Cтраница 1
Анализ концевых групп является классическим методом химии белков, в котором N - и С-концевые аминокислоты каждой полипептидной цепи определяются с помощью специфических реагентов или ферментативным гидролизом. Во многих случаях бывает трудно рассчитать число полипептидных цепей на основе анализа концевых групп только потому, что выход концевой аминокислоты после ферментативного гидролиза или химической реакции иногда оказывается очень низким. Другая трудность при идентификации полипептидных цепей с помощью анализа концевых групп заключается в том, что аминогруппа N-концевой аминокислоты может быть заблокирована ацетильной группой. [1]
Анализ концевых групп иногда облегчается, если предварительно ввести концевую группу, содержащую легко определяемый элемент. Как уже было упомянуто, этот метод в некоторых случаях применим к виниловым полимерам, а также может быть использован при исследовании конденсационных полимеров. [2]
Анализ концевых групп применяется главным образом для определения молекулярных весов и для исследования кинетики полимеризации и деполимеризации. Для определения молекулярного веса методом анализа концевых групп нужно знать строение концевых групп и их число в молекуле. В принципе можно также использовать для определения молекулярных весов и внутренние группы, если известно их число в молекуле, однако примеров подобных определений в литературе нет. [3]
Анализ концевых групп часто также пригоден для исследования передачи цепи. Степень завершенности реакции передачи цепи можно определить, используя передатчики цепи, содержащие легко анализируемые элементы. Снай-дер, Стюарт, Аллен и Дирборн [61] применяли додецилмеркаптан и определяли содержание серы окислением ее до сульфата в бомбе Парра. Результаты показывают, что на молекулу полимера приходится приблизительно один атом серы. [4]
Анализ концевых групп белков будет рассмотрен очень кратко, так как полное обсуждение этой области выходит за рамки данной главы. Наибольший интерес представляет анализ свободных аминогрупп. [5]
Трудности анализа концевых групп сильно увеличиваются при исследовании полимеров с молекулярной массой выше 50 000, так как доля функциональных групп в этом случае будет очень малой, поэтому ошибка определения возрастает. [6]
Описан [1679] анализ концевых групп цепей привитого полиметилметакрилата, выделенного из привитых сополимеров с шерстью. По этому методу привитые полимеры практически полностью выделяли из анализируемого материала, вываривая в соляной кислоте. [7]
Второй метод анализа концевых групп основан на расщеплении 1 2-гликольных группировок йодной кислотой ( Джексон и Хадсон, см. 29.4); если в сахаряом остатке присутствует более двух вицинальных гидроксильных групп, то при этом образуется муравьиная кислота, количество которой можно определить титрованием. Молекулярные веса различных образцов амилопектина колеблются от 500 000 до 1000000, и таким образом определение концевых групп путем окисления йодной кислоты указывает на присутствие одного концевого глю-козного остатка на 25 - 27 структурных единиц полимера, и, следовательно, молекула амилопектина является разветвленной. [8]
Второй метод анализа концевых групп основан на расщеплении 1 2-гликольных группировок йодной кислотой ( Джексон и Хадсон, см. 29.4); если в сахарном остатке присутствуют три и более свободные гидроксильные группы, то при этом образуется муравьиная кислота, количество которой можно определить титрованием. Молекулярные веса различных образцов амилопектина колеблются от 500000 до 1000000, и таким образом определение концевых групп путем окисления йодной кислоты указывает на присутствие одного концевого глю-козного остатка на 25 - 27 структурных единиц полимера, и, следовательно, молекула амилопектина является разветвленной. [9]
Произведенный Зангером [25] анализ концевых групп не подтверждает ни одного из приведенных выше выводов, так как глицин и фенилаланин занимают N-концевые положения в эквимолекулярном соотношении. [10]
Наиболее распространенным способом анализа концевых групп является неводное потенциометрическое титрование, в меньшей степени применяются ИК -, ЯМР - и масс-спектроскопия. Концевые группы можно также определить с помощью специфических реакций с радиоактивными реагентами, хромофорными веществами ( красителями) или реагентами, содержащими такие элементы, которые отсутствуют в анализируемом полимере. [11]
В то время как анализ концевых групп конденсационных полимеров можно часто использовать для определения молекулярного веса ( при условии, что определенные предположения обоснованны), в случае аддицион-ных полимеров обычно этого нельзя сделать. Полимеры часто имеют столь высокий молекулярный вес, что методы анализа концевых групп становятся весьма неточными. Кроме того, число и вид концевых групп не всегда могут быть точно предсказаны. Таким образом, определение концевых групп в аддиционных полимерах проводят в основном для выяснения механизма полимеризации. В таких случаях для установления числа концевых групп в молекуЛе необходимо определить молекулярный вес другими способами и использовать данные, полученные при определении концевых групп. [12]
Экспериментальными методами, аналогичными анализу концевых групп и измерению осмотического давления, определяется число молекул, так как каждая молекула оказывает один и тот же эффект независимо от ее размера. [13]
Следует отметить важное значение метода анализа концевых групп для изучения механизма процессов термической или гидролитической деструкции; по изменению концентрации определенного вида групп можно судить о кинетике протекания процесса. [14]
Существуют химические и физические методы анализа концевых групп. [15]