Cтраница 1
Общий объем колонки, определяемый как объем от верхней границы набивки до конца колонки, представляет собой сумму объема набивки и мертвого объема колонки. Объем набивки в свою очередь слагается из объема носителя, объемов неподвижной и подвижной фаз; объем подвижной фазы часто называется также свободным объемом колонки ( free column volume), вакантным ( void) или промежуточным ( interstitial) объемом. [1]
Общий объем колонки, а также объемы набивки и носителя - параметры, значения которых непосредственно не нужны для расчета ВЭТТ или данных по распределению. Объем набивки используется при расчете мертвого объема колонки исходя из общего ее объема, в то время как объем носителя полезно знать для проверки результатов расчетов общего и мертвого объемов колонки. [2]
Для определения общего объема колонки ее заполняют водой до верхней границы набивки, затем взвешивают воду и рассчитывают объем колонки, исходя из плотности воды при данных экспериментальных условиях. [3]
![]() |
Очистка гемоглобина ( /.| Разделение смеси ДНК ( / и фенола ( 2 на сефадексе. [4] |
Колонка: 2 мм X 30 см; общий объем колонки - 94 мл; элюент - вода ( 48мл / ч); объем образца - - 5 мл; образец содержит 20 мг ДНК в воде, насыщенной фенолом. [5]
Если хроматографическая колонка заполнена пористым материалом, то часть общего объема колонки образует пространство между частицами материала, остальной объем занимает, во-первых, непористый скелет, а во-вторых, его поры. Подвижная фаза с разделяемыми веществами может свободно протекать только в объеме между частицами, в поры молекулы веществ проникают лишь в результате диффузии. [6]
Генри; Г - истинный коэффициент Генри; я - доля общего объема колонки, занятая газовой фазой ( см. разд. V); А:, - доля общего объема колонки, занятая сорбентом. [7]
Генри; Г - истинный коэффициент Генри; х - доля общего объема колонки, занятая газовой фазой ( см. разд. V); к1 - доля общего объема колонки, занятая сорбентом. [8]
Величины FSB, вычисленные по этим формулам, обычно составляют - 5 % общего объема колонки. На практике найденный таким образом объем увеличивают в 1 5 - 2 раза, так чтобы первоначально пробка раствора заполняла 7 - 10 % общей длины капилляра. Однако другие исследователи используют в 3 - 5 раз меньшие количества раствора. Так, Штруппе [3] считает достаточным такое количество раствора, которое соответствует пробке длиной 1 - 2 м на 100 м капиллярной трубки. [9]
Для фракционирования декстрана были использованы колонки объемом FJ от 800 до 3000 мл, причем объем образца составлял от 5 до 7 5 % общего объема колонки. Как правило, разделяющая способность не зависит от концентрации образца, если только вязкость раствора не слитком велика. Чтобы избежать осмотических нарушений и уменьшения скорости вытекания, г отя образца не должна, как правило, превышать 10 сп. Для декстранов с обычными молекулярными весами это соответствует 3 - 10 % - ным растворам. [10]
Генри; Г - истинный коэффициент Генри; х - доля общего объема колонки, занятая газовой фазой ( см. разд. V); к1 - доля общего объема колонки, занятая сорбентом. [11]
Генри; Г - истинный коэффициент Генри; я - доля общего объема колонки, занятая газовой фазой ( см. разд. V); А:, - доля общего объема колонки, занятая сорбентом. [12]
Эти величины отвечают объему раствора, пропущенного через колонку до вымывания хроматографиче-ского пика. V и Vъ обозначают соответственно объем незаполненной колонки и общий объем колонки; С и а - параметры равновесия, определения которых были даны в разделах В. С 1); а V / VV Понятно, что количество исследуемой пробы должно быть небольшим и что колонка имеет такую длину, чтобы число теоретических тарелок было достаточным, скажем 20 и больше. [13]
Во многих случаях достаточно оценить мертвый объем колонки на основе геометрической формы соответствующей части колонки. Если необходимо, его можно определить с большей точностью, определив общий объем колонки и объем набивки: разность этих объемов равна мертвому объему колонки. [14]
Пористость - это та часть объема колонки, которая остается доступной подвижной фазе после упаковки колонки. Она определяется суммой двух величин, одна из которых представляет собой отношение объема не занятого сорбентом пространства к общему объему колонки. Вторая величина обусловлена высокой пористостью сорбентов, имеющих большую удельную площадь поверхности. Это доступное подвижной фазе пространство внутри частиц обычно составляет 20 - 30 % объема колонки. [15]