Cтраница 4
Чтобы различить пролин и гидроксипролин, Хроматограмму погружают сначала в описанный выше раствор, а затем в реагент Эрлиха ( см. выше разд. Все цвета, даваемые изатином исчезают, кроме окраски гидроксипролина, которая переходит из синей в светло-вишневую. [46]
В-третьих, свободный пролин не может быть использован как субстрат для реакции гидроксилирования; это означает, что свободный оксипролин не является промежуточным продуктом в синтезе коллагена. В опытах с бесклеточной микросомной системой из куриных эмбрионов, включавшей меченый пролин в пептидный оксипролин, было показано, что образование оксипролина сильно отстает от включения пролина. Эти данные свидетельствуют о том, что фактическим субстратом в реакции гидроксилирования служит пролин, уже связанный пептидной связью. В-четвертых, синтез оксипролина, входящего в состав коллагена, катализируется ферментной системой, ассоциированной с рибосомной фракцией клетки. [47]
Поскольку на пролин карбоксипептидаза не действует, после отщепления остатков треонина и аланина от нативного белка ВТМ действие фермента прекращается. В нитритных же мутантах действие карбоксипептидазы продолжается и после отщепления второго остатка, так как за ним следует лейцин. Эта замена, вероятно, происходит в результате превращения цитозина в урацил на каком-то из участков цепи РНК, содержащей 6000 оснований. Анализ показал, что изменение даже одного основания может привести к мутации. [48]
При взаимопревращениях пролина, орнитина и глутаминовой кислоты общим промежуточным продуктом является f - полу-альде № д глутаминовой кислоты. Это соединение впервые получили Фогель и Дэвис [302], обнаружившие, что оно служит предшественником пролина. [49]