Метод - гель-фильтрация
Cтраница 1
Метод гель-фильтрации в тонком слое ( ТСГФ) имеет ряд преимуществ перед колоночной хроматографией. Во-первых, на стартовую линию пластинки шириной, например, 20 см можно нанести 10 - 15 препаратов в виде пятен диаметром 3 - 5 мм, что позволяет сопоставлять результаты фракционирования многих препаратов в одном опыте, в идентичных условиях. Во-вторых, благодаря малой толщине слоя геля ( 0 4 - 1 мм) объем препарата может быть уменьшен до 5 - 20 мкл. Нет проблем и с обеспечением ровного слоя препарата - он мигрирует в виде пятна, как обычно при ТСХ. Наконец, нет необходимости ожидать, пока все компоненты фракционируемой смеси один за другим достигнут конца пластинки. Процесс разделения прекращают, как только наиболее быстрый компонент приблизится к нижнему краю геля. [1]
Метод гель-фильтрации может быть полезной заменой измерению вязкости. Для гидродинамических свойств, упомянутых ранее, объем элюирования линейного полимера в конфигурации статистического клубка является функцией длины его цепи, а следовательно, может служить мерой молекулярного веса. Если ограниченные количества материала не позволяют провести измерение вязкости, то метод гель-фильтрации может стать вполне равнозначной заменой, Если молекулярные веса, оцениваемые методом гель-фильтрации, гораздо ниже получаемых по методу седиментационного равновесия, то следует предположить, что поперечные сшивки ( например, дисульфидные связи) по-прежнему сохраняются. [2]
Методом гель-фильтрации произведено разделение натрийфосфат-ного стекла на фракции, состоящие из пиро -, триполифосфата, фракции с преимущественным содержанием тетраполи-ипептаполифосфата, а также фракцию высокомолекулярных фосфатов. [3]
Использование метода гель-фильтрации для фракционирования полисахаридов находится в начальной стадии. Благодаря простоте и быстроте выполнения этот метод может стать ценным дополнением к обычным приемам фракционирования. Теоретически гель-фильтрация может применяться для разделения всех растворимых в воде полимеров. [4]
При групповом разделении методом гель-фильтрации удается в значительной мере избежать разбавления, если учитывать объемные соотношения, подробно рассмотренные в разделе Обессоливание. Кислюк [16] показал, что с помощью гель-фильтрации на сефадексе G-50 удается гораздо легче отделить фермент от его кофакторов, чем с помощью диализа. Таким путем удается получить кофакторы в сравнительно небольшом объеме и изучить эффект их вторичного присоединения к ферменту. После гель-фильтрации был выделен совершенно неактивный белок, активность которого вновь восстанавливалась ( до 86 % исходной) после добавления низкомолекулярной фракции. [5]
В отчете следует обосновать метод гель-фильтрации и описать ход работы. [6]
При хроматографическом фракционировании молекул методом гель-фильтрации объем препарата не должен, по возможности, превышать 1 - 2 % от объема колонки. [7]
Само собой разумеется, что методом гель-фильтрации можно обессоливать не только белки, но также и любые высокомолекулярные водорастворимые соединения. [8]
Почему при обессоливании белкового раствора методом гель-фильтрации белок по времени появляется в элюирующей жидкости раньше, чем ионы соли. [9]
В результате препаративного фракционирования лигносульфо-затов ЛС методом гель-фильтрации на сефадексе 3 - 75 полу - зено 11 фракций, отличающихся по величине молекул. Для выделения из водных растворов и очищенных от минеральных со-пей фракций определены молекулярные веса MB, оптическое поглощение в УФ-области, содержание серы и метоксильных групп. Данные по У Ф - пог лощению и содержанию серы и мето - ксилов во фракциях показывают, что ЛС ip MB больше 35.000 и менее 35.00 химически и структурно различны. По MB и выходам фракций построены кривые молекулярно-весового распределения ЛС, которые свидетельствуют о том, что ЛС являются продуктом сложных превращений лигнина, включающих в себя как реакции деградации макромолекулы лигнина, так и реакции сшивки. [10]
На каком различии основано фракционирование белков методом гель-фильтрации: а) по растворимости; б) по форме молекулы; в) по суммарному заряду; г) по молекулярной массе; д) по первичной структуре. [11]
Иногда для разделения пептидов энзиматического гидролизата применяется и метод гель-фильтрации. [12]
 |
Калибровочный график для колонки с биогелем А-5 т ( текст [ Fish et al., 1969 ]. [13] |
Белев и соавторы для определения молекулярных масс денатурированных белков методом гель-фильтрации использовали сефакрил S-200 Superfine. [14]
Страницы: 1 2 3