Cтраница 2
В процессе развития вируса в организме хозяина происходят определенные изменения этих основных форм. После заражения насекомого полиэдры вирусов растворяются в желудочном соке пищеварительного тракта насекомого, вирусные частицы освобождаются и постепенно распадаются на мелкие частицы, которые проникают внутрь организма, разносятся гемолимфой по всему телу и проникают в ткани. В организме хозяина происходит увеличение числа частичек, обозначаемых как провирус. Доказательств этого процесса при помощи микроскопа не было получено, но косвенным доказательством является то, что в этот период гистологическими методами не удается обнаружить вирус в хозяине и он не проявляется также при переносе на восприимчивого здорового хозяина. Как показал Ямафуи и др. [324], а позднее более детально выяснил Криг [150], при заражении насекомых вирусом Borrelina bombycis в период между 3 и 5, а также между 11 и 13 часами после заражения происходит снижение вирулентности гемолимфы хозяина. В этот период нельзя также обнаружить в теле насекомого даже единичных палочек вируса, однако нуклеиновая кислота вируса уже связана с нуклеиновой кислотой клетки хозяина. После этих периодов, которые Криг называет эклипсами и которые в природе могут продолжаться очень долго как скрытая инфекция, вновь образуется вирусная палочка. Палочковидный вирус образуется в конце цикла почти одновременно во всех зараженных тканях организма. Обнаружить на срезах разные по возрасту стадии можно лишь в крайне редких случаях. [16]
Интерфероногенами предложено называть соединения, при действии которых на организм происходит образование белка - интерферона. Последний весьма эффективно ингибирует развитие различных вирусов, а также защищает клетки от бактерий и простейших внутриклеточных паразитов. Интерфероногены весьма различны по своей природе. Число низкомолекулярных соединений, обладающих интерфероногенной активностью, весьма ограничено. Имеется многочисленная литература и ряд обзоров [46, 47], посвященных образованию интерферона. Комплексы полирибоинзината с полирибоцитидилатом ( поли - И-поли - Ц), тюлирибогуанилата с полирибоцитидилатом ( поли - Г - поли - Ц), - полиаденилата с полиурицилатом ( поли - А-поли - Ц) блокировали развитие вирусов ящура, герпеса, бешенства и др. В настоящее время подобные комплексы, а также их сополимеры интенсивно исследуются. [17]
Аналогично всем другим вирусам, развитие энтомопатогенных вирусов в клетке хозяина зависит от ее активности и физиологического состояния. В диапаузирующих, покоящихся организмах развитие вирусов в клетках приостанавливается до начала весенней жизнедеятельности. Сенгупта на тканевых культурах показал, что только полностью жизнедеятельные, делящиеся клетки могут быть заражены и в их ядрах образуются полиэдры, тогда как в старых, отмирающих клетках совсем не образуется полиэдров. Исходя из этого может быть особо оценена специфичная роль активаторов латентных инфекций, которая не ограничена лишь усилением или ослаблением вирулентности и патогенности возбудителя, а скорее представляет собой чрезмерную активацию метаболизма, способствующую развитию вируса. [18]
Однако, в 1974 г. [203] 2 -дезокси - 5-иодуридин был всего лишь одним из трех соединений, официально одобренных для ограниченного клинического применения в антивирусной химиотерапии и используется в лечении герпеса простого зернистого кератита. Существует несколько возможных путей ингибирования развития вирусов в клетках. Они заключаются в ингибировании адсорбции вируса, ингибированин проникновения вируса и его развертывания и, наконец, в ингибировании внутриклеточных явлений. Именно этим последним свойством мы и интересуемся больше всего при обсуждении действия аналогов тимидина. Однако даже здесь способ действия многих существующих аналогов неизвестен, и многие явно схожие соединения обладают очень различным действием. [19]
Томпсон [65] в 1950 г. установил, что 2 6-диаминопурин обладает активностью по отношению к вирусу оспы на измельченной эмбриональной культуре ткани. Обнаружено, что это соединение задерживает развитие русского весеннего и летнего энцефалита в культуре ткани [66], защищает лабораторных животных от смертельной дозы Parameciutn aurelia - микроорганизма с вирусоподобными свойствами [67], а также тормозит развитие вируса полиомиелита. Найдено [65], что 2 6 8-трихлорпурин и 2 б-дихлор-7 - метилпурин активны по отношению к вирусу оспы на культуре ткани. [20]
