Cтраница 2
Аналогичный ряд спектров а-г можно получить при постепенном добавлении кислоты к очень чистому метанолу, для которого характерен очень медленный протонный обмен. Кислоты, однако, катализируют этот процесс, и скорость обмена возрастает пропорционально количеству добавленной кислоты. Такое поведение типично не только для метанола, но и для большинства других спиртов. Сахаров ( протоны О - Н) и пептидов ( амидные протоны N-H) в [ 2Нб ] диметилсульфоксиде всегда наблюдаются соответствующие мультиплеты, отвечающие взаимодействиям V через три связи. [16]
Интересное явление представляет собой обмен между амидными протонами пептидного остатка и окружающей водой. Мы уже ознакомились с этим процессом как способом упрощения спектров в случае, когда протеин растворяется в дейтерированной воде, и амидные протоны участвуют в обмене с ядрами дейтерия растворителя. Скорость обмена существенно зависит от структурных особенностей. Если обмен происходит очень медленно, то его скорость можно определить непосредственно по уменьшению во времени интенсивности линий. Правда, если амидные протоны обмениваются настолько быстро, что соответствующие им сигналы не видны отдельно от сигналов воды ( быстрый обмен), то в общем случае не удается провести измерение скорости обмена с привлечением простых методов. [17]
Так как величины констант косвенного спин-спинового взаимодействия не дают сведений о пептидных связях, то их значения не могут рассматриваться как источник информации. Остается еще ядерный эффект Оверхау-зера, который можно наблюдать для протонов соседних аминокислот при условии, что они расположены достаточно близко в последовательности. Правильность этих рассуждений следует из рис. 3.3 и рис. 3.4. Следует отметить, однако, что расстояния между взаимодействующими протонами зависят от диэдральных углов. На рис. 3.27 представлены основные обозначения для расстояний в соответствии с общепринятой номенклатурой. Несмотря на то что пролиновый остаток не содержит амидных протонов, модельные теоретические расчеты показывают, что при произвольных поворотах устанавливаются такие углы р и ty, которые обеспечивают расстояния, не превышающие 0 3 нм, что позволяет наблюдать ЯЭО. В принципе в трехмерной структуре протоны могут быть расположены на таких расстояних, даже если они не принадлежат аминокислотам, непосредственно следующим одна за другой. [18]