Cтраница 1
Нахманзон указывал, что это связано с низкой проницаемостью аксона для катионных соединений. [1]
Взгляды Нахманзона встречают некоторые возражения. [2]
В 1948 г. Нахманзон и др. [76] показали, что избыток ингибитора, который необходим для достижения определенной степени торможения ( при данной продолжительности инкубации), возрастает с уменьшением концентрации фермента. В одном из опытов ( рис. 10) они исследовали зависимость изменения gllE от gE и нашли, что она представляет собой прямую линию, и, следовательно, для достижения 50 % - ной инактивации необходим 25-кратный избыток ингибитора при наиболее высокой изученной концентрации фермента, в то время как при наиболее низкой концентрации для достижения той же степени торможения нужно взять 100 000 молекул ингибитора на каждую молекулу фермента. Иначе говоря, эти данные подтверждают, что реакция протекает по уравнению первого порядка. [3]
Значение имЗ - 107 мин 1, найденное Нахманзоном и Розенбергом на основании определения молекулярного веса методом седиментации и измерения удельной активности очищенного препарата фермента, отличается от других данных, приведенных в таблице. Причина этого расхождения состоит в том, что другие авторы использовали для расчета величины молярной концентрации каталитических центров, независимо от того, сколько этих центров приходится на молекулу фермента. [4]
На основании этих и подобных исследований авторы ( обычно обозначаемые как школа Нахманзона) единодушно утверждают, что блокада нервного проведения, вызванная ДФФ, объясняется угнетением холинэстеразы. Другие авторы столь же единодушно отрицают это. Некоторые их возражения приводятся ниже. [5]
Ниже приводится объяснение механизма ингибиро-вания холинэстеразы и ее реактивирования, основанное на обширных исследованиях, проведенных в последние годы Вильсоном, Нахманзоном с сотрудниками. [6]
К препарату аксона может быть добавлено большое количество ацетилхолина без заметного эффекта. Нахманзон [61 ] удовлетворительно объяснил эту аномалию существованием барьера, защищающего аксон от действия ионов; поэтому четвертичный карбамат - простигмин не влияет на проведение, в то время как третичный карбамат - эзерин вызывает блокаду ( см. стр. Нервно-мышечные соединения и ганглии лишены этой защиты и поэтому подвержены действию ионизированных соединений, таких, как ацетилхолин. [7]
В ходе исследований, естественно, возникла необходимость сопоставления свойств ферментов, находящихся в разных тканях различных видов животных. Нахманзон [1, 180] развивает представление об едином механизме участия ацетилхолина в проведении возбуждения по аксону нервной клетки, и передачи в синапсах. Если утверждения Нахманзона верны, то понятны и функции холинэстеразы аксонов, не отличающиеся от функций фермента синапсов. Основное назначение холинэстеразы нервной ткани - быстрый гидролиз выделяющегося ацетилхолина, без которого невозможна передача нервных импульсов. [8]
Однако Нахманзон [38, 39] выступает против этой точки зрения, указывая, что я распространение потенциалов действия также связано с процессами образования, накопления, высвобождения и гидролиза ацетилхоляна ( см. разд. [9]
Группа Нахманзона считает, что манометрический метод недостаточно точен для определения низких уровней холинэстеразы ( хотя Боярский и др. [4] в дальнейшем не нашли остаточной холинэстеразы и при использовании высокочувствительной методики, основанной на. Далее, они полагают, что в обработанном ДФФ нерве часто имеется избыток яда, который не находится в контакте с холинэстеразой. При гомогенизаций такой контакт происходит и - наблюдается высокая степень угнетения фермента, которая, по существу, является артефактом. Однако Крисцичелли и др. [15], Боярский и др. [4] иГилман [26] тоже приводят экспериментальные доказательства в пользу того, что избытка ДФФ обычно не бывает. [10]
Хотя субстрат ( 0 03 М) полностью защищал фермент от угнетения 5 10 - 10М ингибитора, но уже при концентрации ингибитора, равной 5 iO - sM, защитное действие отсутствовало. Аугустинссон и Нахманзон [13] показали, что аце-тилхолин в концентрации 3 10 - 3УИ почти полностью защищает фермент от угнетения 10 - 3М раствором ТЭПФ, если субстрат и ингибитор прибавлять вместе. В случае же ДФФ при постепенном повышении его концентрации до 10 - 3М защита становилась все менее и менее полной. [11]
Решить, к какому лагерю примкнуть, нелегко для тех из нас, кто не является физиологом; большинство физиологов, по-видимому, имеет четко выраженную точку зрения на этот предмет. Если согласиться с группой Нахманзона, что ДФФ действует на аксон путем угнетения холинэстеразы, то это приведет, вероятно, и к принятию их взгляда ( изложенного в гл. [12]
Авторы высказали предположение, что соединения первой группы обязаны своим блокирующим действием конкуренции с ацетилхо-лином за связь с рецептором. Это высказывание свидетельствует о радикальном изменении взглядов Нахманзона в том смысле, что он как будто принимает положение о способности ДФФ блокировать проведение по аксону иным путем, чем угнетение холинэстеразы и связанное с этим накопление ацетилхолина. [13]
Постсинаптический потенциал длится всего несколько миллисекунд, если он не усиливается дополнительным высвобождением молекул медиатора, а концентрация ацетилхолина в синапти-ческой щели уменьшается в результате диффузии и гидролиза. Медиатор инактивируется ферментом ацетилхолинэстеразой ( КФ 3.1.1.7), который был выделен в кристаллическом состоянии Нахманзоном [8] и является одним из наиболее часто обновляющихся ферментов. [14]
В литературе выражается множество сомнений, действительно ли сохраняется холинэстераза у обработанных ДФФ животных, нервное проведение у которых осталось ненарушенным. Стандартный метод Варбурга показывает, что фермента нет. Группа Нахманзона возражает, указывая на недостаточную чувствительность этого метода, и с помощью более избирательных приемов показывает наличие значительного количества остаточного энзима. Только детальное обсуждение может разрешить этот спор. [15]