Cтраница 2
Все испытанные ингибиторы подавляли рост отрезков колеоптилей. Ни один из ингибиторов не был электролитом и, значит, в своем действии подчинялся принципу Фергюссона, согласно которому те ингибиторы, которые специфично подавляют узкое звено цепи метаболизма, должны действовать в высоких разбавлениях от насыщенного раствора; если же вещество действует неспецифично ( подобно спиртам, эфирам), то оно тормозит рост только в высоких концентрациях. Из вышеприведенного видно, что 2, 4 - ДНФ действует на рост отрезков колеоптилей в больших разбавлениях от насыщенного раствора, в то время как остальные ингибиторы - в малых разбавлениях. Отсюда можно сделать вывод, что отрезки колеоптилей наиболее чувствительны к 2, 4 - ДНФ - разобщителю окислительного фосфорилирования. [16]
Ростки пшеницы срезают у основания бритвой или пинцетом с заточенными кончиками, складывают в чашку Петри. Используя миллиметровку и предметное стекло, разделяют колеоптили на фракции: 1 5 - 2 мм, 2 - 2 5 мм и работают на преобладающей фракции. Затем от колеоптиля бритвой отсекают кончик 0 5 мм, вырезают следующие 5 мм - зону растяжения, и помещают на 10 - 15 мин в чашку Петри с дистиллированной водой для удаления ауксинов и лучшей реакции на испытуемое вещество. Через указанное время вырезанные зоны колеоптилей помещают ( по 10 шт. Пенициллиновые бутылочки осторожнояюворачивают набок, отрезки колеоптилей расправляют так, чтобы они все плавали в растворе. [17]
Основным положительным свойством этого теста является быстрота ответной реакции. Московка с исходной длиной 4 мм прирастает в 2 % - ном растворе сахарозы ( контроль) до 8 мм, если же рост происходит в растворе ИУК ( 1 мг / л), то отрезок достигает длины 16 - 18 мм, иными словами прирост составляет 300 % и более по сравнению с контролем. Таким образом, за короткий период времени обнаруживается физиологическая функция исследуемого соединения. Как указывалось, этот тест почти не реагирует на гиб-береллин и совсем не чувствителен к кинетику. Вместе с тем тест на отрезки колеоптилей нелишен и некоторых недостатков. Одним недостатком является ограниченность даваемой информации о росте, так как этот тест характеризует рост только растяжением. Другим недостатком является отсутствие специфичности в отношении ростовых веществ, выделенных из тканей разных растений. Действительно, колеоптили могут обладать и, по-видимому, обладают в значительной мере иным набором ферментов, нежели ткани растений-доноров, из которых выделены ростовые вещества. [18]