Миграция - белок
Cтраница 1
Миграция белков в слое агарового геля подобна их движению при свободном электрофорезе. Однако в агаровом геле значительно сильнее, чем при электрофорезе на бумаге, выражен электроосмос, который усиливает поток буферного раствора в сторону катода. Чтобы устранить возможные артефакты, следует размещать лунки для внесения исследуемого образца точно в центре агаровой пластинки. [1]
 |
Диаграмма электрофореза кровяной сыворотки. [2] |
Миграцию белка наблюдают, следя за изменением показателя преломления на поверхности раздели между раствором белка и буферным раствором, причем это можно зарегистрировать на фотографической пластинке. На графике электрофореза каждая составная часть образует пик, причем площадь каждого пика является мерой концентрации соответствующего компонента. [3]
Для непрерывного наблюдения за миграцией белков при фракционировании сыворотки к ней рекомендуется добавить бромфено-ловый синий. [4]
Под влиянием электрического поля происходит миграция белков в крахмальном геле. [5]
Под влиянием электрического поля происходит миграция белков в геле, образованном при сополимеризации акриламида и N, N - метиленбисакриламида. [6]
Поэтому электроды помещают в особые кюветы, которые сообщаются с областью, где происходит миграция белков, через систему электролитических мостиков и промежуточных сосудов с буферными растворами ( см. рис. 5), Нередко применяют также специальные охлаждающие устройства. [7]
В стандартных условиях опыта ( те же самые бумага, бу-ферный раствор и аппарат) миграция белков в электрическом поле зависит от напряжения. [8]
Толщина слоя крахмального геля не должна превышать 5 - 10 мм. В более толстом слое геля миграция белков происходит неравномерно. [9]
Под влиянием электрического поля происходит миграция белков в крахмальном блоке, в результате которой белки разделяются, а после разделения их можно элюировать из крахмала. [10]
Испарение приводит к концентрированию буферного раствора, увеличение ионной силы повышает его удельную электропроводность, а это в свою очередь опять-таки ведет к нагреванию и испарению раствора. На одном конце полоски направление этого потока совпадает с миграцией белков, а на другом конце увлекает их в противоположную сторону. [11]
Если заполняющий отсеки электрофоретической камеры буферный раствор находится на разных уровнях, то из отсека с более высоким уровнем он перетекает по бумажным полоскам в отсек с более низким уровнем. Этот поток буферного раствора в зависимости от направления может либо тормозить, либо ускорять миграцию белков. [12]
Уравнение 3.5 показывает, что при малых значениях D и больших значениях dM / d ( pH), обычно характерных для белков, величины а будут небольшими и поэтому зоны будут четко сфокусированы. Однако увеличение напряженности поля нежелательно из-за выделения джоулева тепла, которое вызывает конвекционные возмущения на пути миграции белка, не говоря уже о возможной денатурации белка. [13]
Фракционирование путем электрофореза представляет собой суммарный результат действия многих факторов, некоторые из которых противоположны друг другу. При электроэндоосмосе присутствие фиксированных зарядов на мембранной или геле-вой матрице может вызывать результирующий поток воды в направлении, противоположном направлению миграции белков. В зависимости от изоэлектрической точки данного белка и состава буферного раствора белок может быть нейтральным, чисто катионным или чисто анионным. [14]
Поэтому они содействуют поддержанию постоянного рН в жидкостях организма. Как уже отмечалось выше, в кислой среде белки растворяются в виде катионов, а в щелочной - в виде анионов. Это объясняет миграцию белка к катоду при электрофорезе в кислом растворе и к аноду в щелочном растворе. При изоэлектрической точке не происходит электрофореза; это свойство служит для установления изоэлектрической точки. О применении электрофореза для установления однородности белков было сказано выше. [15]
Страницы: 1 2