Нонапептида
Cтраница 3
 |
Синтез О1у6 - брадикинина ( Шредер. [31] |
Защищенный нонапептид ( Н 1 - 9) подвергали щелоч-йому омылению ( 2 5 час) и последующему каталитическому гид-рогенолизу. Полученный свободный нонапептид не отличался по своей активности ( на изолированной матке крысы) отбрадикинина. [32]
При расщеплении HbS трипсином, расщепляющим только ли-зил - и аргинилпептидные связи, образуется набор пептидов, из которых только один отличается по поведению при хроматографировании и электрофорезе от набора пептидов гидролизата трипсина НЬА. В этом нонапептиде из HbS имеется нейтральный остаток валина там, где в нонапептиде из НЬА находится отрицательно заряженный остаток-глутаминовой кислоты. [33]
При расщеплении HbS трипсином, расщепляющим только ли-зил - и аргинилпептидные связи, образуется набор пептидов, из которых только один отличается по поведению при хроматографировании и электрофорезе от набора пептидов гидролизата трипсина НЬА. В этом нонапептиде из HbS имеется нейтральный остаток валина там, где в нонапептиде из НЬА находится отрицательно заряженный остаток глутаминовой кислоты. [34]
Вазопрессин и окситоцин синтезируются в гипоталамусе, перемещаются в заднюю долю гипофиза, а затем секретируются в кровяное русло. Они представляют собой нонапептиды, причем у обоих гормонов между первым и шестым цистеинами имеются дисульфидные мостики. [35]
Полученный таким образом частично защищенный нонапептид ( I 1 - 9) превращали в свободный нона-пептид ( К 1 - 9) каталитическим гидрогенолизом под давлением в смеси ледяной уксусной кислоты с метанолом в присутствии палладия. [36]
При расщеплении HbS трипсином, расщепляющим только ли-зил - и аргинилпептидные связи, образуется набор пептидов, из которых только один отличается по поведению при хроматографировании и электрофорезе от набора пептидов гидролизата трипсина НЬА. В этом нонапептиде из HbS имеется нейтральный остаток валина там, где в нонапептиде из НЬА находится отрицательно заряженный остаток-глутаминовой кислоты. [37]
При расщеплении HbS трипсином, расщепляющим только ли-зил - и аргинилпептидные связи, образуется набор пептидов, из которых только один отличается по поведению при хроматографировании и электрофорезе от набора пептидов гидролизата трипсина НЬА. В этом нонапептиде из HbS имеется нейтральный остаток валина там, где в нонапептиде из НЬА находится отрицательно заряженный остаток глутаминовой кислоты. [38]
Последний получали взаимодействием Cbo-Cys ( Bzl) - Туг-ОН ( D 1 - 2) и этилового эфира изолейцина ( метод смешанных ангидридов) с последующим гидразинолизом в растворе метанола. Защищенный пептид ( G 1 - 9) выделен с выходом 62 %; после удаления защитных групп окисление свободного нонапептида проводили в условиях, описанных дю Винье. [39]
Омыление его и дальнейшая конденсация кристаллической кислоты ( F 11 - 14) с F 15 - 19 ( карбодиимидным методом или методом смешанных ангидридов) привели к полностью защищенному нонапептиду ( G 11 - 19), представляющему собой оранжевый порошок, который легко очищается хроматографией на колонке; / г-фенилазокарбобензоксигруппа и обе нитрогруппы удаляли каталитическим гидрированием. [40]
СЬо-Phe-Arg ( NO2) - Pro-OMe; это соединение использовали в качестве исходного вещества в синтезе Рпе7 - А 8 - Рго9 - брадикинина. Полученный после удаления карбобензоксйгруппы обработкой бромистым водородом в ледяной уксусной кислоте эфир трипеп-тида конденсировали с Cbo-Phe-Ser-Ns, образовавшийся метиловый эфир карбобензоксипентапептида декарбобензоксилировали бромистым водородом в трифторуксусной кислоте, а продукт реакции при взаимодействии с Cbo-Arg ( NO2) - Pro-Pro-Gly - NHNH2 дал защищенный нонапептид. [41]
Полученный таким образом частично защищенный нонапептид ( I 1 - 9) превращали в свободный нона-пептид ( К 1 - 9) каталитическим гидрогенолизом под давлением в смеси ледяной уксусной кислоты с метанолом в присутствии палладия. Синтетический нонапептид не отличается по биологической активности от природного брадикинина, полученного с помощью трипсина. [42]
В этом синтезе получение карбобензоксипептидов со свободными карбоксильными группами ( В 4 - 5, D 3 - 5 и D 6 - 8) осуществляли конденсацией n - нитрофениловых эфиров карбобензоксиаминокислот или карбобензоксипептидов со свободными аминокислотами или пептидами в смеси диоксана, воды и триэтиламина. С-Концевой тет-рапептид ( F 6 - 9) получали взаимодействием / г-нитрофенило-вого эфира ( D 6 - 8) с n - нитробензиловым эфиром нитро-ь-арги-нина карбодиимидным методом и последующим декарбобенз-оксилированием. Трипептид ( Е 3 - 5) ацилировали по аминогруппе азидом, полученным из Cbo-Arg ( NO2) - Pro - NHNH2 ( метод получения гидразида не приведен), а образовавшийся пен-тапептид ( F 1 - 5) конденсировали с эфиром тетрапептида ( F 6 - 9) карбодиимидным методом. Удаление блокирующих групп у полностью защищенного нонапептида осуществляли каталитическим гидрогенолизом, а полученный синтетический бра - - дикинин очищали электрофорезом. [43]
Трипептид ( С 17 - 19) гидрировали в присутствии катализатора, затем к нему последовательно присоединяли методом n - нитрофениловых эфиров два остатка е-тозил-сс-карбобензокси - лизина. Полученный пентапептид ( Е 15 - 19) очищали противо-точным распределением ( 405 переносов), гидрировали и. Попытка провести гидролиз в более жестких условиях ( увеличение времени реакции) привела к глубокому разрушению молекулы, Нонапептид ( Н 11 - 19) был получен также другим путем, исходя из F И - 14 и H-Lys ( Tos) - Lys ( Tos) - Arg ( Tos) - Arg ( Tos) - Pro-OH ( конденсация в ацетонитриле, содержащем триэтиламин) ( ср. [44]
Ключевое промежуточное соединение - Cbo-Cys ( Bzl) - Tyr-Ileu-Glu ( NH2) - Asp ( NH2) - Cys ( Bzl) - Pro-Cit-Gly - NH2 - было получено Бодански и Биркхаймером [270] ( ср. Однако замещенные гепта -, окта - и нонапептиды содержали трудноотделимые примеси. [45]
Страницы: 1 2 3