Полимераза

Cтраница 2

Схематический рисунок, показывающий три типа ферментативной активности ДНК-полимеразы I. Верхний рисунок иллюстрирует 3 - 5 -экзонуклеазную или корректирующую активность фермента. Хотя на рисунке показано, что фермент передвигается иа одно положение вперед до того, как произойдет следующий этап, на самом деле момент, когда происходит передвижение, не установлен. Нижний рисунок иллюстрирует реакцию полимеризации и 5 - 3 -экзонуклеазное действие. [16]

Неизвестно, когда полимераза проверяет правильность спаривания оснований, дв или после передвижения к следующему месту полимеризации. Точно установлено лишь то, что фермент удаляет с З - конца лкибой неправильно спаренный нуклеотид. [17]

Исходный специфический комплекс полимераза - промотор называют закрытым комплексом, так как считается, что основания в цепи - ДНК остаются все еще спаренными. В открытом комплексе водородные связи между комплементарными основаниями ДНК-матрицы уже разрушены и основания матрицы доступны длят спаривания с поступающими рибонуклеозидтрифосфатами. [18]

Продукт, образуемый полимеразой, имеет такое же соотношение аденина к тимину и гуанина к цитозину, что и природная ДНК. Соотношение оснований в образовавшемся соединении не нарушается, даже если молярные пропорции субстратов широко варьируют. [19]

Аминотрансферазы, Гликогенфосфорилаза и Полимеразы. [20]

При изучении условий действия полимеразы из зобной железы теленка было показано, что, прежде чем ДНК начинает действовать как затравка, водородные связи между полинуклеотидными цепями разрываются и что в действительности роль затравки могут выполнять только однотяжные цепи или ( что, по-видимому, более точно) однотяжные участки. Так, неактивная ДНК-затравка легко превращается в активную затравку при тепловой денатурации. [21]

Рифампицин не препятствует связыванию полимеразы с ДНК, но ингибирует инициацию транскрипции. Родственный антибиотик стрептолидигии также связывается с р-субъединицей РНК-полимеразы и блокирует элонгацию. На хромосомной карте мутации, обусловливающие резистентность к этому антибиотику, располагаются очень близко к / - мутациям. [22]

Выделение и очистка фермента ДНК полимеразы из термофильных бактерий сопряжено со значительными сложностями, связанными прежде всего с высокой температурой выращивания этих бактерий. Решение проблемы заключалось в создании молекул рекомбинантной ДНК, несущих ген ДНК полимеразы из какой-либо термофильной бактерии, и получении на их основе штаммов-продуцентов термостабильных ДНК полимераз, экспрессирующихся в мезофильной бактерии кишечной палочки E. [23]

Те участки гена, с которых полимераза съехала, вновь захлопываются, а синтезируемая молекула РНК свешивается в раствор. К ней подплывает рибосома и начинает синтез белка по законам генетического кода. [24]

Аминотрансфер / иы, Гликогкнфосфорилаза и Полимеразы. [25]

В дальнейшем было установлено, что полимераза Корнберга является скорее репаразой - медленно действующим ферментом, заполняющим бреши в полинуклеотидных блоках. In vivo работает истинная полимераза. Мы еще мало знаем об этих ферментах. [26]

Следует подчеркнуть, что сложное строение полимеразы связано с многообразием функций, которые выполняет этот фермент, и необходимостью регуляции процесса транскрипции. В тех случаях, когда единственная функция РНК-полимеразы состоит в синтезе РНК, структура фермента может быть значительно проще. Терминация синтеза in vivo осуществляется с помощью еще одного так называемого р-фактора, представляющего собой отдельный белок, нормально не связанный с РНК-полиме-разой. [27]

Это имеет особое значение, поскольку фермент полимераза связывает своим активным центром не всю молекулу ДНК, а лишь ее небольшую часть. [28]

Каждый акт элонгации проходит в активном центре соответствующей полимеразы нуклеиновых кислот или рибосомы, причем его непосредственными участниками являются концевая группа синтезируемого полимера, кодирующий элемент матрицы и очередная молекула мономера. Все эти участники должны быть закреплены определенным образом в активном центре полимеразы или рибосомы. По аналогии с активными центрами других, более просто устроенных ферментов можно ожидать, что такой активный центр должен быть уникальным. [29]

Существует также большое число ферментов, аналогичных полимеразам, но способных к безматричному синтезу полинуклео-тидов. Концевая нуклеотидилтрансфераза ( из тимуса теленка) осуществляет последовательное присоединение нуклеотидных звеньев к З - ОН-кон-цевым группам ДНК. [30]

Страницы: 1 2 3 4