Cтраница 2
Установлено, что алпизарин быстро всасывался из желудочно-кишечного тракта, в крови неизмененный препарат определялся в концентрациях 0 05 - 4 5 мкг / мл в течение 0 5 - 5 часов после применения. Метаболиты алпизарина не найдены. С использованием метода равновесного диализа установлено, что алпизарин в значительной степени ( 90 - 70 %) связывается с белками сыворотки крови. По мере повышения концентраций препарата увеличивается доля не связанной с белками фракции. [16]
Систему растворенное вещество - солевой раствор обычно рассматривают как двухкомпонентную. Вопрос об электростатических эффектах рассматривается в обзоре Криса и Пейна [4], посвященном существующим методам определения молекулярной массы. Кассаса и Эйзенберг [5, 6, 7] показали, что так называемые безводные молекулярные массы можно определять в трехкомпенентных системах без точного учета взаимодействий между компонентами, если раствор подвергнуть равновесному диализу. Все теоретические трудности, связанные с учетом взаимодействий, возникающих в трехкомпонентной системе, при этом, по-видимому, полностью устраняются. Соли, используемые в качестве третьего компонента, должны иметь малую молекулярную массу и присутствовать в достаточно больших концентрациях, чтобы не создавать заметного доннановского эффекта. Этот эффект, как известно, состоит в том, что если по одну сторону полупроницаемой мембраны находятся заряженные макромолекулы, например белки, то концентрация солей с разных сторон мембраны будет различной. [17]
Степень связывания ионов белками можно определять различными методами; из них наиболее широко распространен метод равновесного диализа. При диализе ( так же как и при осмометрии) используют мешочек, стенки которого непроницаемы для молекул белка, но проницаемы для небольших ионов. Диализный мешочек с раствором белка помещают в раствор, содержащий необходимый ион. После установления равновесной концентрации диффундирующего иона по обе стороны мембраны измеряют концентрацию иона в растворе, не содержащем белка; разность начальной и конечной концентраций иона в не содержащем белка растворе позволяет определить концентрацию иона в растворе белка. Если концентрации иона по обе стороны мембраны равны друг другу, то это означает, что связывания не произошло. Если связывание имело место, то концентрация иона в белковом растворе должна быть выше, чем в растворе, не содержащем белка; разность концентраций может служить мерой числа ионов, связанных с одной молекулой белка. Для того чтобы исключить влияние эффекта Гиббса - Донна-на, равновесный диализ проводят обычно либо в изоэлектрической точке белка, либо при высокой ионной силе. Такие методы, как ультрафильтрация, распределительный анализ, а в некоторых случаях и адсорбционная спектрофотометрия, также могут служить для определения степени связывания ионов с белками. [18]