Cтраница 3
Причина этого явления, как установили Джонстон и Огстон в 1946 г., заключается в том, что одна часть молекул медленной компоненты седиментирует вместе с молекулами быстрой компоненты, а другая часть отстает от них и движется позади границы быстрой компоненты. Таким образом, молекулы медленной компоненты имеют различные коэффициенты седиментации. В смесях, состоящих из компонентов, у которых различие в величине s невелико, этот эффект оказывается более значительным, чем в смесях, компоненты которых сильно различаются по скорости седиментации. Эффект Джонстона - Огстона может быть оценен количественно, и при анализе смесей его следует принимать во внимание. [31]
Тот факт, что объем растворителя в неподвижной фазе, доступный для растворенного вещества, уменьшается при увеличении молекулярного веса последнего, позволил в ранних работах предложить простые геометрические теории ситового разделения. Согласно Порату, поры в неподвижной фазе имеют коническую форму, поэтому глубина, на которую могут проникнуть молекулы растворенного вешества, тем меньше, чем больше их радиус. Лаурент и Килландер / 6 / предложили более реалистическую модель; они допустили, что полимерные цепи, образующие матрицу неподвижной фазы, представляют собой хаотически распределенные жесткие стержни. Они использовали формулу, выведенную Огстоном / II, чтобы показать, как изменяется коэффициент распределения сферических молекул в зависимости от их радиуса, а также от концентрации стержней и радиусов последних. Порат, а также Лаурент и Килландер подтвердили свои модели экспериментально, но примененные критерии были, возможно, недостаточно чувствительны. [32]
На рис. 2.1 приведена сделанная в 1889 г. фотография группы хирургов Королевской больницы в г. Абердине ( Шотландия), где применялось распыление карболовой кислоты в воздушной среде операционной палаты по методу Листера. Эта фотография интересна с нескольких точек зрения. Метод Листера представляет лишь исторический интерес, так как, по всей вероятности, он давал небольшой эффект в плане снижения количества бактерий, находящихся в воздухе. Но фотография интересна еще и тем, что на ней мы видим хирурга Огстона ( Ogston) ( третий справа), который явился первооткрывателем стафилококковых бактерий Staphylococcus aureus, по сей день считающихся одной из главных причин инфицирования ран. [33]
При использовании / Ы - дейтероэтанола весь дейтерий обнаруживается на верхней стороне плоскости ароматического остатка кофермента ( более подробно об этом коферменте см. гл. Новый асимметрический атом углерода в NAD2H обладает / - конфигурацией. Если вместо этого использовать S-1 - дейте-роэтанол, вся метка обнаруживается в ацетальдегиде, но не в восстановленном коферменте. Эта реакция, когда кофермент и субстрат удерживаются в активном центре фермента специфическим образом, представляет собой особенно удач-пример эффекта Огстона. Фермент способен однозначно делать выбор ме-идентичными атомами водорода, связанными с прохиральным угле-атомом этанола. [34]
Эти параметры удобны тем, что они не зависят от геометрии колонки, благодаря чему удается сопоставлять данные двух опытов. Справедливость большинства из них неоднократно подтверждалась на практике. Другая зависимость lg Ve К - IgMприменялась при сравнении молекулярного веса АТФ-гуанидйнфосфотрансфераз [64], однако соответствующая калибровочная кривая была построена лишь по трем точкам. Лорент и Килландер [65] применили концепцию Огстона относительно состояния геля к проблемам гель-хроматографии и получили в высшей степени интересное соотношение, которое, однако, еще не нашло практического применения. [35]
Наряду с этим происходит вытеснение легких компонентов из придонных областей кюветы, что приводит к увеличению их концентрации, и регистрируется на седиментационной диаграмме. Сущность этого явления легко может быть понята при рассмотрении седиментации бинарной смеси: раствор легкого компонента может рассматриваться при этом как растворитель тяжелого. Неизбежный противоток растворителя при движении тяжелого компонента ко дну кюветы приводит к увеличению концентрации легкого компонента. При очень большом различии молекулярных весов компонентов этот противоток может реально наблюдаться как отрицательная седиментация легкого компонента. При седиментации полидисперсного полимера с непрерывным МБР эффект Огстона - Джонстона приводит к некоторому обогащению смеси легкими компонентами. При малых с этим обогащением обычно можно пренебречь. [36]
Наряду с этим происходит вытеснение легких компонентов из придонных областей кюветы, что приводит к увеличению их концентрации, и регистрируется на седиментационной диаграмме. Сущность этого явления легко может быть понята при рассмотрении седиментации бинарной смеси: раствор легкого компонента может рассматриваться при этом как растворитель тяжелого. Неизбежный противоток растворителя при движении тяжелого компонента ко дну кюветы приводит к увеличению концентрации легкого компонента. При очень большом различии молекулярных весов компонентов этот противоток может реально наблюдаться как отрицательная седиментация легкого компонента. В монографии Шахмана [2] описана такая отрицательная седиментация сывороточного альбумина ( so - 4 45) в присутствии сферических частиц вируса карликовой кустистости ( SD - 130), При седиментации полидисперсного полимера с непрерывным МБР эффект Огстона - Джонстона приводит к некоторому обогащению смеси легкими компонентами. При малых с этим обогащением обычно можно пренебречь. [37]