Cтраница 1
![]() |
Схема синтезов соединений, меченных 14С, на основе. [1] |
Введение радиоактивной метки ( трития) в молекулу вместо подвижного водорода для химических целей в большинстве случаев не нужно, так как в процессе использования меченых соединений легкоподвижный тритий теряется в результате изотопного обмена. [2]
Приводимые прописи пригодны для введения радиоактивной метки в небольшие количества неактивных кислот и спиртов с помощью горячего этерифицирования. Кислоты обрабатывают радиоактивным диазометаном, а спирты - радиоактивным ацетангидридом. [3]
На другой день для введения радиоактивной метки в растворы берут по [ 0 мл приготовленных растворов азотнокислого свинца каждой концентрации и, предварительно слегка подогрев на плитке, ополаскивают ими крышки чашек Петри. [4]
Приводимые прописи пригодны для введения радиоактивной метки в небольшие количества неактивных кислот и спиртов с помощью горячего этерифицирования. Кислоты обрабатывают радиоактивным диазометаном, а спирты - радиоактивным ацетангидридом. [5]
Кальвин, Бенсон [16, 17] также использовали метод введения радиоактивной метки для исследования восстановления углерода при фотосинтезе. В их опытах растения осуществляли синтез промежуточных соединений из С1402 в течение коротких промежутков времени ( несколько секунд) и при различных экспериментальных условиях. [6]
Во всех современных способах определения первичной структуры нуклеиновых кислот первостепенную роль играют методы введения радиоактивных меток в 5 - и З - концевые звенья. [7]
Введение радиоактивной метки дает возможность непосредственно различать химически тождественные атомы и молекулы. Определение, например, соотношения скоростей прямой и обратной химической реакции, места разрыва и образования связей в сложных органических молекулах крайне затруднительно или вообще невозможно какими-либо другими методами исследования. [8]
Принцип радиометрического титрования основан на скачкообразном изменении радиоактивности анализируемого раствора в точке эквивалентности. Радиоактивность раствора создается введением радиоактивной метки либо в анализируемый раствор, либо в титрант. Существуют несколько вариантов радиометрического титрования. [9]
В заключение отметим, что в этом сборнике приведены различные химические и ферментативные методы определения концевых групп и, следовательно, молекулярного веса РНК. Эти методы основаны на введении радиоактивной метки в один из концов цепи РНК, что позволяет легко отличить интактпые цепи РНК от агрегированных, а линейные формы от кольцевых. [10]
При контакте разделенных антигенов и антител образуются характерные дуги осаждения. Отличающийся высокой чувствительностью иммуноэлектрофорез был усовершенствован путем введения радиоактивной метки в антигены, и в настоящее время радиоиммуноэлектрофорез [110] является одним из самых чувствительных аналитических методов анализа биополимеров. В методе взлетающей ракеты ( fused-rocket) [57, 94] иммунопреципитация происходит в процессе электрофорети-ческой миграции в блоке геля. При разделении этим методом антитела равномерно диффундируют в гель и не перемещаются во время электрофореза. Этот быстрый метод пригоден для избирательного количественного анализа большого числа фракций. Полиакриламидный гель наименее химически активен. Его слабое сродство к красителям позволяет осуществлять быстрое обнаружение биополимеров, главным образом белков, нуклеиновых кислот и продуктов их деградации, с помощью окрашивания. Прозрачный полиакриламидный гель обладает хорошими механическими свойствами, допускающими изменение концентрации полиакрилампда в самых широких пределах. Электроосмотические эффекты в этом геле очень малы. Условия аналитических и препаративных разделений на полиакриламидном геле путем зонного электрофореза в гомогенных и дискретных системах буферных растворов [48, 77], а также изотахофореза и изо-электрического фракционирования хорошо изучены. [11]
Как и в случае фрагментов ДНК, на один из концов РНК вводится радиоактивная метка. Наряду с фосфорилированием 5 -конца полинуклеотидной цепи ( с помощью полинуклеотидкиназы и у - 1яР1 - АТР) здесь применяется введение радиоактивной метки на З - конец молекулы. [12]
Как и в случае фрагментов ДНК, на один из концов РНК вводится радиоактивная метка. Наряду с фосфорилированием 5 -конца полинуклеотидной цепи с помощью полинуклеотидкиназы и 7 - [ 32Р ] - АТР) здесь применяется введение радиоактивной метки на З - конец молекулы. [13]
Как и в случае фрагментов ДНК, на один из концов РНК вводится радиоактивная метка. Наряду с фосфорилированием 5 -конца полинуклеотидной цепи ( с помощью полинуклеотидкиназы и 7 - [ 32Р) - АТР) здесь применяется введение радиоактивной метки на З - конец молекулы. [14]
Значительные методические трудности создаются при определении специфических продуктов гидролиза, образующихся из концевых групп полинуклеотидной цепи, в присутствии большого избытка продуктов, возникающих из центральных звеньев цепи. Существенное повышение чувствительности определения концевых групп достигается введением радиоактивной метки. Для этой цели могут быть использованы химические или ферментативные методы. [15]