однако он был обнаружен в Chlorelta. Выделение 5 -дезокси - 5 -метилтиоадено-зина ( метилтиопентозида аденина CsI NsC eOaCHaSCHa, продукта гидролиза S-аденозинилметионина Кантони) из дрожжей ( см. стр. S-аденозинилметионин играет важную роль не только в биохимии животных. [14]
Структура описанного выше производного гомоцистеина была подтверждена [94] получением из него активного метионина при реакции с йодистым метилом в уксусной кислоте. Полученный таким образом активный метионин очищался через рейнекат, который при обработке сульфатом серебра переходил в соответствую. Полученное Вещество было идентифицировано методом хроматографии на бумаге и превращением его под действием воды при 90 в 5 - деЗокси - 5 -метилтиоаденозин. Этот второй способ синтеза активного метионина очень удобен для препаративных целей. [15]