Микротом

Cтраница 1

Микротом с термоэлектрически охлаждаемым столиком позволяет делать срезы толщиной до 2 мк. [1]

Микротом состоит из острого ножа, закрепленного чуть ниже поверхности на суппорте, установленном на рельсах. При быстром движении ножа с поверхности снимается тонкий слой раствора, который поступает в имеющийся в ноже резервуар. Слой раствора толщиной - 0 1 мм, снимаемый с - 1 м2 поверхности, весит всего несколько граммов. [2]

Микротомы ротационного типа по сравнению с салазочными шеют меньший вес и менее жесткую конструкцию, поэтому образец зезины должен иметь меньшие размеры. Хорошие результаты были аолучены при резании образца, имеющего форму малой усеченной пирамиды или клина, прикрепленного широкой стороной к торцу держателя. Размеры вершины пирамиды в начале процесса резания должны быть 2 мм или меньше в направлении, параллельном кромке - [ ожа, и менее 0 5 мм в перпендикулярном направлении. Замораживание продолжается обычно 5 мин. После удаления из жидкого азота держатель с образцом нужно быстро закрепить в микротоме посредством Т - образного паза и при помощи винта установить требуемый угол. Срезы собираются на поверхности воды в алюминиевой занночке, прикрепленной к ножу, из которой их можно легко выло-зить на предметные сетки, покрытые пленкой-подложкой. [3]

Относительно простым и недорогим ручным микротомом можно сделать большое число поперечных срезов толщиной 15 мк и более, при этом не требуется большого числа подготовительных операций и особого уменья препаратора. Биологи пользуются ручными микротомами более столетия, и сходство большинства ручных микротомов для срезания волокон с хорошим микротомом Рэнвьера, который применялся еще в 1880 г. [80, 201], совершенно очевидно. Прототипом микротома для волокон является микротом Харди [ 891; описаны и продаются некоторые другие типы микротомов. [4]

Устроен микротом не очень сложно, но paooiaei обычно очень точно. Против столика на стальных салазках подвижно установлен острый клинообразный нож. Нож этот изготовлен из стали специального состава и хорошо отточен. После каждого раза, когда сделан один срез, столик микротома поднимается на необходимую величину. Так и работает этот прибор: движение ножа - срез - подъем столика; движение ножа - срез - и снова подъем столика. Ленточка срезов сама укладывается на лезвие ножа. Чтобы столик подымался на нужную и всегда одинаковую величину, в микротоме обычно применяют так называемый микрометрический винт, очень точно рассчитанный и аккуратно и тонко сделанный. Один оборот винта, один виток резьбы - и столик поднялся на несколько микрон. [5]

Некоторые вращающиеся микротомы дают косые срезы, тонкий край которых может рассматриваться в электронном микроскопе. [6]

На микротоме салазочного типа предпочтительно получать срезы с вулканизованных резин. Тонкие срезы ( менее 5 мк) лучше получаются с применением стеклянных ножей; полученным срезам нужно дать немного набухнуть в растворителе ( ксилол, керосин), чтобы их легче было перенести на предметное стекло микроскопа. Для распределения и выравнивания срезов применяется тонкая кисточка из верблюжьего волоса. Срезы невулканизованных резин набухают очень неравномерно, поэтому обращаться с ними труднее. [7]

Цитохимику необходимы замораживающий микротом или криостат, обычный или специальные микроскопы - ультрафиолетовый, люминесцентный, поляризационный и интерференционный. Желательно иметь цитофотометр или цитоспектрофрто-метр. В какой-то мере он может быть заменен регистрирующим микрофотометром МФ-4. [8]

Основным узлом микротома является замораживающий столик, имеющий отверстия для подачи углекислоты под колпачок в зону заморозки устанавливаемого шлифа. Углекислоту подают порциями с помощью игольчатого клапана. [9]

При помощи микротома Портера - Блюма ( хотя работа с ним несколько сложнее, чем с микротомом салазочного типа) были получены срезы многих невулканизованных резин и вулканизатов для электронномикроскопического исследования. Пример использования этого метода для исследования невулканизованной резины приведен на рис. 6.10 и 6.11, где показаны микрофотографии срезов саже-латексной маточной смеси на основе бутадиен-стирольного каучука и смеси на основе бутилкаучука, полученной смешением в растворе. Совершенно очевидно, что смешение в растворе обеспечивает более равномерное распределение частиц сажи. [10]

Применение в микротоме столика, охлаждаемого термоэлементом, позволило отказываться от неудобных и громоздких баллонов, а самое главное изменением силы тока, протекающего через элемент, управлять температурой ткани с большой точностью и в широких пределах. [11]

В существующих системах микротомов температура ткани понижается при испарении углекислоты. [12]

Схема устройства упрощенного ультрамикротома. [13]

Образующиеся при работе микротома срезы поступают в ванночку, наполненную водным раствором спирта. [14]

Образцы волокон для ручных микротомов вначале расчесывают, если они спутаны. Затем волокна помещают в паз металлической пластины микротома и зажимают металлической вставкой. Слишком сильное сжатие нежелательно, так как оно может до неузнаваемости деформировать волокна. Далее, пучок срезают вровень с верхней и нижней поверхностями плиты и микрометрический винт, подающий образец, устанавливают в исходное положение. Образец поднимают на 15 или 20 мк и на вершину пучка срезанных волокон наносят каплю раствора нитроцеллюлозы или ацетилцеллю-лозы в амилацетате. Эта так называемая пропитывающая жидкость высыхает и удерживает вершину пучка волокон так, что после отрезания образца отдельные срезы остаются ориентированными соответствующим образом. [15]

Страницы: 1 2 3 4 5