Иммунохимическая метода
Cтраница 1
 |
Кривая осаждения. [1] |
Иммунохимические методы, отличаясь высокой специфичностью, уже давно, начиная с классических работ Гейдельбергера ( 1923 - 1929) применяются в химии углеводов. [2]
Иммунохимические методы могут дать сведения о гетерогенности препарата полисахарида, содержащего минимум два различных мономера, каждый из которых обеспечивает реакцию с некоторой специфической антисывороткой. Если эти два мономера входят в состав одной и той же молекулы, то соотношение между ними в специфических осадках, которые полисахариды образуют с антителами, реагирующими с каждым мономером, должно оставаться неизменным. И наоборот, если два мономера являются составными частями разных полисахаридов или находятся в разных полисахаридах в различных пропорциях, соотношение между ними в специфических осадках меняется. Аналогичным способом было установлено, что аравийская камедь ( гуммиарабик) [24] и специфический полисахарид Cryptococcus neoformans A [25] представляют собой смеси. [3]
Иммунохимические методы, основанные на реакции преципитации, очень удобны для качественного и количественного анализа белков, для определения гомогенности белковых препаратов и наличия в них примесей, а также для идентификации компонентов белковых смесей. Как вспомогательный метод реакция преципитации применяется для изучения структуры белка. Преимущество этого метода по сравнению с другими состоит в том, что он может быть использован тогда, когда нельзя провести количественный химический анализ, например при определении данного компонента в смеси белков. Именно в этих случаях результаты, полученные с помощью иммунохимических реакций, могут быть очень полезны. [4]
Иммунохимические методы, основанные на использовании меченых реагентов, широко применяют для определения биологически активных соединений самой разнообразной структуры - от низкомолекулярных гормонов до высокомолекулярных вирусов и целых клеток. [5]
Иммунохимические методы анализа все активнее внедряются в аналитическую практику и используются в различных областях медицины, сельского хозяйства, микробиологической и пищевой промышленности, при анализе объектов окружающей среды. [6]
Эти иммунохимические методы могут оказаться полезными при определении степени очистки и получении сведений о гетерогенности полисахаридных препаратов; при фракционировании смесей; при обнаружении потери биологической активности или расщепления в процессе очистки; при установлении идентичности неизвестных составных частей сложных полисахаридов; при обнаружении структурного сходства или различий между полисахаридами; при получении информации о последовательности моносахаридов и типах связей в участках структуры, реагирующих с антителом, а также при определении стереохимических требований и размеров активных центров молекул антител. [7]
Разработаны новые иммунохимические методы анализа барбитуратов, бензодиазепинов и эфедрона в биологических жидкостях человека. Получены иммунохимические реагенты, обеспечивающие необходимые аналитические параметры создаваемых тест-систем. Осуществлен синтез конъюгированных антигенов указанных выше веществ с макромолекулярными носителями, которые использовали для наработки специфических антител к наркотикам и получения маркеров для связывания с частицами монодисперсных латексных суспензий. Исследованы способы синтеза и очистки конъюгатов наркотических веществ. Активированные спейсерсодержащие производные барбитуратов, бензодиазепина и эфедрона ковалентно связывали с белковыми и полимерными носителями, используя методы смешанных ангидридов, диазотирования, карбодиимидный в водно-органической среде. Очистку и выделение полученных конъюгатов проводили хроматографически. [8]
Показано, что иммунохимические методы можно использовать для обнаружения потери активности или расщепления высокомолекулярных полисахаридов в процессе выделения. Было изучено влияние различий в молекулярном весе фракций декстрана на способность осаждать антидекстран человека. На осаждение антидекстрана человека молекулярный вес фракции влияет относительно мало, но при перекрестных реакциях фракций дек-страна с антипневмококковыми сыворотками типа II он играет более значительную роль. [9]
Какие метки используют в иммунохимических методах, какова их роль. [10]
Подобно тому, как в иммунохимических методах наличие определенного антигена в анализируемом образце определяется по взаимодействию с антителом, специфичным к этому антигену, присутствие в образце, содержащем нуклеиновые кислоты, определенной нуклеотидной последовательности может быть зарегистрировано с помощью олигонуклеотида или нуклеиновой кислоты, комплементарных анализируемой последовательности, путем регистрации образовывания дуплекса. Метод анализа, основанный на гибридизации с такими зондами, называют гибридиза-ционным анализом. Анализируемый образец может быть закреплен на какой-либо подложке или иммобилизован в геле. Последняя ситуация довольно типична для нуклеиновых кислот, если анализируемая смесь подвергалась гель-электрофорезу. Иммобилизованный образец может быть обработан соответствующим зондом, несущим какую-нибудь метку, которая после удаления избытка зонда позволяет с высокой чувствительностью зарегистрировать образование дуплекса. [11]
В ходе выполнения работ по проекту разработаны новые иммунохимические методы анализа для экпресс-определения наркотических веществ ( опиатов, кан-набиноидов, гидазепама) в биологической жидкости человека. [12]
Поскольку в большинстве гликопротеинов углеводная часть является определяющей для проявления специфической биологической активности, очень важное место в установлении концевой последовательности олиго-сахаридных цепей играют иммунохимические методы, которые одновременно позволяют непосредственно определить и структуру антигенных детерминантов. Этот путь играет особенно большую роль в исследовании гликопротеинов и оказался весьма плодотворным при изучении групповых веществ крози. [13]
Очень важно прекратить прием наркотиков как можно раньше, пока болезнь еще не приняла необратимый характер. Для выявления употребления наркотических препаратов на ранней стадии учеными разработаны иммунохимические методы экспресс диагностики, позволяющие обнаружить в организме человека присутствие даже следовых количеств метаболитов наркотических веществ. [14]
Детальнее всего исследован вопрос о концевых группировках групповых веществ крови, для которых они являются иммунологическими детерминантами. Эти сведения получены при изучении кислотного и ферментативного гидролиза, а также иммунохимическими методами. При мягком кислотном гидролизе отщепляются фукоза37 и нейраминовая кислота101 ( если она содержится в биополимере), что доказывает их концевое положение. В несколько более жестких условиях гидролиза101 106 - 108, а также при гидролизе на сульфополистирольных смолах109 отщепляется смесь других моно -, ди - и трисахаридов, набор которых оказывается различным для групповых веществ различной специфичности и позволяет сделать заключение о природе иммунологических детерминантов. [15]
Страницы: 1 2