Cтраница 1
Нуклеозиддифосфаты и нуклеозидтрифосфаты часто объединяют термином нуклеозидполифосфаты. Все фосфорилированные нуклеотиды входят в группу нуклеотидов, точнее - мононуклеотидов. [1]
Нуклеозиддифосфаты и нуклеозидтрифосфаты часто объединяют термином нуклеозидполифосфаты. Все фосфорилированные нуклеозиды называются нуклеотидами, точнее - м о н о н у-клеотидами. [2]
Нуклеозиддифосфаты и нуклеозидтрифосфаты превращаются друг в друга под действием нуклеозиддифосфаткиназы в отличие от монофосфаткиназ, например, ИДФ Н - АДФ - - ИТФ АДФ, отсюда общее уравнение для синтеза рибо - и дезоксирибонуклеотидов ХДФ УТФ - - ХТФ УДФ, где х и у - любые рибо - и дезоксирибо-нуклеотиды. [3]
Нуклеозиддифосфаты и нуклеозидтрифосфаты часто объединяют термином нук. Все фосфорилированные нуклео-тиды включаются в группу нуклеопшдов, точнее мононуклеотидов. [4]
Нуклеозиддифосфаты можно отделить от других продуктов гидролиза РНК, используя то обстоятельство, что на каждый нуклеозидиый остаток приходится довольно высокий ионный заряд. [5]
Нуклеозиддифосфаты отделяют от динуклеотидов с помощью электрофореза на бумаге. Бумагу высушивают па воздухе и выявляют соединения в УФ-свето. Зоны нуклеозиддифосфатов, которые движутся быстрее дпнуклео-тидов, вырезают и элюируют водой. [6]
Донорами гликозильных остатков для синтеза полисахаридов являются нуклеозиддифосфаты: УДФ-глюкоза, АДФ-глюкоза, ГДФ-глюкоза и др. Свободная энергия связи между глико-зильными остатками и нуклеозиддифосфатами относительно высокая ( - 30 кДж / моль), и, следовательно, реакции синтеза полисахаридов носят характер замещения, переноса, а не присоединения молекул. [7]
Моносахариды, образовавшиеся в процессе фотосинтеза, могут превращаться в другие моносахариды / Важную роль в этих взаимопревращениях играют их эфиры - фосфаты и нуклеозиддифосфаты. [8]
В 1955 г. был открыт фермент полипуклеотидфосфорилаза, который катализирует этот процесс. Как показано на рис. 27, этот фермент отщепляет от полинуклеотидной цепи один мононуклеотид за другим с одновременным присоединением второй молекулы фосфорной Кислоты, так что образуются свободные нуклеозиддифосфаты. Подобный процесс обычно называют фосфоролизом - при этом происходит разрыв одной связи с присоединением по месту разрыва молекулы фосфорной кислоты. [9]
На рис. 166 представлено окончательное расположение хроматографических пятен. По-видимому, 0 3 М сульфат аммония легко вытесняет все нуклеозиддифосфаты из ионной связи с PEI, и решающую роль в определении скорости миграции начинает играть сорбция оснований на целлюлозе. Метильная группа тимина препятствует сорбции. [10]
Ферменты этого типа чрезвычайно широко распространены в живой природе, что свидетельствует об их большом значении в метаболизме ( см. также фиг. Фермент из тканей позвоночных представляет собой полимер ( мол.вес. около 10), сравнительно легко диссоциирующий на субъединицы с сильно пониженной ферментативной активностью. На активность фермента влияют многие соединения - аллостерические регуляторы; в основном это пуриновые нуклеозиддифосфаты. С обоими никотинамидными кофер-монталш активность фермента практически одинакова. Иными свойствами обладает фермент, выделенный из микроорганизмов: он специфичен в отношении либо НАД, либо НАДФ и сравнительно малочувствителен к действию аллостерических регуляторов. [11]
Для этого следует подобрать подходящую нуклеазу. Для гидролиза РНК применяют обычные РНК-азы. РНК-аза Т2 из такадиастазы действует подобно щелочи, освобождая нуклеозид-3, 5 -дифосфат, содержащийся на левом конце молекулы. Более специфические РНК-азы - панкреатическая РНК-аза и РНК-аза TI из такадиастазы - отщепляют как концевые нуклеозиддифосфаты, так и более крупные фрагменты, содержащие фосфатные группы у 3 - и 5 -конца. Эти соединения можно отделить от остальных продуктов реакции, таюке используя различия в их зарядах; однако для этого требуется более совершенный метод, поскольку в гидролизате обычно имеются олигонуклеотиды, заряды которых меньше пли больше зарядов динуклеозиддифосфатов либо равны им. На первом этапе продукты гидролиза разделяют по величинам их суммарных отрицательных зарядов с помощью хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе или ДЭАЭ-сефадексе в 7 М мочевине. Если хроматографируют при рН 7 8, то концевое звено за счет того, что оно имеет две фосфомоноэфирные группировки, будет элюироваться вместе с фрагментами нуклеотидной цепи, содержащими на два нуклеотидных остатка больше, но несущими тот же суммарный отрицательный заряд. В этих условиях вторичная диссоциация фосфатных групп подавлена, и заряд концевого звена отличается на одну единицу от заряда других полимерных фрагментов. [12]
Получение полимерных соединений из моносахаридов сопровождается созданием гликозидных связей. Растительные и животные ткани содержат ферменты - трансгл икозилазы, которые осуществляют перенос гликозильных остатков на акцепторы - сахара. При этом образуются более сложные углеводы - сахароза, лактоза, крахмал, гликоген, целлюлоза и другие. Донорами гли Козильных остатков служат фосфаты и нуклеотиды Сахаров, олигосахариды и полисахариды. Термодинамические данные позволяют считать наилучшими донорами для образования сложных углеводов нуклеозиддифосфаты Сахаров, поскольку они имеют высокую отрицательную энергию гидролиза. [13]
Гомополимеры - полинуклеотиды, построенные из одного и того же нуклеотид-ного звена. Известно несколько типов реакций образования гомополимеров. Так, в присутствии ДНК-матрицы, ионов Мп 2, АТФ образуется поли - А и выделяется гшрофосфат. При этом поли - У и поли - Ц образуются в значительно меньшей степени, ачполи - Г почти не образуется. В качестве затравки денатурированная нагреванием ДНК по сравнению с нативной ДНК более эффективна, В этом случае в качестве исходного материала для синтеза гомополимеров используется нуклео-зидтрифосфат. Фермент полирибонуклеотидфосфорилаза успешно синтезирует любой из гомополимеров, используя для этой цели нуклеозиддифосфаты. [14]