Cтраница 3
Рекомбинантный белок может расщепляться про-теиназами хозяйской клетки. В такой форме рекомбинантный белок уже не подвергается столь быстрой деградации. Кроме того, лишние аминокислоты иногда помогают в последующей очистке химерного белка, например с помощью иммуноаффин-ной хроматографии на колонке. При этом место соединения компонент подбирается так, чтобы по нему можно было расщепить молекулу ( химическим или ферментативным путем) и получить эти компоненты в чистом виде. [31]
![]() |
Получение соматостатина через гибридный белок с р-галактозидазой. [32] |
Иногда присоединение ведется таким образом, что кодирующая часть зукариотического гена присоединяется к кодирующей части бактериального гена так, чтобы сохранялась рамка считывания. В последнем случае образуются гибридные белки, содержащие в N-концевой части бактериальный белок или его часть, а в С-концевой части - эукариоти чес кий белок. Аминокислотная последовательность гормона известна, и исходя из нее, согласно генетическому коду, была выведена структура соответствующего искусственного гена. В результате такого соединения получен гибридный ген, в котором С-концевая часть геиа [ i-галактозидазы заменена геном соматостатина. Между геном р-галактозидазы и собственно геном соматостатина находится кодон метиоиииа. Транскрипция и трансляция этого гибрида осуществлялась за счет использования соответ-стаующих сигнальных последовательностей fi - галактозидазы. В результате образовался химерный белок, а котором соматостатин отделен от р-галактозидазной части остатком метионина. [33]