Отщепление - защитная группа
Cтраница 2
На основе использования циклогексилоксикаобонильной группы в сочетании с гидрогенолитически отщепляемыми бензи-ловыми эфирами Дебабов и Шибнев [ 575а ] осуществили синтез ряда пролинсодержащих пептидов. Однако условия, примененные для отщепления защитных групп бромистым водородом в ледяной уксусной кислоте, приводили, особенно в случае высших пептидов, к частичному гидролизу пептидных связей. [16]
На основе использования циклогексилоксикарбонильной группы в сочетании с гидрогенолитически отщепляемыми бензи-ловыми эфирами Дебабов и Шибнев [ 575а ] осуществили синтез ряда пролинсодержащих пептидов. Однако условия, примененные для отщепления защитных групп бромистым водородом в ледяной уксусной кислоте, приводили, особенно в случае высших пептидов, к частичному гидролизу пептидных связей. [17]
 |
Гидролиз 5 - О-триарилметилуридинов VI в 80 % - ной уксусной кислоте при 20 С130. [18] |
Трифенилметиловые эфиры расщепляются при действии разбавленной кислоты, что позволяет применять их для защиты гидр-оксильных групп в нуклеозидах и нуклеотидах. При использовании тритильных производных в синтезе олигорибонуклеотидов было обнаружено, однако, что в условиях отщепления защитных групп происходит заметная изомеризация фосфодиэфирной связи. Вследствие этого в настоящее время более широко используются мет-окситрифенилметильные производные нуклеозидов 10 130 131 инуклео-зид - З - фосфатов 19 20, которые расщепляются в значительно более мягких условиях. [19]
Карбоксипептидаза В отщепляет от 1 мкмоль G 1 - 16 1 97 мкмоль лизина; следовательно, одновременно с отщеплением защитных групп происходит гидролиз С-концевой амидной группы ( ср. АКТГ), так как последняя устойчива к действию фермента. [20]
Эквивалентные количества трехброшстого бора и трифторукоусной кислоты смешивают в хлористом метилене при температуре О С; при этом образуется осадок. Реакционную смесь упаривают в вакууме при 20 С досуха, а остаток растворяют в ТФУ и полученный раствор используют непооредотвенно ддя отщепления защитных групп. [21]
Синтез простых моноциклических цистеиновых пептидов не представляет трудностей. При получении исходной линейной пептидной последовательности блокируют обе тиольные функции одинаковыми защитными группами. После отщепления защитных групп внутримолекулярное дисуль-фидное кольцо может селективно замыкаться по принципу разбавления Руггли - Циглера посредством окисления кислородом воздуха. При этом в качестве нежелательных побочных продуктов образуются циклические ди-меры с параллельной ( I) или же антипараллельной ( II) структурой, а также полимерные продукты. [22]
 |
Применение техники максимальной и минимальной защиты. [23] |
Деблокирование постоянных защитных групп должно протекать без побочных реакций и разрушений продукта. Реализация этих требований вызывает весьма большие затруднения. В настоящее время разработано еще очень мало универсальных методов деблокирования, поэтому для дифференцированного отщепления защитных групп должны быть использованы различные подходы. Селективность деблокирования должна быть обеспечена как при удалении временных защитных групп, так и постоянных. [24]
Эти пространственные препятствия проявляются и в реакциях по карбоксильной группе W-тритиламинокис-лот, и в случае производных аминокислот, за исключением глицина, реакции конденсации могут быть затруднены. Нитрофенил-сульфенилпроизводные ( 33) [29] легко получают реакцией о-нит-рофенилсульфенилхлорида и свободной аминокислоты в щелочной среде. Эта реакция легко обратима в безводных органических растворителях в присутствии хлорида водорода и протекает с отщеплением защитной группы. [25]
Первичные нитрамины легко разлагаются концентрированными кислотами и не могут быть получены нитрованием аминов азотной кислотой или ее смесью с серной кислотой. Первичные амины могут быть пронитрованы при условии предварительной защиты аминогруппы. Получение нитраминов по этому способу включает четыре стадии: введение в аминогруппу защитной группировки, нитрование амина, отщепление защитной группы и выделение амина. [26]
Синтез пептидов связан с рядом существенных трудностей. Прежде всего, необходимы чистые энантиомеры - оптические активные изомеры L-ряда ( S-конфигурации) а-аминокислот. Кроме того, требуются специальные приемы для осуществления последовательного образования пептидных связей а нужной нам последовательности а-аминокислот: защита аминогрупп, активация карбоксильных групп, отщепление защитных групп, множество специальных реагентов. [27]
О-аце-тилтимидин - 5 -фосфат; в этом случае образуются олигонуклеотиды, у которых З - концевая гидроксильная группа блокирована, что позволяет исключить циклизацию. Аналогичный прием был использован для полимеризации других дезоксинуклеозид-5 - фосфатов. В реакцию вводились защищенные по ядру производные: 4-экзо - - М - анизоилдезоксицитидин-5 - фосфат LXXV ( R H), 6-экзо - М - бен-зоилдезоксиаденозин-5 - фосфат LXXVI ( R Н) или 2 - э / сзо - М - аце-тилдезоксигуанозин-5 - фосфат LXXVII ( R H) в качестве полиме-ризующегося звена и их З - О-ацетаты ( LXXV-LXXVII; R CH3CO) в качестве терминаторов полимеризации. После отщепления защитных групп действием аммиака удается получить олигоцитидило-вые 364, олигоадениловые365 и олигогуаниловые366 кислоты, содержащие б - концевую фосфатную группу. [28]
Часто вначале используют метод ступенчатого наращивания для получения пептидов с определенной последовательностью с последующим применением метода конденсации фрагментов. В этих случаях требуется избирательное отщепление защитной группы с С-концевой группировки. Вначале при отщеплении защитных групп высвобождается кислота ( пептид), которая далее может быть активирована для последующей конденсации, например, с дицикло-гексилкарбодиимидом в присутствии гидроксибензотриазола, когда риск рацемизации минимален. В тех случаях, когда С-концевой группой является остаЧок глицина или пролина, можно прибегнуть к другим методам активации, например часто используют метод смешанных ангидридов - достаточно эффективный и упрощающий задачу выделения. Отщепление сложноэфирной метильной группы действием гидразина способствует проведению дальнейших конденсаций через азиды кислот. [29]
В синтезе глутатиона, осуществленном Хегедюсом [972], эфир дипептида был получен путем гидролиза соответствующего карбобензоксипроизводного, синтезированного в свою очередь с использованием азидного метода. Полученный свободный дипептид вновь бензилировали и превращали в эфир, который затем конденсиров али с у-азидом карбобензокси - L-глутаминовой кислоты. Глутатион был выделен после отщепления защитных групп и соответствующей очистки. [30]
Страницы: 1 2 3