Cтраница 3
Методы определения фторидов основаны на гашении флуоресценции комплексов этих реактивов с неорганическими ионами. Преимуществом первых двух реактивов является то, что фториды с их помощью могут определять присутствие небольших количеств фосфатов. Однако большое число ионов мешает определению фтора. Значительное распространение в анализе получил морин. Конечная точка устанавливается по появлению зелено-желтой флуоресценции, если фториды титруют раствором алюминиевых квасцов в присутствии морина. Морин применим к анализу различных объектов. [31]
Мы говорили до сих пор только о тех изменениях интенсивности флуоресценции, которые обусловливаются взаимодействием молекулы хлорофилла в возбужденном состоянии со средой. Однако во введении было упомянуто, что может иметь место и другой тип эффектов флуоресценции, при котором изменение молекулы хлорофилла происходит еще в темноте, до возбуждения. Это изменение должно проявляться в изменении спектра поглощения. Одно из возможных изменений этого типа обусловлено тем, что хлорофилл способен ди-меризоваться или полимеризоваться в некоторых растворителях, оставаясь мономерным в других. Как известно, димеризация приводит к исчезновению флуоресценции у многих красителей, таких, например, как метиленовый синий в водных растворах. У хлорофилла подобных явлений до сих пор еще не обнаружено, если не рассматривать отсутствие флуоресценции коллоидных растворов и твердого хлррофилла как результат тушения, связанного с полимеризацией. Другой тип ассоциации, однако, должен иметь важное значение в этом случае; это - ассоциация молекул хлорофилла с гидроксильными группами или аминогруппами, имеющимися в молекулах растворителя; по контрасту с тушащим действием димеризации ассоциация этого типа, повидимому, необходима для появления флуоресценции хлорофилла. [32]
Люминесцентные зонды и метки. В медицине используется применение специальных флуоресцирующих молекул, добавляемых к исследуемым биологическим системам извне, в которых они распределяются в соответствии со своими свойствами. Примером использования флуоресцентных зондов является метод флюоресцентной ангиографии - контрастирование сосудов флуоресцеином и их последующее фотографирование. Этот краситель вводится внутривенно пациентам. Этот краситель не токсичен, обладает очень высоким квантовым выходом флуоресценции. Он разносится с током крови по всему организму и диффундирует в дерму и эпидермис. Флуоресцеин возбуждается невидимым длинноволновым ультрафиолетовым излучением. Люминесценция его наблюдается в видимом свете. Диагностическая значимость этого метода заключается в том, что по скорости появления флуоресценции ( люминесценции) в поверхностных тканях судят об участках тела с пониженным кровообращением, в них флуоресцеин появляется позже, чем в участках тела с нормальным кровообращением. [33]
Краевые части вены получают кровь, смешанную с флуоресцеином, в то время когда в центральной части вены находится кровь, поступившая еще до того, как в нее начала проходить краска. При достаточно большой скорости фотографирования между артериальной и ранней венозной фазами регистрируется капиллярная фаза. Она появляется в виде общего контрастирования сетчатки. В зависимости от техники инъекции флуоресцеина и фотографирования, а также от индивидуального расположения и протяженности капилляров, эта фаза может быть видна в большей или меньшей степени. В поздней, венозной, фазе вены полностью заполнены флуоресцеином. Флуоресцеин появляется в хориоидее непосредственно перед ранней артериальной фазой, что особенно хорошо видно при выраженных цилиоретинальных артериях, которые заполняются флуоресцеином раньше, чем ретинальные артерии. После венозной фазы флуоресцеин постепенно покидает сосуды сетчатки, но иногда появляется снова уже в более низкой концентрации. Эта фаза называется рециркуляционной. Флуоресцеин, попадая в хориоидею, распределяется в интерваскулярной ткани в связи с тем, что он свободно проходит через фенестрированную стенку хориокапилля-ров. При этом наблюдается разлитое окрашивание всех участков глазного дна за исключением макулярной области, которая экранируется ретинальным пигментом, особенно плотным в этой области. В случаях, когда пигментный эпителий в связи с патологическим процессом частично разрушен, выявляется отчетливая очаговая флуоресценция хориоидеи. Так как флуоресцеин связывается с коллагеном склеры, то при фокальной атрофии хориоидеи очаговая флуоресценция может продолжаться и после того, как краска уже покинула сосуды глазного дна. Отдельные циркуляционные фазы имеют, по данным литературы, некоторые отличия. Кроме того, он рассчитывает скорость движения крови по сосудам сетчатки и тотальное время ретинальной циркуляции. Первое - от времени ранней артериальной фазы до времени ранней венозной фазы, второе - время, за которое краска становится более видимой в венозной сети сетчатки по сравнению с артериальной. Время рука - сетчатка в норме по автору варьирует от 7 до 13 сек. У лиц пожилого возраста оно может удлиняться. Бест, Тайофуку ( Best, Tayofuku, 1972) определяют время появления флуоресценции ( соотв. [34]