Полумикроколонка
Cтраница 2
Однако ассортимент их по сравнению с ассортиментом колонок для обычной ВЭЖХ более скуден, поэтому исследователю часто приходится изготавливать полумикроколонки самому, пользуясь обычными материалами. [16]
 |
Скорость подачи подвижной фазы. 10 - 990 мкл / мин ( 1 0 - 9 9 мл / мин. [17] |
В табл. 3 - 4 приведены характеристики рекомендуемых принадлежностей, а в табл. 3 - 5 - рекомендуемые насадочных материалы и методики заполнения полумикроколонок. [18]
Полумикроколонки заполняют суспензионным методом точно так же, как и обычные колонки. Насадочный материал диспергируют в растворителе и получают суспензию. Эту суспензию заливают в сосуд, к которому присоединена пустая колонка. После этого в сосуд под давлением подают растворитель, вытесняя суспензию в колонку. [19]
На рис. 7 - 40 показана хроматограмма, полученная при исследовании методом полумикро - ВЭЖХ противосудорожных средств. На полумикроколонке внутренним диаметром 1 5 мм, заполненной силикагелем, модифицированным группами С18, разделены фенобарбитал, фетиноин и карбамазепин. Для этих препаратов характерен узкий эффективный интервал концентраций в крови и весьма разнообразный у различных индивидуумов спектр метаболитов. Кроме того, избыточные дозы этих лекарственных средств могут давать различные вредные побочные эффекты. Поэтому определение их концентрации в крови имеет исключительное значение для установления оптимальной дозы. [20]
Они также относятся к полумикроколонкам. Смысл этой классификации состоит в том, что для всех полумикроколонок объем неудерживаемого пика равен примерно 10 мкл. При этом размывание пика не зависит от размеров колонки. [21]
Поскольку одним из важнейших преимуществ флуоресцентного детектора является его высокая чувствительность, то на практике объем кюветы определяется объемом пика исследуемого вещества. В системах, оснащенных полумикроколонками, при детектировании умеренно удерживающихся пиков ( & - 3 - 6) кюветы объемом 3 - 6 мкл не дают сколько-нибудь заметного уширения пиков. В то же время чувствительность детектирования повышается благодаря высокой концентрации определяемого компонента в выходящем из колонки пике. Однако вследствие уменьшения облучаемого объема раствора применение меньших кювет ( объемом порядка 1 мкл) ведет к потере этого выигрыша в чувствительности. [22]
Для заполнения полумикроколонок пригодны практически любые насадочные материалы. При надлежащем качестве заполнения характеристики полученной полумикроколонки не отличаются от характеристик обычной колонки с такой же насадкой. Поэтому все насадки, разработанные для обычной ВЭЖХ, пригодны без каких-либо изменений и для полумикро - ВЭЖХ. [23]
Поскольку объем пика, элюирующегося из полумикроколонки, в 10 раз меньше объема соответствующего пика, элюирующегося из обычной колонки, максимум поглощения пика в полумикро - ВЭЖХ при одинаковой длине пробега луча должен быть в 10 раз больше. [25]
 |
Сравнительная чувствительность анализа на полумикроколонке и на обычной колонке для ВЭЖХ. Подвижная фаза ацетонитрил / вода ( 75 / 25. детектор УФ. длина волны 250 нм, ед. погл. на всю шкалу. [26] |
Достаточно, например, установить в прибор миниатюрный кран-дозатор с вводимым объемом 1 - 3 мкл и детектор с проточной микрокюветой объемом 1 - 2 5 мкл. Таким образом, замена обычной на полумикроколонку не требует никаких специальных приспособлений, необходимых при работе с микроколонками, объем которых составляет менее 1 / 100 объема обычных колонок. [27]
Благодаря вышеописанным преимуществам микро - ВЭЖХ, в частности высоким концентрациям выходящих из колонки компонентов и малой объемной скорости, свойства пробы и растворителя существенно разнятся, что облегчает детектирование определяемых компонентов любым из известных методов. Ниже рассмотрены принципы работы спектрального УФ -, флуоресцентного и вольтамперометрического детекторов в сочетании с микро - и полумикроколонками. [28]
Поскольку объем полумикроколонки равен примерно 1 / 10 объема обычной колонки, объемная скорость элюента, необходимая для достижения одинаковой с обычной колонкой линейной скорости, также составляет около 1 / 10 объемной скорости, применяемой в обычной колонке. Благодаря этому при одних и тех же условиях и одной и той же ожидаемой продолжительности анализа расход растворителя при разделении на полумикроколонке составляет всего около 10 % объема растворителя, необходимого для разделения на обычной колонке. Применительно к рутинному анализу это означает существенную экономию ресурсов лаборатории. Если же применяемый в качестве подвижной фазы растворитель очень дорог или опасен для людей и окружающей среды, то снижение его потребления имеет еще более важное значение. Экономически немаловажно также и то обстоятельство, что количество насадки, необходимое для заполнения полумикроколонки, не превышает 10 % того количества насадки, которое расходуется при заполнении обычных колонок. [29]
Они также относятся к полумикроколонкам. Смысл этой классификации состоит в том, что для всех полумикроколонок объем неудерживаемого пика равен примерно 10 мкл. При этом размывание пика не зависит от размеров колонки. [30]
Страницы: 1 2 3