Cтраница 1
Молекулы пробы вводятся и элюируются в газовом потоке, В газовом потоке они и мигрируют по колонке, но неподвижны, когда находятся в неподвижной фазе - на насадке из носителя с нанесенным на него растворителем или на адсорбенте, или в слое растворителя на стенке полой капиллярной колонки. В соответствии с этим они должны перемещаться в неподвижную фазу и из нее и переноситься газовым потоком. [1]
![]() |
Влияние разницы в. [2] |
Молекулы пробы могут адсорбироваться на стенках за счет взаимодействия с отрицательно заряжеными силанольными группами кварца. При нейтральных и щелочных условиях разделения многие силанольные группы депротонируются и способствуют адсорбции положительных ионов пробы на стенке. Обработка таких пиков трудна, а часто невозможна. [3]
Диффузия молекул пробы, включая инертные вещества, в движущемся элюенте отличается от диффузии в неподвижном элюенте. [4]
Рассмотрим молекулу пробы в процессе ее перемещения по колонке при попеременном пребывании в газовой и жидкой фазах. Если исключить эффекты многоканальное пути, то существуют три фактора, определяющие более или менее быстрый выход молекулы пробы из колонки в сравнении с другими подобными ей молекулами. Эта молекула за период стадии может более или менее продолжительно оставаться в жидкой или в газовой фазе. Наконец, скорость ее в газовой фазе бывает выше или ниже средней, что происходит, вследствие диффузии в направлении потока или перемещения его со скоростью выше или ниже средней скорости газа. Даже в отдельной трубе с равномерным потоком имеет место распределение скорости по поперечному сечению. Колебания скорости приводят к соответствующему изменению числа переходов между фазами. [5]
В этом случае молекулы пробы задерживаются исключительно внутри мицелл. [6]
В КЗЭ белков между молекулами пробы и стенками капилляра могут возникнуть сильные, в основном электростатические, взаимодействия. Они происходят между отрицательно заряженными сила-нольными группами поверхности и положительно заряженными функциональными группами пробы. Некоторую дополнительную роль могут играть также неспецифические взаимодействия с образованием водородных мостиков или ван-дер-ваальсовы взаимодействия. Адсорбция молекул белков на стенках капилляра может отрицательно сказываться на разделении при КЭ и поэтому нежелательна. Она приводит к ухудшению воспроизводимости времен миграции, уширению и асимметрии пиков, и даже к необратимой адсорбции компонентов пробы. При этой операции молекулы, адсорбированные на стенках капилляра, удаляются, и воспроизводимость системы улучшается. Существует несколько возможностей подавления нежелательных взаимодействий между белками и стенками капилляра. [8]
При электростэкинге, однако, концентрация молекул пробы во время процесса ввода падает на входе в капилляр до достижения равновесного состояния. Это будет представлять проблему для ионов с малой подвижностью, поскольку в этом случае допустимая длина вводимой зоны пробы будет превышена прежде, чем будет достигнуто равновесное состояние. В этом случае достигается очень незначительное концентрированно пробы. [9]
![]() |
Спектрофотометр Бекман, модель DU-2, для ультрафиолетовой и видимой. [10] |
Флуорометр состоит из источника света для возбуждения молекул пробы до высоких энергетических состояний и монохроматора для выделения только света флуоресценции. Для возбуждения флуоресценции обычно применяют ультрафиолетовое излучение. Поэтому во флуорометрах используют водородные или ртутные лампы и ксеноновые дуги. Выделение узких спектральных интервалов этих источников достигается применением фильтров или монохроматоров. В качестве приемников излучения применяют фотоумножители или фотоэлементы, на выходе которых включают измерительный стрелочный прибор, осциллограф или самописец. [11]
Предложен флуоресцентный метод детектирования, основанный на возбуждении молекул пробы ( 3-частицами от 63М1 - радио-активного источника, так называемый детектор 3-индуцированной флуоресценции. [12]
Предложен флуоресцентный метод детектирования, основанный на возбуждении молекул пробы р-частицами от 63М1 - радио-активного источника, так называемый детектор fj - индуцирован-ной флуоресценции. [13]
Появление градиента напряженности электрического поля в зоне перемещения молекул пробы определяется ионной силой ( или концентрацией) буфера. Если электропроводностью зоны пробы нельзя пренебречь по сравнению с электропроводностью буфера, это приводит к уширению полос. Эффект усиливается с ростом различия в подвижностях ионов пробы и буфера. [14]
Эта модель называется моделью вытеснения и предусматривает конкуренцию между молекулами пробы и растворителя за место на поверхности адсорбента. [15]