Неоднородность - бумага
Cтраница 2
Помимо этого специального случая рассматриваемый метод применяется редко, так как он имеет ряд недостатков. Основная неточность этого метода возникает вследствие субъективных ошибок при вырезании по кривым линиям. Имеет значение также некоторая неоднородность бумаги. Кроме того, хроматограмма пропадает, если до вырезания пиков ее не перевести на кальку. [16]
 |
Схема определения параметров хроматографического пика. [17] |
При расчетах хроматограмм с малыми или узкими пиками рекомендуется измерять их высоту, в остальных случаях целесообразней измерять площади, поскольку при этом требования к воспроизводимости менее жесткие. Площадь пика измеряют планиметром или взвешиванием вырезанного участка диаграммной ленты. Точность методов составляет 5 % для пиков площадью 2 см2 и резко уменьшается для малых и очень узких ранних пиков; при взвешивании погрешность метода возрастает из-за неоднородности бумаги. [18]
Воспроизводимость величин RF зависит от постоянства следующих факторов: 1) качества бумаги, 2) температуры, 3) присутствия кислот или оснований, 4) присутствия неорганических солей или других чужеродных веществ, 5) снабжения растворителем, 6) расстояния между начальной точкой и источником растворителя. Точное соблюдение всех вышеуказанных факторов от опыта к опыту необходимо для получения хороших результатов. Бумаги различной плотности дают широко различающиеся величины RF. Неоднородность бумаги вызывает неравномерность течения растворителя, что также является причиной колебания в RF. Температура вызывает изменение соотношения между фазами, увеличивая или уменьшая их взаимную насыщенность. [19]
Участок спектра, площадь которого нужно определить, наносят на бумагу, вырезают и взвешивают на аналитических весах. Затем вырезают и взвешивают квадрат, соответствующий произвольной единице площади. Ошибка определения площадей таким способом вызывается неоднородностью бумаги в пределах измеряемых фигур. Недостатком этого метода является его длительность, трудоемкость i необходимость проводить измерения в условиях лаборатории. [20]
 |
Разделение АТФ, АДФ и АМФ методом непрерывного электрофореза с горизонтальным положением камеры. [21] |
Широкое распространение метода бумажного электрофореза обусловлено такими свойствами бумаги, как механическая прочность, способность удерживать большое количество электролита и образца, возможность придания требуемой формы, легкость применения двухмерных методов и простота элюироваиия образца. Обнаружение проводится или погружением в раствор реагента или опрыскиванием этим раствором. Однако бумага имеет и ряд недостатков: это неоднородность бумаги вдоль листа, пористость, которая удлиняет путь перемещения вещества. [22]
Для точности измерений имеет значение форма выходных кривых. В случае острых пиков ( удерживаемый объем VR мал) измерение площадей может привести к существенным ошибкам вследствие недостаточной точности измерения ширины пиков. Большие значения VR приводят к сильному размазыванию полосы и снижению концентрации в максимуме пика. Однако на точности измерения площадей сказываются колебания в скорости газа-носителя, в скорости движения ленты самописца, а также форма выходной кривой. При измерении площади планиметром форма кривой не играет роли. Метод взвешивания также дает возможность избежать влияния ее формы. Однако в этом случае ошибка возникает вследствие неоднородности бумаги по плотности, а также при взвешивании, особенно, если площади малы. Расчет / хплощади по результатам измерений высот и ширины пиков дает ошибку, величина которой связана с характеристикой кривой. Этот метод оказывается совершенно непригодным в случае кривых несимметричной формы. [23]
Страницы: 1 2