Cтраница 3
При добавлении к сыворотке крови кофеинового реактива несвязанный билирубин переходит в растворимое диссоциированное состояние, благодаря чему он также вызывает окрашивание раствора со смесью диазореактивов. По интенсивности этой окраски фотометрически определяют концентрацию общего билирубина. По разнице между концентрацией общего и связанного билирубина находят содержание несвязанного билирубина, дающего непрямую реакцию. [31]
Соединения, содержащие имидазольное кольцо ( гистидин, метилгистидин, гистамин, карнозин), а также тирозин, дают красно-оранжевое окрашивание после обработки диазореактивом ( с. [32]
Реактивы и оборудование: этиловый спирт ( этанол); формамид яети левый спирт ( мета пол); и-гексан; бензол; КаОН, 0 05 н; диазореактив ( Г X) нзопсора. [33]
Реактивы: 1) 11 % - ный раствор Na2HPO4 - 12Н20 2) 20 % - ный и 0 2 % - ный раствор СаС12 - 6Н20; 3) диазореактив: а) сульф-аниловая кислота, 1 г в 15 мл 25 % - ной НС1, довести водой до 1000 мл, б) раствор натрия нитрита 0 5 % - ного - смешивают 10 мл раствора сульфаниловой кислоты и 0 3 мл раствора нитрита. [34]
![]() |
Стеклянный опрыскиватель для хроматографии. [35] |
Хроматограммы проявляют в УФ-свете или обработкой специфическими проявителями, в частности для антиоксидантов фенольного типа - фосфорномо-либденовой кислотой [191] и 2 6-дихлорхинонхлоримидом [137], для аминного типа - перекисью бензоила [137] и диазореактивом. [36]
В пробирку вносят 3 капли 1 % - ного раствора сульфаниловой кислоты в 2 % - ном растворе НС1, добавляют 3 капли раствора NaNO3 и перемешивают. В полученный диазореактив вводят 5 капель испытуемого раствора. Появление красного окрашивания указывает на присутствие гистидина и тирозина или одной из этих аминокислот. Красное окрашивание объясняется образованием азо-красителя. [37]
К 5 каплям 1 % раствора сульфаниловой - ки - слоты прибавляют 5 капель 5 % раствора азотистокислого натрия. К диазореактиву прибавляют небольшое количество порошка тиамина ( на кончике стеклянной палочки) и 5 - 7 капель 10 % раствора соды. Жидкость окрашивается в оранжевый или красный цвет. Если раствор соды спускают осторожно, по стенке наклоненной пробирки, то на границе двух жидкостей образуется красное кольцо. [38]
В 2 пробирки наливают по 3 капли 1 % раствора сульфаниловой кислоты в 2 % соляной кислоте2, по 3 капли 5 % раствора азотистокислого натрия и перемешивают. К полученному диазореактиву добавляют: в одну пробирку 5 капель 1 % раствора яичного белка, в другую - 5 капель пшеничного ( или соевого) белка и в каждую - по 3 - 5 капель 10 % раствора углекислого натрия. Жидкость в обеих пробирках окрашивается в красный цвет. Если реакцию производить с раствором желатины, то окраска получается меньшей интенсивности, так как в желатине нет тирозина и мало гистидина. [39]
Растворы смешивают на ледяной бане. После добавления диазореактива во всех пробирках развивается желтоюранжевое окрашивание, сохраняющееся благодаря добавлению спирта в течение нескольких часов. [40]
Перед началом практического занятия смешивают 3 мл диазореак-тива № 1, 15 мл диазореактива № 2 и доводят объем смеси дистиллированной водой до 100 мл. Колбу, содержащую рабочий Диазореактив ( смесь диазореактивов № 1 и 2), охлаждают во льду. Раствор рабочего диазореактива может сохраняться на холоду в течение суток. [41]
Описанная выше реакция может быть выполнена иным путем. К небольшому количеству диазореактива ( приготовление см. выше) добавляют 5 капель 10 % раствора соды и осторожно по стенке пробирки наслаивают раствор белка. На границе двух жидкостей появляется красное кольцо. При смешивании вся жидкость окрашивается в оранжевый или красный цвет. [42]
С хлорным железом адреналин образует соединения типа фенолята зеленого цвета. При взаимодействии адреналина с диазореактивом образуются комплексы, окрашенные в красный цвет, подобные тем, которые известны для гистидина и тирозина ( см. стр. [43]
Диазореактив I поставляется в готовом к использованию виде. Раствор устойчив; 2) диазореактив II: нитрит натрия - 100 мг. [44]
Перед началом практического занятия смешивают 3 мл диазореак-тива № 1, 15 мл диазореактива № 2 и доводят объем смеси дистиллированной водой до 100 мл. Колбу, содержащую рабочий Диазореактив ( смесь диазореактивов № 1 и 2), охлаждают во льду. Раствор рабочего диазореактива может сохраняться на холоду в течение суток. [45]