Cтраница 2
Денситометрическое определение всех классов соединений на основе использования обычных методов проявления хроматограмм недостаточно точно ввиду отсутствия единой для всех соединений пропорциональности оптической плотности и концентрации. Принцип метода заключается в том, что перед анализом к силикагелю добавляют краситель метиловый красный. Липиды проявляются в виде пурпурных пятен на розовом, а затем желтом фоне. После обесцвечивания фона парами аммиака хроматограмму фотографируют и затем фотокопии денситометрйрую г, сравнивая оптическую плотность изучаемых фракций с оптической плотностью стандарта. [16]
Метод тонкослойной хроматографии применен [ 91J для отделения Аи от Sn при анализе полупроводниковых сплавов Аи-Sn. Подвижным растворителем является 0 1 М НС1, продолжительность элюирования 60 - 90 мин. Тонкослойная хроматография с незакрепленным слоем Al203 использована для разделения, идентификации и определения микрограммовых количеств Аи, Se и Те. Золото ( Ш) восстанавливается до металла и обнаруживается в виде пурпурного пятна. [17]
Приготавливая хроматографические пластинки для разделения бактериальных липидов, Минникин и Абдолрахимзаде [168] смешивали 40 г силикагеля Merck PF254 и 100 мл 0 2 % - ного раствора ацетата натрия в виде кашицы и наносили на подложку. На таком слое при элюировании смесью хлороформ-метанол - вода ( 65: 25: 4) фосфатидилглицерин дает компактное пятно; на непропитанных слоях пятно этого соединения вытянуто. Для разделения фосфолипидов и гликолипидов, содержащихся в растениях, Ле-паж [169] также применял двумерную ( под углом 90) хроматографию. Под действием первой смеси происходило удовлетворительное разделение фосфолипидов, вторая смесь была более эффективна при разделении гликолипидов и сопутствующих им гликозидов стерина. Пластинки сначала опрыскивали 0 5 % - ным раствором периодата натрия и оставляли на 5 мин, после чего выдерживали в атмосфере диоксида серы, чтобы удалить избыток периодата натрия, затем опрыскивали 0 5 % - ным раствором n - розанилина ( свежеобесцвеченного диоксидом серы) и оставляли до появления синих и пурпурных пятен. [18]
Хроматограмму промывают дистиллированной водой и высушивают. Погружают в 2 % - ный водный раствор периодата натрия на 1 мин. Промывают водой, погружают в 2 % - ный водный раствор бисульфита натрия на 25 мин. Погружают в реагент Шиффа ( 1 % - ный раствор n - розанилина, обесцвеченный с помощью SO2 и профильтрованный через активированный уголь) на 30 с. Через 10 - 15 мин появляется пурпурное пятно. [19]