Размер палочковидных телец, по данным Бергольда [44], составляет 42X268 ммк, по Смиту и Риверсу [226], 80X200 ммк, а по данным Танады 41 - 50X291 - 300 ммк. Развитие вируса в ячейках хроматиновой сетки происходит, как это описано ранее. Жировое тело, трахейные матрицы и гиподермис поражаются одновременно. В жировом теле вначале поражаются лишь некоторые участки, островки, которые затем расширяются и сливаются в общую пораженную массу. В то время, когда клетки жирового тела преобразуются в мешочки, наполненные гранулами вируса, кишечник перестает нормально функционировать, и через него в полость тела проникают бактерии, что приводит к гистолизу и гибели гусеницы. [21]
Меньше чем через неделю из Вашингтона пришло еще одно письмо. Меня приглашали прочесть лекцию о развитии вирусов на конференции, которая должна была состояться в Уильямстауне в середине июня - через месяц после окончания моей стажировки. Я, конечно, не имел ни малейшего намерения уезжать из Кембриджа ни в июне, ни в сентябре. [22]
Позднее оно закрепилось за группой возбудителей, открытых в 1892 г. Ивановским, которые оказались способными проходить через бактериальные фильтры. Вирусы отличаются от микроорганизмов следующими особенностями: 1) они содержат нуклеиновую кислоту только одного типа-или ДНК, или РНК; 2) для их репродукции необходима только нуклеиновая кислота; 3) они не способны размножаться вне живой клетки Вирусы, таким образом, не являются самостоятельными организмами, а используют для своего размножения живые клетки: их репродукция происходит в клйтке-хозяине. Клеточные механизмы нужны как для репликации нуклеиновой кислоты, так и для синтеза белковой оболочки вируса. Развитие вируса приводит к гибели клетки-хозяина. Вне клетки вирус существует в виде вирусной частицы ( вириона), которая состоит из нуклеиновой кислоты и белковой оболочки-капсида. Поэтому вирусную частицу называют также нуклеокапсидом. [23]
Очевидно одно - первоначальным местом действия полимера является клетка, на поверхности которой находятся заряженные группы одного или другого знака и полиэлектролит реагирует с биологической мембраной. В дальнейшем, в случае поликатионов возможно воздействие полимера с клеточной ДНК, ответственной за образование интерферона. Тот, факт, что блокада развития вирусов может осуществляться in vitro при непосредственном действии полимеров на вирусы, позволяет предположить, что полимеры тормозят репродукцию вируса на стадии освобождения нуклеиновой кислоты вирусов от белковой оболочки. Таким действием обладает, например, поливинилсульфат и другие полимеры. [24]
Аналогично всем другим вирусам, развитие энтомопатогенных вирусов в клетке хозяина зависит от ее активности и физиологического состояния. В диапаузирующих, покоящихся организмах развитие вирусов в клетках приостанавливается до начала весенней жизнедеятельности. Сенгупта на тканевых культурах показал, что только полностью жизнедеятельные, делящиеся клетки могут быть заражены и в их ядрах образуются полиэдры, тогда как в старых, отмирающих клетках совсем не образуется полиэдров. Исходя из этого может быть особо оценена специфичная роль активаторов латентных инфекций, которая не ограничена лишь усилением или ослаблением вирулентности и патогенности возбудителя, а скорее представляет собой чрезмерную активацию метаболизма, способствующую развитию вируса. [25]
При положительном результате отмечается адсорбция эритроцитов на монослое клеток с образованием различной формы многочисленных скоплений в виде цепочек, лент, розеток, гроздьев. При резко положительной реакции клетки бывают сплошь покрыты эритроцитами. В случае отрицательной реакции эритроциты свободно плавают в питательной жидкости или же на поверхности клеток адсорбированы единичные эритроциты. РГАД становится положительной, как правило, до обнаружения цито-патогенного эффекта. В более поздних стадиях развития вируса, когда появляется клеточная деструкция, РГАД бывает резко положительной - весь клеточный слой обычно облеплен адсорбированными эритроцитами. При отрицательной РГАД пробирки с зараженными культурами клеток дополнительно выдерживают в термостате для размножения вирусов. Наблюдение за ними с помощью РГАД ведут в течение шести-восьми дней. Вследствие лизиса эритроцитов в пробирки каждые два дня добавляют по 0 2 мл 0 4 % взвеси свежих стерильных эритроцитов. [26]
