Метод - радиоавтография
Cтраница 2
То, что ядерный материал состоит из ДНК и, например, у Escherichia coli представлен единственной нитью длиной около 1 мм, замкнутой в кольцо, впервые удалось показать Кэрнсу с помощью метода радиоавтографии. [17]
Присутствие радиоактивного изотопа и его содержание в изотопической смеси обнаруживается по: действию радиоактивного излучения, которым сопровождается радиоактивный распад, на среду, через которую это радиоактивное излучение проходит; для регистрации радиоактивных излучений используют счетчики Гейгера - Мюллера, сцинтиляционные счетчики, а также метод радиоавтографии. [18]
Метод радиоавтографии может использоваться для наглядной демонстрации движения и локализации меченого вещества. Однако он не является количественным методом и применение его ограничивается следующими тремя факторами. [19]
Как полагают, при генетической рекомбинации в области каждого крос-синговера происходит синтез некоторого количества ДНК. Метод радиоавтографии в сочетании с электронной микроскопией позволяет показать, что радиоактивные предшественники включаются в пахитенную ДНК главным образом в области рекомбинационных узелков или поблизости от них. [20]
Радиоактивные вещества обнаруживают также, используя метод радиоавтографии, суть которого заключается в том, что на фотографической пленке, прижатой эмульсионным слоем к поверхности хроматограммы, экспонируются участки, соответствующие радиоактивным зонам. После обработки такой пленки получают точную копию хроматограммы, на которой радиоактивные зоны представлены темными пятнами. Если хроматограммы имеют цилиндрическую форму ( слой сорбента нанесен на поверхность палочки или на внутреннюю поверхность трубки), их можно пропустить через круговую печь и обнаружить испаряющиеся вещества, используя детекторы, применяемые в газовой хроматографии. [21]
Если необходимо проследить передвижение и поступление в те или иные органы растущего растения меченого элемента, то это можно сделать с помощью специального счетчика. Кроме того, применение радиоактивных изотопов позволяет использовать метод радиоавтографии отдельных органов растения, а также на срезах, для наглядного представления о распределении в растении поступившего радиоактивного вещества. [22]
Для лучшего разделения миллиграммовых количеств урана и микрограммовых количеств РЗЭ проводят четырех -, пятикратное хроматографирование. В этих условиях редкоземельные элементы остаются на 90 - 95 % на стартовой линии ( проверено методом радиоавтографии при проведении опытов с радиоактивными индикаторами), в то время как уран практически полностью поднимается с фронтом растворителя. [23]
Америций и кюрий были в трехвалентном, уран - в шести -, плутоний - в четырехвалентном состояниях. Распределение элементов на хроматограмме контролировали радиометрически количественно, а качественно - по цветной реакции с арсеназо III и методом радиоавтографии. [24]
Пятно на хроматограмме, содержащее радиоактивный компонент, можно обнаружить счетчиком Гейгера - Мюллера, либо методом радиоавтографии. Этот метод заключается в том, что бумажная хроматограмма, содержащая радиоактивный изотоп, контактирует некоторое время со светочувствительной пленкой или бумагой, после проявления которых наличие радиоизотопа легко обнаруживается по почернению того места, которое соответствует положению пятна радиоизотопа на первичной хроматограмме. Методом радиоавтографии можно обнаруживать любое неорганическое или органическое вещество, молекула которого содержит радиоизотоп. [25]
После разделения на тонком слое сорбента вещества могут быть открыты либо по присущей им собственной окраске, либо ( что бывает чаще всего в неорганической ТСХ) путем обработки ( опрыскивания) хроматограммы реактивами, образующими с ними различно окрашенные или флуоресцирующие соединения. Обычно таким способом можно обнаруживать десятые или сотые ( изредка тысячные) доли микрограмма неорганических ионов. В случае идентификации радиоактивных изотопов возможно обнаружение методом радиоавтографии невесомых количеств элементов ( см. гл. [26]
В результате поверхностного стока радионуклиды могут скапливаться в понижениях, ложбинах и других аккумулятивных элементах рельефа. Нуклиды поступают в растения и энергично мигрируют по пищевым цепям. Почвенные микроорганизмы аккумулируют радиоактивные элементы, что хорошо обнаруживается методом радиоавтографии. На этом принципе разрабатываются методы идентификации микробных популяций для диагностики геохимических провинций с высоким содержанием радионуклидов. [27]
Во многих лабораториях при биогенетических исследованиях с радиоактивным углеродом применяют ХТС. Гризбах с сотрудниками [20-22] исследовали образование изофлавонов в различных растениях с помощью радиоактивно меченных исходных веществ. Они использовали хроматографию на бумаге и двумерную ХТС для разделения и обнаружения методом радиоавтографии изофлавона, биоханина А и формононетина, а также промежуточных продуктов. Кратцл и Пушман [30] впрыснули кониферин-3 - С14 в ветви березы и выделили методом ХТС два радиоактивных продукта, которые образовались в растении в результате метоксилирования. [28]
Гейгера - Мюллера, к которому должна быть поднесена бумажная хроматограмма, либо при помощи метода радиоавтографии. Последний состоит в том, что бумажная хроматограмма, содержащая радиоактивный изотоп, контактирует некоторое время со светочувствительной пленкой или бумагой. После проявления пленки или бумаги наличие радиоизотопа легко обнаруживается по почернению того места, которое соответствовало положению пятна радиоизотопа на первичной хроматограмме. Метод радиоавтографии удобен тем, что с его помощью можно обнаруживать любое неорганическое или органическое вещество, молекула которого содержит радиоизотоп. [29]
Смесь 0 740 г ( 1 03 ммоля) d e - N-метилэритромицина ( примечание 1), 35 мл абсолютного спирта 0 225 г палладиевой черни и 3 мл ( 1 лшоль) 1 % - ного водного раствора формал & деги-да - С14 гидрируют при 1 ат и 28 при перемешивании в течение 2 суток. К реакционной смеси добавляют 0 001 г формальдегида и 0 050 г катализатора, после чего продолжают гидрирование еще 1 сутки. По окончании реакции катализатор отделяют центрифугированием и раствор упаривают при пониженном давлении. Методом радиоавтографии установлено наличие только одного радиохимического вещества. При упаривании маточного раствора ( примечание 4) получают дополнительно 0 315 г продукта. [30]
Страницы: 1 2 3