Cтраница 2
Установлено также, что восстановление дыхательной цепи СМЧ сукцинатом или НАД-Н изменяет анизотропию спектра ЭПР спиновой метки. Оказалось, что добавление АТФ к суспензии неэнергизованных СМЧ вызывает значительные изменения спектра ЭПР - АТФ улучшает растворимость гидрофобной метки в мембранах СМЧ. По-видимому, такое изменение определяется конформационными изменениями структуры мембраны. Сходное влияние АТФ наблюдается и в интактных митохондриях. ДНФ и олигомицин в концентрациях более 1 мкг на 1 мг белка ингибируют этот процесс. При малых концентрациях ( 0 1 - 0 2 мкг на 1 мг белка) олигомицин подобно аллостериче-ским активаторам усиливает индуцированные АТФ конформа-ционные переходы в СМЧ. [16]
Соединения этой группы ( класс Е) являются истинными ингибиторами дыхания; они ингибируют дыхание в интактных фосфорилирующих частицах, в которых имеет место прочное сопряжение. Эти соединения неэффективны в отношении таких дыхательных частиц, которые не обладают достаточной структурной целостностью, даже если последние и способны производить АТФ. Кроме того, эти вещества в отличие от соединений класса F ингибируют, а не стимулируют АТФ-азу частиц. Обращение потока электронов и другие протекающие в митохондриях процессы, идущие с потреблением энергии, ингибируются лишь в том случае, когда источником энергии служит экзогенный АТФ или какое-либо другое эквивалентное соединение. Ингибирования не происходит, если энергия поступает от высокоэнергетических промежуточных соединений, непрерывно образующихся in situ в процессе дыхания. Ингибиторы первой группы, представителем которой служит олигомицин, блокируют одну из первых стадий фосфорилирования. Атрактилозид, называемый также атрактила-том - представитель второй группы - блокирует систему, только когда используется экзогенный АТФ. Это соединение ингибирует поступление АДФ и АТФ в митохондрии и включение метки ( Р32) во внемитохондриальный ( но не во внутримитохондриальный) АТФ при окислительном фосфорили-ровании. Таким образом, атрактилозид ингибирует какую-то последующую стадию, а именно стадию, связанную с перемещением АДФ / АТФ в митохондрии и из них наружу. [17]