Cтраница 4
Этот микроорганизм имеет две плазмиды - большую и маленькую. [46]
Используя рестриктазы, получают гибридные плазмиды, содержащие - фрагменты ДНК из любых организмов. [47]
Информация, которую несут катаболические плазмиды, может расширять круг субстратов хозяина либо полным кодированием нового биохимического пути, либо дополнением и продолжением хромосомально кодируемых путей, либо объединением двух метаболических путей. Комплементация, таким образом, особенно важна, если существующие механизмы приводят только к частичной деградации соединения, в результате которой накапливаются потенциально токсичные метаболиты. Такие ллазмиды могут также обеспечивать существование ферментов, катализирующих с большей субстратной специфичностью реакции ферментных систем, закодированных в хромосомах. С этими молекулами трудно работать, и, хотя разработаны методы их исследования, об их структурной организации, за исключением нескольких, известно мало. [48]
Однако помимо клонируемого гена плазмида содержит и другие транскрибируемые последовательности, например гены устойчивости к антибиотикам, и по мере увеличения ее копийности энергетические ресурсы клетки будут во все большей степени направляться на образование белков, кодируемых плазмидой, и метаболическая активность хозяйской клетки упадет. [50]
![]() |
Механизм интеграции некоторых плазмид. [51] |
Гомологичная рекомбинация между одинаковыми IS-элемеита-ми плазмиды и хромосомы приводит к встраиванию плазмнды в хромосому. [52]
К наиболее изученным репликонам принадлежат плазмида ColEI и родственные ей плазмиды. Ориджины плазмид этой группы был использованы при конструировании многих векторов для молекулярного клонирования. Репликация ColEI начинается на единственном ориджине и происходит однонаправленно. Для инициации необходимо, чтобы РНК-полимераза синтезировала на ориджине РНК-предшественник затравки, так называемую РНКП. [53]
К наиболее изученным репликонам принадлежат плазмида ColEl и родственные ей плазмиды. Ориджины плазмид этой группы были использованы при конструировании многих векторов для молекулярного клонирования. Репликация ColEl начинается на единственном ориджине и происходит однонаправленно. Для инициации необходимо, чтобы РНК-полимераза синтезировала на ориджине РНК-предшественник затравки, так называемую РНКП. [54]
К наиболее изученным репликонам принадлежат плазмида ColEl и родственные ей плазмиды. Ориджины плазмид этой группы был использованы при конструировании многих векторов для молекулярного клонирования. Репликация ColEl начинается на единственном ориджине и происходит однонаправленно. Для инициации необходимо, чтобы РНК-полимераза синтезировала на ориджине РНК-предшественник затравки, так называемую РНКП. [55]
Конъюгативные плазмиды ( Conjugative plasmids) Плазмиды, способные передаваться от одной клетки другой во время конъюгации. [56]
Это, как уже говорилось, плазмиды, которые могут включаться в бактериальную хромосому подобно ДНК умеренного фага лямбда. Они мобилизуют генетическую информацию этой хромосомы и осуществляют перенос ее в другую клетку. [57]
ДНК-зонды, приготовленные из рестрик-ционных фрагментов таких плазмид. Колонии эшерихий выращивают на поверхности нитроцеллюлозных фильтров, наложенных на поверхность питательного агара, лизируют их и с помощью ДНК-зондов определяют в лизатах нуклеотидные последовательности, кодирующие у патогенных эшерихий синтез факторов адгезии, инвазии и / или соответствующих токсинов ( см. подразд. [58]
Правда, следует помнить, что бывают плазмиды молчащие ( криптические) или кодирующие необязательные для вида признаки, к тому же плазмиды могут легко утрачиваться. [59]
В начале 50 - х годов Ледерберг открыл плазмиды - относительно малые циклические молекулы ДНК, содержащиеся в большинстве бактерий. Плазмиды существуют независимо от хромосомы бактериальной клетки и размножаются при делении клеток. Бактерии могут обмениваться плазмидами. [60]