Огстон
Cтраница 1
Огстон предположил, что в активном центре аконитазы ( фермента, действующего на новообразованный цитрат) имеются три точки для связывания молекулы цитрата и что эта молекула присоединяется к активному центру фермента специфическим образом в трех этих точках сразу. Как видно из рис. 2, присоединение молекулы цитрата к трем точкам может реализоваться только одним-единственным путем, и это объясняет нам, почему метка обнаруживается только в одной из двух карбоксильных групп а-кетоглута-рата. [2]
Огстон ( 1948) изучил этот вопрос и предположил, что лимонная кислота теряет свою симметрию при связывании с асимметричной поверхностью фермента тремя точками. Эта гипотеза была вскоре подтверждена. [3]
Огстона [571] и мультиплетной теории катализа Баландина [303], рассматривают на поверхности катализатора несколько родов центров. [4]
Однако Огстон [24] первым показал, что асимметричный реагент, такой как фермент, может реагировать с симметричным соединением, таким как лимонная кислота, различая его идентичные группы. Лимонная кислота ( 24) принадлежит к классу молекул типа Caabc, для которых отмеченный звездочкой атом углерода является прохиральным центром. В молекуле лимонной кислоты группы а ( - СН2СО2Н) являются энантиотопными и по отношению к плоскости, проходящей через НООС - С-ОН, представляют собой объекты зеркального отражения. В L-фенилал анине ( 28) две группы а являются протонами, а прохиральным центром является атом углерода С-3. Два протона в соединении ( 28) диастерео-топно взаимосвязаны благодаря хиральности атома углерода С-2, содержащего - аминогруппу. В принципе, диастереотопные группы можно различить физическими методами и как энантиотопные, так и диастереотопные группы различаются в хиральном окружении, что и делает фермент. [5]
Гипотезу Огстона можно рассматривать как одно из конечных следствий теории полисродства Бергмана, Зерваса и Фру-тона [32], которая была выдвинута для объяснения антиподной специфичности некоторых протеолитических ферментов. [6]
Теория Огстона объясняет, каким образом лимонная кислота при присоединении к аконитазе ведет себя как несимметричная молекула. Это позволяет предполагать, что лимонная кислота является промежуточным продуктом цикла Кребса. Уже получены прямые экспериментальные данные о поведении лимонной кислоты как несимметричной молекулы в присутствии фермента. Показано, что лимонная кислота является продуктом реакции, катализируемой кристаллическим конденсирующим ферментом. [7]
Джонстона - Огстона эффект 434 Дзета-потенциал 477 ел. [8]
Джонстона - Огстона после учета концентрационной зависимости подвижностей. Джилберт и Джен-кинс [26] сообщили о результатах расчетов для системы пепсин - альбумин. Распределения концентраций, предсказываемые расчетами для этой системы ( Л В С), показаны на фиг. При этом предполагалось, что диффузия отсутствует и расчет произведен для нескольких констант равновесия. Анализ этих шлирен-диаграмм особенно показателен. Как указывают авторы, первое предположение ( о том, что концентрация медленного компонента примерно равна концентрации компонента, обнаруживаемого в виде пика, движущегося вслед за фронтом комплекса) несправедливо. На диаграмме, отвечающей К 0 25 10 - 4 М, компонент В не виден, а отстающий пик соответствует только быстрому компоненту А. [9]
В 1948 г. Огстон выдвинул предположение о том, что фермент асимметрическим образом взаимодействует с симметричным субстратом, если связь с субстратом осуществляется по крайней мере в трех точках. [10]
Коулсон, Кокс, Огстон и Филпот [27] разработали ячейку, в которой образование резкой границы раствор - растворитель достигается путем отсасывания смеси в зоне границы. Когда образующаяся таким путем граница становится достаточно резкой, поток отсасываемой жидкости плавно останавливают и этот момент принимают за начало диффузии. Буг-даль [29] описал еще один вариант ячейки, используемой в аппарате Цейсе Шлирен-80, в которой подслаива-ние раствора под чистый растворитель осуществляется с помощью тефлоновой трубочки. В результате также образуется резкая граница. За последующим расширением границы в этом случае наблюдают при помощи интерферометра Рэлея-Свенссона. [11]
Еще до того как Огстон выдвинул свою теорию, некоторые данные указывали на то, что лимонная кислота не является непосредственным промежуточным продуктом цикла Кребса. [12]
Исключение влияния эффекта Джонстона - Огстона на форму седиментационной кривой экстраполяцией экспериментальных данных к С 0 является наиболее надежным, но весьма трудоемким. [13]
Для объяснения способности ферментов распознавать химически идентичные группы Огстон предложил гипотезу, согласно которой субстрат присоединяется к поверхности фермента в трех точках. Однако если учитывать, что две группы а в атоме СааЬс всегда будут различаться в отношении асимметричного агента, то трехточечное прикрепление становится необязательным. В любом случае при образовании трехмерного комплекса между субстратом, имеющим атом СооЬс, и асимметричной поверхностью фермента расположение двух групп а оказывается различным. [14]
Причина этого явления, как установили Джонстон и Огстон в 1946 г., заключается в том, что одна часть молекул медленной компоненты седиментирует вместе с молекулами быстрой компоненты, а другая часть отстает от них и движется позади границы быстрой компоненты. Таким образом, молекулы медленной компоненты имеют различные коэффициенты седиментации. В смесях, состоящих из компонентов, у которых различие в величине s невелико, этот эффект оказывается более значительным, чем в смесях, компоненты которых сильно различаются по скорости седиментации. Эффект Джонстона - Огстона может быть оценен количественно, и при анализе смесей его следует принимать во внимание. [15]
Страницы: 1 2 3