Cтраница 1
Монохроматоры возбуждения и испускания со светосильными решетками позволяют выбирать оптимальный режим в отношении длины волны. [1]
![]() |
Схема калибровки спектрометра флуоресценции в ультрафиолетовой области. [2] |
Ширины щелей монохроматора возбуждения устанавливаются одинаковыми и меняются при его сканировании так, чтобы сигнал счетчика оставался постоянным. Необходимо, чтобы полная ширина полосы, проходящей через монохроматор возбуждения, была всегда меньше АЯ, так чтобы вся полоса длин волн, пропускаемых монохроматором М, попадала на фотоумножитель Р2, когда длины волн двух монохроматоров совпадают. [3]
Некоторые исследователи предлагают использовать для монохроматоров возбуждения призменные приборы, так как обычно люминесценция возбуждается в коротковолновой области, где дисперсия кварца больше, поэтому можно получить более чистый возбуждающий свет. Наиболее идеальным устройством, использующим, преимущества обоих типов приборов, являются двойные монохрома-торы, состоящие из комбинации решетки и призмы. Решетка дает хорошее разрешение, а призма отсекает ненужные спектральные порядки, а также рассеянный свет нежелательных длин волн, сильно отличающихся от нужной длины волны. Такие приборы, конечно, значительно дороже и для многих целей не являются необходимыми. [4]
Чтобы измерить спектры возбуждения флуоресценции раствора с помощью однолучевого спектрофлуориметра, устанавливают монохроматор флуоресценции ( если необходимо, при широких щелях) на длину волны максимума полосы флуоресценции исследуемого вещества. Затем монохроматор возбуждения сканируют в определенном интервале длин волн при постоянных щелях и регистрируют изменение интенсивности флуоресценции в зависимости от длины волны или волнового числа возбуждающего света. Получаемый таким путем неисправленный спектр возбуждения зависит от характеристик используемого прибора н часто очень сильно отличается от истинного спектра. [5]
![]() |
Зависимость погрешности сорбционно-фотометрического определения малахитового зеленого на сило-хроме ( 1, 2 и силикагеле ( 3, 4 от диффузного отражения. [6] |
Диффузное отражение измеряют, используя приставки для твердых образцов, которыми комплектуют все современные спектрофотометры, специализированные фотометры и колориметры, люминесцентные фотометры. В последнем случае монохроматоры возбуждения излучения и излучения выставляют на одну и ту же длину волны. [7]
![]() |
Кюветное отделение при фронтальном освещении. [8] |
На рис. 88 представлена схема одного из таких расположений. Пучок света от монохроматора возбуждения отражается от поверхности алюминиевого зеркала М и фокусируется на отверстие А, за которым располагается исследуемый образец. [9]
Если время жизни долгоживущеи люминесценции имеет тот же порядок, что и время темнового и светового периодов, долго-живущая люминесценция будет затухать в течение темнового периода до того, как будет зарегистрирована фотоумножителем, и для получения полной скорости испускания долгоживущеи люминесценции в цикле наблюдаемую интенсивность надо разделить на коэффициент фосфориметра, меньший / 3 / 4 - Коэффициент фосфориметра, или отношение наблюдаемой интенсивности долгоживущеи люминесценции в противофазе ( Я0) к полной скорости испускания долгоживущеи люминесценции ( Р), можно вычислить, сделав два допущения. При не очень узкой входной щели монохроматора возбуждения второе допущение выполняется лишь приближенно. [10]
![]() |
Кюветное отделение при фронтальном освещении. [11] |
Как и при любом способе фронтального освещения, значительное количество рассеянного возбуждающего света проходит в анализирующий монохроматор. Для работ с большой чувствительностью анализирующий монохроматор и монохроматор возбуждения должны иметь дополнительные фильтры или необходимо использовать двойные монохроматоры. Кюветы и трубочки, содержащие образец, должны иметь очень слабую флуоресценцию. [12]
Ширины щелей монохроматора возбуждения устанавливаются одинаковыми и меняются при его сканировании так, чтобы сигнал счетчика оставался постоянным. Необходимо, чтобы полная ширина полосы, проходящей через монохроматор возбуждения, была всегда меньше АЯ, так чтобы вся полоса длин волн, пропускаемых монохроматором М, попадала на фотоумножитель Р2, когда длины волн двух монохроматоров совпадают. [13]
Различают спектры испускания и спектры возбуждения. Для съемки спектра испускания при постоянной длине волны возбуждающего света монохроматор возбуждения настраивают на длину волны в полосе поглощения вещества. Свет, испускаемый веществом, диспергируется монохроматором флуоресценции, образуя спектр. Регистрируется относительная интенсивность испускания как функция длины волны или волнового числа испускаемого света. Спектр возбуждения получают, когда при фиксированной длине волны монохроматора испускания изменяют длину волны возбуждения соответствующим монохроматором и регистрируют интенсивность испускания. [14]
![]() |
Способ указания чувствительности прибора. [15] |