Метод - противоточное распределение
Cтраница 1
Метод противоточного распределения развивался так быстро, что уже спустя всего лишь два десятилетия с момента открытия он уже получил широкое распространение. Однако в настоящее время он используется лишь в тех случаях, когда его не удается заменить каким-либо другим. За последние несколько лет в литературе не появилось новых работ по методике противоточного распределения, опубликовано лишь несколько статей, посвященных практическому применению этого метода. Наша цель состоит в том, чтобы показать, что данный метод можно с успехом применять и в том случае, когда дорогое оборудование недоступно. [1]
Метод противоточного распределения позволяет обнаружить в сложных смесях компоненты, содержащиеся в ней в минимальном количестве, и выделить их с высокой степенью чистоты. Этот метод с большим успехом используют, в частности, при изучении природных соединений, которые нередко присутствуют в очень сложных смесях в ничтожных количествах. [2]
Методом противоточного распределения при 600 переносах в системе метанол-хлороформ-боратный буфер рН 8 25 ( 2: 2: 1) было проведено ( Малышкина и др. 1970) сравнение кандицидина с леворином и установлено, что кандицидин представляет собой значительно более сложный комплекс, чем комплекс леворина. Bickel ( 1968), сравнивая в аналогичных условиях очищенный кандицидин и лево-рин, не нашли различий в коэффициентах распределения главных компонентов. [3]
Голумбик [736] разработал метод противоточного распределения, пригодный для частичного разделения м - и п-крезолов. [4]
Описываемый способ представляет собой один из вариантов метода непрерывного противоточного распределения: смесь, подлежащую разделению, вводят в равных количествах в центральную пробирку батареи при каждом шаге необходимое число раз. Сам по себе этот процесс является периодическим, поскольку перемещение фаз производится периодически, а не непрерывно, как в рассмотренных выше примерах. Рассмотрим один из вариантов методики О Киффа. Батарея включает 5 пробирок, пронумерованных, как показано на рис. 11.12. Пробирки заполняются обеими фазами. Центральная пробирка г 0 заполняется одной долей разделяемой смеси, либо в чистом виде, либо в виде раствора в минимальном количестве легкой фазы. Батарею встряхивают до тех пор, пока в системе не установится равновесие и легкие фазы не переместятся на одну пробирку вправо. После этого вновь проводят встряхивание и перемещают тяжелые фазы на одну пробирку влево. Оба таких шага вместе составляют один цикл. Затем в центральную пробирку вводят вторую ( равную) порцию разделяемой смеси и батарею вновь встряхивают. [5]
В последующих работах выделенные из нормального человеческого глобина и разделенные методом противоточного распределения а - и р-цепи подвергались расщеплению трипсином, химотрипсииом и пепсином. [6]
 |
Значения Fr n в противоточном распределении с п6. [7] |
Разрешение является мерой, которая характеризует разделение двух растворенных веществ методом противоточного распределения. [8]
В последнее время при исследованиях, решающих биотехнологические и биологические задачи, все шире стал применяться метод противоточного распределения, ранее хорошо разработанный в органической химии. Если в классической модификации метод противоточного распределения, наряду с распределительной хроматографией, применим для разделения низкомолекулярных соединений, то в модификации, предложенной П. О. Аль-бертсоном, метод стал пригоден для разделения биомакромолекул, вирусов, бактерий, клеток крови и тканей. Метод Альбертсона осуществляется в жидких двухфазных полимерных системах, которые удается подобрать такими по составу, что они сохраняют биологическую активность разделяемых компонентов. [9]
Аллен-ацетиленовые соединения продуцируются и различными базидиомицетами; их выделение удалось в большинстве случаев осуществить с помощью метода противоточного распределения. Особенно примечательным для этой группы антибиотиков является поразительное единообразие - наличие дииналленовой группировки и связанная с ней неустойчивость, а также высокая биологическая активность. [10]
Второй компонент тироцидиновой фракции - тироцидин В - получен в чистом виде Кингом и Крэйгом [1244]; очистку проводили методом противоточного распределения. Антибиотик охарактеризован аминокислотным анализом и величиной молекулярного весаг полученной путем определения содержания дини-трофенильных групп в молекулах его моно - и 6 c - N-DNP - npoH3 - водных. [11]
Разделение насыщенных глицеридов и продуктов окисления достигается хроматографией на кремневой кислоте или фракционированием солей глицеридов дикарбоновых кислот; наиболее эффективные результаты были получены методом противоточного распределения. [12]
Применяя распределительную хроматографию на порошкообразной целлюлозе или на кремнеземе, удалось выделить более 12 компонентов. Метод противоточного распределения Крэйга менее пригоден для препаративного разделения, но очень ценен для установления однородности препаратов, полученных после хроматографической очистки. [13]
Применение метода противоточного распределения к белкам имело ограниченный успех, так как большинство белков не настолько хорошо растворимо в неводных растворителях, чтобы можно было подобрать подходящую пару растворителей. Однако в последнее время в литературе опубликованы результаты успешных попыток в этом направлении. Считавшаяся прежде гомогенной [14, 143] кристаллическая рибонуклеаза была разделена на два компонента, обладающих ферментативной активностью [145], методом распределения между водным раствором сернокислого аммония и 2-этоксиэтаноло м ( целлосольвом) на колонке с кизельгуром. [14]
После щелочного гидролиза ( Е 1 - 5), превращения продукта гидролиза Б соответствующий нитрофе-ниловый эфир ( F 1 - 5), отщепления обеих тритильных групп под действием трифторуксусной кислоты при температуре от - 5 до - ю ( G 1 - 5) и циклизации был получен цикло - [ ь - Уа. Для его очистки использовали метод противоточного распределения ( 24 переноса; четыреххлори-стый углерод / хлороформ / метанол / вода, 7: 3: 7: 3); Туг2 - Туг7 - грамицидин С был выделен в кристаллическом виде. [15]
Страницы: 1 2