Полимераза

Cтраница 3

Если в систему ДНК-затравка не добавляется, то полимераза синтезирует сополимер дезоксиаденина и дезокситимидина. [31]

Влияние облучения на активность поли ( АДФ-рибозо) - полимеразы хроматина тимуса крыс. [32]

Соблазнительно предположить, что нуклеазы, загрязняющие даже очищенные препараты полимеразы, вызывают частичную деградацию нативной двухцепочечной ДНК, что позволяет использовать ее как затравку в такого рода не полностью очищенных системах. [33]

Каждый транскрипт определяется специфическим промотор-ным участком на Ti-плазмиде, узнаваемым полимеразой II растенш - хозяина. Из рисунка 145 Б следует, что функция генов 1 - 2 проявляется в неорганизованном росте клеток, поскольку тормозится формирование побегов и корней. [34]

Схема сингеча РНК с помощью ДНК-за вис и мой рНК - полимеразы. [35]

Перенос АДФ-рибозильных остатков NAD на белки в изолированных ядрах млекопитающих катализирует полимераза, или синта-за поли - АДФ-рибозы. Фермент локализован в хроматине, хотя полимераза поли - АДФ-рибозы была обнаружена также в митохондриях и рибосомах. Предполагалось, что процесс поли - АДФ-рибози-лирования белков свойствен эукариотическим клеткам, однако впоследствии феномен АДФ-рибозилирования некоторых бактериальных белков был выявлен после заражения клеток фагами. [36]

В опытах с нативной спиральной ДНК в качестве матрицы и очищенным препаратом полимеразы наблюдается образование комплекса, который состоит из матрицы и продукта реакции. Последний можно отделить от матрицы путем денатурации. И действительно, отнюдь не исключено, что фермент Корнберга не обязательно является самым важным участником синтеза ДНК в живой клетке. [37]

Полимеразная цепная реакция, проводимая с помощью специфических олигонуклеотидных праймеров и термостабильной ДНК полимеразы позволяет избирательно амплифицировать определенные участки ген % ма чуть ли не в миллиард раз. Сфера применения метода поли-меразной цепной реакции очень широка. После такой избирательной амплификации появляется возможность проводить дальнейшие анализы с этим фрагментом ДНК, не прибегая к дорогостоящему и трудоемкому методу молекулярного клонирования. Помимо исключительно научного применения для наработки определенных участков генома для их дальнейшего изучения этот метод используется в медицинских исследованиях при диагностике опасных инфекций, наследственной патологии, предрасположенности к отдельным заболеваниям, при выявлении точечных мутаций, а также при генетическом картировании, генетическом полиморфизме, клеточном я гуморальном ответе на заболевания и др. Кроме этого, использование термостабильной ДНК полимеразы для определения нуклеотидных последовательностей фрагментов ДНК ферментативным методом по Сэнгеру позволяет проводить секвени-рующие реакции при повышенной температуре, что снимает влияние вторичной структуры и дает возможность секвенирования GC-богатых участков. Используя специфические праймеры, возможно секвениро-вать отдельные участки ДНК, минуя этап клонирования. [38]

Синтез ДНК ( Корнберг) происходит при наличии в системе: ДНК - полимеразы, всех четырех дезоксирибонуклеозидтрифосфатов ( АТФ, ГТФ, ЦТФ и ТТФ) и минимального количества ДНК-затранки. При этом освобождается пирофосфат. Синтезируемая ДНК точно соответствует ДНК затравке. ДНК затравка функционирует как матрица для своей собственной репликации путем разделения двух нитей и образования вокруг каждой из них новой нити с комплементарным ( стр. [39]

Не исключено, что аманити-ны, подобно актиномицину, взаимодействуют с симметричным участком полимеразы или комялекса полимераза - ДНК. [40]

Прежде чем приступить к описанию экспериментов и полученных результатов по созданию штамма-продуцента термостабильной ДНК полимеразы считаем необходимым кратко охарактеризовать сам процесс ДНК амплификации и роль в нем термостабильной ДНК полимеразы. [41]

ДНК на приемлемом расстоянии друг от друга, ферментативного построения с помощью термостабильной ДНК полимеразы новых цепей по существующим од-ноцепочечным матрицам ДНК с использованием в качестве затравки данных праймеров. В результате последовательного циклического проведения всех этих этапов после 25 - 30 или даже 60 циклов образуется требуемый продукт ДНК, ограниченный участками отжига праймеров. Применение в качестве строящего комплементарные цепи ДНК фермента термостабильиой ДНК полимеразы снимает проблему необходимости постоянного добавления новых порций фермента после очередной денатурации, поскольку обычные ДНК полимеразы не выдерживают такого нагрева и теряют свою активность. [42]

К задаче. [43]

Вероятно, при репликации напротив профлавина, которой не комплементарен ни одному из нуклеотидов, полимераза случайным образом встроила аденозин между Т и G и возник кодон-терминатор. [44]

Полимер, отчасти похожий на д ( А - Т), можно получить при инкубации полимеразы в среде с высоким содержанием дГТФ и и дЦТФ в присутствии ионов магния. Как и при образовании полимера д ( А - Т), в начале реакции наблюдается лаг-период, составляющий несколько часов; его можно избежать, если использовать продукт реакции как затравку. В результате синтезируется полимер, содержащий гуанин и цитозин, причем соотношение обоих оснований в полимере не всегда одинаково. Анализ ближайшего соседствования показывает, что последовательности ГфГ и ЦфЦ встречаются с частотой 0 5 каждая. Эти данные находятся в полном соответствии с утверждением, что молекула нашего полимера состоит из двух гомополимеров: одного, содержащего только гуанин, и второго, содержащего только цитозин. Оба полимера на протяжении всей длины связаны водородными связями ( фиг. Две цепи, очевидно, могут быть различного размера, потому что количества гуанина и цитозина неэквивалентны и потому что интенсивность включения дГТФ и дЦТФ может быть различной. [45]

Страницы: 1 2 3 4