Cтраница 4
В результате специфической адсорбции анти-декстрана на нерастворимом декстране ( сефадексе) и элюировании изо-мальтотриозой или изомальтотетраозой можно получить фракцию антитела, которая сильнее ингибируется меньшими олигосахаридами, что указывает на значительное содержание молекул антител с активными центрами малых размеров. Элюирование изомальтогексаозой дает вторую фракцию антитела с преимущественным содержанием активных центров большого размера, так как эту фракцию ингибируют только высшие олиго-сахариды. Таким образом, количественное гаптенное ингибирование позволило не только точно определить величину и строение активных групп, с которыми соединяется антитело, но и показало, что антитело ( даже к одному антигену) не гомогенно в отношении величины активных центров. [46]
Следует, однако, отметить, что Хабиб и др, [2] на основании опытов с химически модифицированными антигенами считают, что удаление положительного заряда с какой-либо аминогруппы антитела путем увеличения рН раствора может оказывать такое же влияние на молекулу антитела и ее способность преципитировать большую молекулу антигена, как и удаление этого заряда посредством ацетилирования. [47]
Эти иммунохимические методы могут оказаться полезными при определении степени очистки и получении сведений о гетерогенности полисахаридных препаратов; при фракционировании смесей; при обнаружении потери биологической активности или расщепления в процессе очистки; при установлении идентичности неизвестных составных частей сложных полисахаридов; при обнаружении структурного сходства или различий между полисахаридами; при получении информации о последовательности моносахаридов и типах связей в участках структуры, реагирующих с антителом, а также при определении стереохимических требований и размеров активных центров молекул антител. [48]
Образование многих антител в ответ на введение одного антигена обусловлено, с одной стороны, тем, что антиген может содержать несколько различных детерминирующих групп, вызывающих появление различных адаптированных к ним антител, с другой стороны - несовершенством адаптации образующихся антител. Молекулы антител образуются из аминокислот, и, поскольку строение пептидной цепи может меняться только до определенного предела, конфигурация их никогда не может полностью соответствовать конфигурации молекулы антигена. Иммунная сыворотка, следовательно, должна содержать и хорошо и плохо адаптированные антитела ( фиг. [49]
То, что гомологичные белки из разных видов обычно не идентичны, обнаруживается также при изучении особого класса белков, называемых антителами или иммуноглобулинами. Молекулы антител появляются у позвоночных в сыворотке крови и отдельных тканях в ответ на инъекцию антигена-белка или какого-то другого высокомолекулярного соединения, чужеродного для данного вида. Каждый чужеродный белок вызывает образование антител только одного бпределенного типа, подобная реакция организма, высокоспецйфическая по отношению к инъецированному белку, называется иммунным ответом или иммунной реакцией; она составляет основу целой научной области-иммунологии. Молекулы антител, формирующиеся в специализированных клетках - лимфоцитах, способны соединяться с молекулами антигенов, вызвавшими их появление, в результате чего образуется комплекс антиген-антитело. [51]
Однако большое разнообразие в расположении боковых аминокислотных цепей, находящихся на поверхности молекулы, может быть обусловлено различием в ходе двух соседних параллельных а-спиралей и сдвигом их одной по отношению к другой в направлении продольных осей. Молекулы антител компактны, и если, как это сейчас представляется, каждая из них состоит только из одной пептидной цепи, то эта цепь должна перегибаться примерно 16 раз. [52]
Несвязавшиеся молекулы первого антитела смывают и добавляют второе антитело, специфически связывающееся с первым. Ко второму антителу присоединен фермент, превращающий неокрашенный субстрат в окрашенный продукт. Добавляют неокрашенный субстрат и проводят количественное определение окрашенного продукта. [53]
Модели типичных молекул антител и ( для сравнения) молекулы сывороточного альбумина человека приведены на фиг. [54]
Участок связывания в антителе соответствует размеру всего гаптена. В молекуле антитела электрические заряды и образующие водородные связи группы комплементарны зарядам и группам гаптена и локализованы таким образом, что обеспечивается максимальное притяжение. Связывающий участок антитела имеет жесткую конформацию, которая не подгоняется к структуре гаптена. [55]
Почему важно, чтобы В-клетки были моноспецифичны. Моноспецифичность гарантирует, что каждая молекула антитела будет составлена из двух идентичных половинок и поэтому будет содержать два идентичных антиген-связывающих участка. [56]
Основные работы посвящены изучению строения молекул антител. [57]