Пик - эфир
Cтраница 2
Некоторые опыты по разделению были проведены также1 на колонке диаметром 30 мм. Таким образом, на колонке диаметром 30 мм можно довольно легко разделять пробы объемом 8 - 9 мл при условии довольно большой разности температур п высоко селективности неподвижной фазы. При указанной скорости газа-носителя 1200 млIмин инки получались с длинным хвостом, особенно пик эфира, что связано с недостаточно большими линейными скоростями газа-носителя. [16]
Выбор необходимого производного и колонки для хроматогра-фирования зависит от того, какие линейные кислоты присутствуют в водном растворе. Бромфенациловые эфиры кислот С3 - С10 хорошо разделяются в порядке увеличения числа атомов углерода на отдельные симметричные пики на колонке с 2 5 % додецилбензоя-сульфоната натрия при 210 С. Причем эфир муравьиной кислоты при его незначительном содержании в пробе воды выходит перед пиком эфира уксусной кислоты, а при избыточном содержании - вызывает искажение пиков эфиров уксусной и пропионовой кислот. Эти же производные кислот С2 - С10 разделяются на отдельные симметричные пики ( за исключением не полностью разделенных уксусной и пропионовой кислот) на колонке со смесью наполнителей с нанесенными 2 5 % додецилбензолсульфоната натрия и 1 % апиезона L ( соотношение по массе 1: 1) при 210 С. Однако в этом случае эфир муравьиной кислоты выходит перед пиком эфира уксусной кислоты вместе с пиком избытка реактива. Таким образом, кислоты С2 и С3 можно анализировать на этой колонке независимо от того, присутствует муравьиная кислота или нет. [17]
Наиболее простым и распространенным способом получения сложных эфиров является этерификация кислот в избытке спирта в присутствии каталитических количеств соляной или серной кислоты. При газохро-матографическом анализе продукта этерификации на большинстве слабополярных неподвижных фаз пик спирта имеет незначительно меньшее время удерживания, чем пик муравьиной кислоты. Поскольку количество спирта превышает содержание кислот в образце на 2 - 3 порядка, происходит маскировка пика эфира муравьиной кислоты. [18]
Выбор необходимого производного и колонки для хроматогра-фирования зависит от того, какие линейные кислоты присутствуют в водном растворе. Бромфенациловые эфиры кислот С3 - С10 хорошо разделяются в порядке увеличения числа атомов углерода на отдельные симметричные пики на колонке с 2 5 % додецилбензоя-сульфоната натрия при 210 С. Причем эфир муравьиной кислоты при его незначительном содержании в пробе воды выходит перед пиком эфира уксусной кислоты, а при избыточном содержании - вызывает искажение пиков эфиров уксусной и пропионовой кислот. Эти же производные кислот С2 - С10 разделяются на отдельные симметричные пики ( за исключением не полностью разделенных уксусной и пропионовой кислот) на колонке со смесью наполнителей с нанесенными 2 5 % додецилбензолсульфоната натрия и 1 % апиезона L ( соотношение по массе 1: 1) при 210 С. Однако в этом случае эфир муравьиной кислоты выходит перед пиком эфира уксусной кислоты вместе с пиком избытка реактива. Таким образом, кислоты С2 и С3 можно анализировать на этой колонке независимо от того, присутствует муравьиная кислота или нет. [19]
 |
Зависииость числа теоретических РИС - 8. Зависимость разделения смеси. [20] |
Некоторые опыты по разделению были проведены также на колонке диаметром 30 лм. В этом случае объем смеси диэтиловый эфир - изопентан мог быть увеличен приблизительно в три раза. Таким образом, на колонке диаметром 30 мм можно довольно легко разделять пробы объемом 8 - 9 мл при условии довольно большой разности температур и высокой селективности неподвижной фазы. При указанной скорости газа-носителя 1200 мл / мин паки получались с длинным хвостом, особенно пик эфира, что связано с недостаточно большими линейными скоростями газа-носителя. [21]
Для смешения слоев к калибруемым смесям добавляют 0 5 мл толуола. Каждую смесь хроматографируют 5 раз и рассчитывают среднее отношение из пяти параллельных определений площадей пиков метилового эфира метоксиуксусной кислоты и тридекана, ацетона и тридекана. Строят калибровочный график в координатах qjqcr - SI / SCT для ацетона и qjq - S2 / 5CT для метилового эфира метоксиуксусной кислоты, где Si - площадь пика ацетона, S2 - площадь пика эфира, 5СТ - площадь пика тридекана. Параметры калибровочного графика: угловой коэффициент Ь и отрезок на оси ординат а находят по методу наименьших квадратов. [22]
Выбор необходимого производного и колонки для хроматогра-фирования зависит от того, какие линейные кислоты присутствуют в водном растворе. Бромфенациловые эфиры кислот С3 - С10 хорошо разделяются в порядке увеличения числа атомов углерода на отдельные симметричные пики на колонке с 2 5 % додецилбензоя-сульфоната натрия при 210 С. Причем эфир муравьиной кислоты при его незначительном содержании в пробе воды выходит перед пиком эфира уксусной кислоты, а при избыточном содержании - вызывает искажение пиков эфиров уксусной и пропионовой кислот. Эти же производные кислот С2 - С10 разделяются на отдельные симметричные пики ( за исключением не полностью разделенных уксусной и пропионовой кислот) на колонке со смесью наполнителей с нанесенными 2 5 % додецилбензолсульфоната натрия и 1 % апиезона L ( соотношение по массе 1: 1) при 210 С. Однако в этом случае эфир муравьиной кислоты выходит перед пиком эфира уксусной кислоты вместе с пиком избытка реактива. Таким образом, кислоты С2 и С3 можно анализировать на этой колонке независимо от того, присутствует муравьиная кислота или нет. [23]
В случае белков трудности, связанные с цистеиновой кислотой, можно обойти, превратив перед гидролизом белка цистеин в карбоксиметилцистеин. Карбоксиметилцистеин можно этерифициро-вать и ацилировать; по данным авторов этой главы, ди-н-пропи-ловый эфир N-ацетилкарбоксиметилцистеина легко и количественно хроматографируется на колонках с карбоваксом причем соответствующий пик расположен между пиками глутаминовой кислоты и тирозина. Попытки получить пик суль-фона [125] оказались неудачными - вероятно, это соединение разрушалось. В лаборатории авторов этой главы был получен пик н-пропилового эфира сульфона N-ацетилметионина, однако количественная оценка этого соединения не была проведена. [24]
Для масс-спектрометрического исследования эти красители наиболее трудны. Соли красителей, содержащих сульфогруппы, невозможно перевести в газовую фазу без разложения. Даже свободные сульфокислоты крайне малолетучи. Возможно, что в масс-спектрометре иногда происходит термическое десульфирование ( см. гл. Противоположный десульфированию подход - получение более летучих производных сульфокислот, обычно метиловых зфиров. Описаны два метода получения метиловых эфиров сульфокислот. Испытав в нашей лаборатории оба метода, мы нашли, что они имеют ограниченное значение. Для сравнения метиловый эфир нафталин-2 - сульфокислоты получили обоими методами. Эфир, полученный с применением диазометана, давал довольно слабый пик молекулярного иона. Последний наблюдается с трудом, если эфир получили из тетраметиламмониевой соли. Однако разложение контролировать трудно, так что пик эфира легко пропустить. [25]
Страницы: 1 2