Чужеродный белок
Cтраница 2
Как это ни парадоксально, но один из способов увеличения количества чужеродного белка, синтезируемого рекомбинантным микроорганизмом, состоит в поддержании уровня экспрессии его гена на среднем уровне ( так, чтобы на долю продукта приходилось примерно 5 % суммарного клеточного белка), но зато в максимальном увеличении плотности культуры. [16]
Если в животный организм попадает или вводится, минуя пищеварительный тракт, чужеродный белок, то в организме начинается образование так называемых антител, которые можно через некоторое время обнаружить в кровяной плазме. Вещество, которое вызывает образование антител, называется антигеном и часто обладает свойством давать с ними нерастворимый осадок. Возникшее под действием антигена антитело является настолько специфичным, что оно вступает в реакцию только с антигеном, но не с другими белками. Наступление реакции антиген - антитело можно доказать также и другими методами. Все это говорит о весьма большом разнообразии видов белковых молекул. Туппи ( 1959) полагает, что число их достигает одного миллиарда. [17]
С введением в обиход более действенных методов лечения, таких, как внутримышечные инъекции чужеродного белка ( например, молока), дополнивших промывания марганцовокислым калием и прижигания ляписом, длительность заболевания сократилась, исходы стали значительно лучше. Однако эти достижения не идут в сравнение с современными. Гонорея глаз в настоящее время встречается редко. Этому способствуют те многочисленные лекарственные препараты, которые теперь широко применяются, - антибиотики, сульфо-намиды и др. Немаловажное значение имеет и возросшая санитарная культура населения, а главное глубокие социальные изменения, которые произошли в связи с победой Великой Октябрьской социалистической революции. [18]
Безусловно, в этом случае данный тест, требующий длительного времени для выявления реакции и введения чужеродного белка ( вакцины или другого антигена), в свою очередь изменяет реактивность подопытного животного. Поэтому его вряд ли можно рекомендовать для включения в программу токсикологического опыта по установлению ПДК - Более логично исследовать морфологическими и биохимическими методами состояние тех систем, от функции которых зависит продукция антител. [19]
Чужеродные белки, синтезируемые наиболее активно, не обязательно столь же активно секретируются. Иногда интенсивный синтез чужеродного белка вызывает перегрузку секреторного аппарата и его блокирование. Таким образом, если нужно, чтобы данный белок непременно секретировался, то можно попытаться понизить уровень экспрессии соответствующих генов. [20]
Для идентификации белков важную роль играют иммунологические реакции. Введенный в кровяное русло животного чужеродный белок автоматически вызывает образование белкового же антитела, связывающего введенный белок. Антитело образуется из у-глобулиновой фракции белков крови. Иммунитет к новому заражению, вырабатываемый в результате заболевания некоторыми болезнями или в результате прививки, имеет в своей основе выработку антител к данным видам бактериальных или вирусных белков. Антитело дает и видимую глазом реакцию с вызвавшим его появление белком ( антигеном) - образование осадка при смешении растворов. [21]
Для идентификации белков важную роль играют иммунологические реакции. Введенный в кровяное русло животного чужеродный белок автоматически вызывает образование белкового же антитела, связывающего введенный белок. Антитело образуется из у-глобулиновой фракции белков крови. Иммунитет к новому заражению, вырабатываемый в результате заболевания некоторыми болезнями или в результате прививки, имеет в своей основе выработку антител к данным видам бактериальных или вирусных белковых токсинов. Антитело дает и видимую глазом реакцию с вызвавшим его появление белком ( антигеном) - образование осадка при смешении растворов. [22]
Промотор гена полиэдрина чрезвычайно сильный, а цикл развития вируса не зависит от наличия самого гена. Следовательно, замена последнего геном чужеродного белка с последующей инокуляцией полученным рекомби-нантным бакуловирусом культуры клеток насекомого может привести к синтеззу большого количества гетерологичного белка, который благодаря сходству систем внесения посттрансляционных модификаций у насекомых и млекопитающих будет близок ( а возможно, и идентичен) к нативной форме того белка, который интересует исследователя. Исходя из этого на основе бакуловирусов были разработаны векторы для экспрессии генов, кодирующих белки млекопитающих и вирусов животных. [24]
Один из важных и чрезвычайно избирательных методов идентификации и разделения белков - иммунологический. При повторном введении в кровяное русло животного чужеродного белка в кровяной сыворотке появляются белки, относящиеся чаще всего к классу - глобулинов ( так называемые антитела), которые специфически реагируют с тем веществом ( антигеном), к которому они выработались. Реакция антиген-антитело может быть изучена вне организма, как обычная химическая реакция, путем смешения раствора антигена с так называемой антисывороткой. Одна из типичных иммунологических реакций - преци-питиповая - состоит в выпадении осадка при соединении антигенов с антителами. [25]
Второй способ предполагает встраивание гена, кодирующего чужеродный белок, непосредственно в хлоро-пластную или митохондриальную ДНК. [26]
 |
Системы репортерных и селективных маркерных генов растительных клеток1. [27] |
После того как методика трансформации растений была полностью отработана, исследователи стали пытаться вводить различные растительные и бактериальные гены в клетки самых разных растений. Трансформированные растения проверяли на способность к синтезу чужеродного белка, проводили физиологические исследования, чтобы определить, как присутствие этого белка сказывается на всем растении. [28]
Известно, что иммуноглобулины и HL-A - белки препятствуют вторжению в организм чужеродного белка. Пероксид-дисмутаза выполняет ту же функцию по отношению к небольшим радикалам О-2 - Необходимость в такой функции должна была возникнуть с появлением кислорода в атмосфере Земли. Поскольку все три рассмотренных типа белков выполняют защитную функцию, они представляют такой случай дифференциации, при котором функции изменяются значительно, но не полностью. [29]
При разрушении или повреждении заднего гипоталамического ядра количество гуморальных антител настолько резко снижается, что часто их не удается обнаружить в крови. Иммунологическая реакция утрачивает целостность, теряет свою биологическую сущность и не обеспечивает защиты организма от чужеродного белка. В экспериментах с хроническим раздражением заднего гипоталамического ядра через вживленные электроды было установлено, что при электростимуляции этого ядра у животных наблюдается повышение интенсивности продуцирования антител. Было показано, что повреждение гипоталамического ядра не изменяет температуры тела животных и их энергетического обмена. [30]
Страницы: 1 2 3 4