Cтраница 2
А - образование комплекса антиген-антитело между поливалентным антигеном и одновалентным антителом ( антитело взято в избытке); Б - - образование преципитатов при неспецифической агрегации комплексов антиген - антитело; В-растворимый комплекс при избытке антигена. [16]
Наиболее простой способ исследования растворимых антигенов в реакции преципитации заключается в том, что исследуемый раствор смешивают со специфической иммунной сывороткой, а затем наблюдают образование преципитата. Эта реакция применяется главным образом для определения титров. Только в том случае, когда реакция ставится с иммунной сывороткой, специфичной к данному белку, величина титра может служить характеристикой белкового препарата. [17]
Прежде чем вводить химическое соединение в реакцию, необходимо подобрать концентрации, добавление которых не вызывало бы денатурацию сывороточных белков и тем самым не имитировало бы образования специфического преципитата. При подборе таких концентраций используют свежую сыворотку или плазму крови здоровых людей или больных из контрольной группы ( с аллергозами другой этиологии), двукратные водные разведения гаптена и те же объемы обоих ингредиентов системы, что и при постановке самой реакции. Однако в отличие от основного опыта при подборе концентраций каждый раствор гаптена добавляют к новой порции сыворотки или плазмы. После установления максимальной концентрации, не вызывающей денатурации белков, готовят из нее восемь двукратных рабочих разведений гаптена, которые проверяют с новой порцией сыворотки или плазмы уже по схеме постановки реакции. В табл. 43 приведены примеры подбора концентраций для ряда химических аллергенов. [18]
Если стекло склянки выщелачивается, среда быстро портится. Иногда наблюдается образование легкого преципитата из гематина; тогда содержимое перед употреблением надо встряхнуть. При кислой реакции среды образуется слишком обильный осадок, вследствие чего качество среды страдает. [19]
Учет результатов производится визуально, а также при помощи лупы. При положительной реакции отмечается образование ясного преципитата хлопьев. Отрицательный результат, когда преципитат отсутствует, в частности в контрольной пробирке. [20]
Для решения вопроса о том, являются ли антитела сывороточными глобулинами или же они только связаны с этой фракцией, можно использовать специфические методы очистки антител. Обычно эти методы включают два основных этапа: 1) образование преципитата антиген-антитело и 2) диссоциацию преципитата и выделение чистого антитела. Первые успешные опыты этого рода были предприняты Фелтоном [42], который преципи-тировал антигенные полисахариды пневмококков соответствующей иммунной сывороткой, а затем разлагал преципитат, обрабатывая его гидроокисью бария. При такой обработке антитела переходят в раствор, нерастворимые же бариевые соли полисахаридов остаются в осадке. В лаборатории автора для получения чистых антител преципитаты азобелков обрабатывались разведенными кислотами в присутствии нейтральных солей. Растворы антител, полученные при помощи этих методов, содержат глобулины, не отличающиеся по свойствам от описанных выше нормальных глобулинов. Дальнейшие исследования показали, что больше 90 % выделенных подобным образом глобулинов осаждается соответствующим антигеном. Это весьма убедительно подтверждает, что данные глобулины действительно идентичны с настоящими антителами. [21]
Азотнокислотная переработка фосфатов отличается рядом технологических и экономических преимуществ по сравнению с другими методами - сернокислотным, фосфорнокислотным и солянокислотным. Обработка азотнокислотной вытяжки по углекислотному методу аммиаком и двуокисью углерода приводит к образованию преципитата при одновременной конверсии азотнокислого кальция в углекислый кальций и нитрат аммония. Таким образом, азотная кислота переходит в нитрат аммония, представляющий собой ценное удобрение. В результате этого получающийся в составе продукта преципитат обходится по цене значительно более низкой, чем при получении другими методами. [22]
В первом случае уровень загрязнений пластины должен быть достаточным для того, чтобы примесь при той или иной разумной температуре образовывала пересыщенный твердый раствор. Тогда в процессе охлаждения загрязненной пластины этот пересыщенный раствор быстро распадается с образованием преципитатов в области, где сформированы центры для их гетерогенного зарождения. [23]
Тем не менее антитела к метаниловой кислоте обладают сильным сродством к этой кислоте, так как они соединяются с этим гаптеном, прикрепленным к белку, и образуют преципитат, хотя свободную ме-таниловую кислоту не осаждают. Антитела анти - М могут соединяться и с самой метаниловой кислотой, но без образования преципитата. [24]
При комнатной температуре кристаллы кремния представляют собой пересышенные твердые растворы. Увеличение температуры кремния 300 С Приводит к диффузии атомов кислорода к поверхности либо к образованию преципитатов SiOx или SiyOx в объеме кристаллов. Кластеризация кислорода вызывает существенные изменения физических свойств кремния и интенсивно изучается в последнее время. [25]
Геттерирование и формирование преципитатов атомов никеля и кобальта на поверхности можно понять, проанализировав данные но диффузии и растворимости этих элементов. Поскольку растворимость кобальта ниже, чем никеля, при практически равных значениях D Геттерирование и образование преципитатов для атомов кобальта происходит медленнее по сравнению с атомом никеля. [26]
Для реакции преципитации оптимальными являются те значения температуры, рН и ионной силы среды, которые существуют в организме. Ход реакции преципитации зависит от ионной силы раствора: с увеличением концентрации соли выше 0 15 М постепенно замедляется образование преципитата. В то же время рН среды в довольно широком диапазоне, от 6 5 до 8 6, не влияет на реакцию преципитации. [27]
Когда вытяжка получена разложением фосфата 50 % - ной азотной кислотой, взятой с избытком в 20 % по отношению к стехиометриче-скому количеству, то раствор, образующийся при преципитировании этой вытяжки, несколько не насыщен по отношению к монокальций-фосфату, если избыточная кислота не нейтрализована аммиаком. Таким образом, применение избытка азотной кислоты для получения вытяжки не предотвращает выделения монокальцийфосфата вследствие нейтрализации ее полностью при образовании преципитата. [28]
Аммиак является также наилучшим средством симметризации а-гало-генмеркуркетонов [152], которые гидролизуются всеми водными растворами других симметризаторов. Для предотвращения вредного действия избытка аммиака, снижающего выход меркур-бис-кетона, раствор аммиака в дихлорэтане или хлороформе приливают к раствору галогенмеркуркетона до прекращения образования преципитата. [29]
Центрифугируя реакционную смесь при положительной реакции преципитации, можно удалить образовавшийся преципитат и определить, какой из вух компонентов системы, антиген или антитело, остался в надосадочной жидкости. Тем самым удается выяснить, в избытке какого компонента проходила реакция. Образование преципитата в первом случае свидетельствует об избытке антигена, во втором - об избытке антител. Подобным образом можно определить оптимальное соотношение антиген - антитело для положительной реакции преципитации. [30]