Фитопатогенные вирусы представляют собой нуклео-протеиды, состоящие из белков и нуклеиновых кислот. Размеры вирусных частиц чрезвычайно малы, изучать и измерять их можно лишь под электронным микроскопом. Частицы имеют палочковидную, шаровидную или нитевидную форму. Многие вирусы переходят в кристаллическую форму. Внешние условия в сильной степени влияют на развитие вирусов. По отношению к ним различают вирусы стойкие и нестойкие. Стойкие вирусы выдерживают высушивание, сильное нагревание, воздействие света и химических веществ. Нестойкие вирусы погибают при неблагоприятных условиях. [27]
Интерфероногенами предложено называть соединения, при действии которых на организм происходит образование белка - интерферона. Последний весьма эффективно ингибирует развитие различных вирусов, а также защищает клетки от бактерий и простейших внутриклеточных паразитов. Интерфероногены весьма различны по своей природе. Число низкомолекулярных соединений, обладающих интерфероногенной активностью, весьма ограничено. Имеется многочисленная литература и ряд обзоров [46, 47], посвященных образованию интерферона. Комплексы полирибоинзината с полирибоцитидилатом ( поли - И-поли - Ц), тюлирибогуанилата с полирибоцитидилатом ( поли - Г - поли - Ц), - полиаденилата с полиурицилатом ( поли - А-поли - Ц) блокировали развитие вирусов ящура, герпеса, бешенства и др. В настоящее время подобные комплексы, а также их сополимеры интенсивно исследуются. [28]
Моравского поля ( южная часть Моравии и окрестности Вены), имеется популяция пилильщика без вируса-возбудителя этой болезни. Здесь периодически происходят вспышки массового размножения вредителя, которые прекращаются через несколько лет с появлением вируса. Хозяин вируса практически исчезает, но через несколько лет он снова появляется свободный от вируса, численность его нарастает до массового размножения, а затем с появлением вирусной инфекции снова наступает перелом. На высокогорных торфяниках Шумавы и в Крконошах в Чехословакии на сосне обитают популяции N. Ежегодно здесь можно обнаружить на каждом дереве большое количество яиц, отложенных самками пилильщика. Паразитами поражается от 30 до 60 % яичек этого вредителя, из остальных яиц отрождаются личинки, но каждый год от полиэдроза погибает 98 - 99 % личинок 3 - 4-го возраста. Остающиеся 1 - 2 % окукливающихся личинок способны обеспечить вновь достаточное потомство для сохранения популяции пилильщика, его паразитов и развития вируса. [29]
Ксерос [320] описал вирус, выделенный из личинок долгоножки Tipula paludosa Meig. Англии, который поражает жировое тело личинок. При этой болезни в органах хозяина не образуются какие-либо включения, полиэдры или гранулы. Оло-вянно-серый цвет тела личинок при заболевании изменяется на розоватый от розовой массы вируса паразита в гемолимфе и в органах личинки. Жировое тело сильно гипертрофируется, а в тканях образуется много узелков, которые у вскрытой личинки имеют розовый цвет, а в отраженном свете выглядят синеватыми, зелеными или пурпурными. К концу развития болезни стенки клеток жирового тела разрываются, и из них в гемолимфу переходит огромное количество гранул вируса. Более 15 % всей массы тела личинки приходится на вирус. В пораженных клетках можно обнаружить сильносветопреломляющую сетку, которая обволакивает неизменившееся ядро клетки. В ячейках этой сетки появляются первые радужные скопления вируса, которые постепенно заполняют непрерывно увеличивающуюся клетку. Сетчатая структура в плазме клетки постепенно утрачивает способность воспринимать красители. Как установили Смит [217, 218] и Берд [60], а затем и Ксерос [320], в цитоплазме пораженных клеток содержится большое количество округлых пустых оболочек размером 120 - 150 ммк. На первой фазе развития вируса внутри некоторых оболочек появляется в центре незначительная по размеру потемневшая масса, у других эта масса больше, а у третьих она заполняет всю оболочку. С развитием болезни количество пустых мембран уменьшается и на срезах можно обнаружить полностью сформировавшиеся вирусы, внутренняя часть которых целиком заполнена ДНК. [30]