Cтраница 1
![]() |
Кривые титрования полибуферов-ионообменников и полибуферов для хрома-тофокусирования ( по данным фирмы Pharmacia. [1] |
Полибуферы - ионообмен-ники типов РВЕ 94 и РВЕ 118 устойчивы при рН 3 - 12, не боятся контакта с мочевиной; их можно автоклавиро-вать. [2]
Молярность полибуфера нельзя охарактеризовать одной цифрой, поскольку он представляет собой сложную смесь веществ. Указывается среднее приращение концентрации, приходящееся на 1 ед. Разбавление полибуфера определяет объем элюцпп. При вытекании примерно первых двух объемов колонки элгоент на ее выходе будет сохранять исходное значение рН, хотя состав буфера после выхода свободного объема колонки и начнет меняться. [3]
![]() |
Кривые титрования полибуферов-ионообменников и полибуферов для хрома-тофокусирования ( по данным фирмы Pharmacia. [4] |
Оба жидких полибуфера почти прозрачны при длине волны 280 нм, заметно поглощают при 254 нм и очень сильно - в более короткой области УФ-света. [5]
![]() |
Кривые титрования полибуферов-ионообменников и полибуферов для хрома-тофокусирования ( по данным фирмы Pharmacia. [6] |
На рис. 129 приведены кривые титрования полибуферов-ионо-обменников и просто полибуферов, взятые из рекламного материала фирмы Pharmacia. [7]
Если необходимо работать в области их перекрывания, то можно использовать смесь полибуферов. [8]
Иногда, если некоторые белки склонны выпадать в осадок ( вблизи pi), концентрацию полибуфера приходится увеличивать или даже вводить в него соль, жертвуя качеством разрешения. Впрочем, не всегда обязательно надо добиваться полного растворения исходного препарата. [10]
Первые три из указанных буферов можно вместо НС1 титровать уксусной кислотой, если ее же используют для титрования полибуфера. Вообще С02 дестабилизирует градиент рН, и полибуфер перед использованием надо обязательно деаэрировать. [11]
Регистрацию выхода белков можно вести по УФ-поглощению при 280 нм, но не по поглощению пептидной связи ( 210 - 230 нм), так как в этой области сам полибуфер сильно поглощает свет. Полибуфер не мешает окраске белка красителями типа СВВ. [12]
В этой же работе было обнаружено, что элюцию пика ферментативной активности можно ускорить и тем улучшить его отделение от выходящих позже примесей, если в разбавленный, как обычно, полибуфер добавить в небольшой концентрации ( до 0 035 М) К. [13]
Регистрацию выхода белков можно вести по УФ-поглощению при 280 нм, но не по поглощению пептидной связи ( 210 - 230 нм), так как в этой области сам полибуфер сильно поглощает свет. Полибуфер не мешает окраске белка красителями типа СВВ. [14]
Первые три из указанных буферов можно вместо НС1 титровать уксусной кислотой, если ее же используют для титрования полибуфера. Вообще С02 дестабилизирует градиент рН, и полибуфер перед использованием надо обязательно деаэрировать. [15]