Разделение - сахар
Cтраница 4
Для всех сортов была исследована пригодность для разделения аминокислот и Сахаров в системах с неподвижной водной фазой, для разделения алкалоидов спорыньи в системе со стационарным формамидом и для разделения мало полярных стероидов в системе с обращенными фазами. Из результатов, приведенных в табл. 8 и на рис. 39, следует, что для разделения аминокислот вообще несколько более пригодны бумаги Шлейхер-Шюлль, для алкалоидов, напротив - бумаги ватман; для разделения Сахаров и стероидов те и другие примерно одинаково пригодны. Очень хорошее разделение всех типов веществ было достигнуто па бумагах мупктелл. [46]
Разделение углеводов на примере Сахаров методом тонкослойной хроматографии может быть осуществлено на таких сорбентах, как силикагель Г, окись алюминия. Сахара распределяются не по всей хроматограмме, а собираются группами в определенном интервале Rf в зависимости от их состава. На разделение Сахаров влияет природа растворителя, поэтому растворитель подбирают в зависимости от цели эксперимента. [47]
В последние годы метод был значительно усовершенствован. В обзорной статье [2] приведены данные о влиянии ряда факторов на разделение, а также примеры использования метода. В качестве элюента при разделении Сахаров и их производных наиболее пригоден водный спирт, и далее речь будет идти только об этом элюенте. [48]
 |
Разделение пептидов и белков. [49] |
Углеводы имеют первостепенное значение для метаболических про аессов в природных водных системах. Для понимания механизмг этих процессов важно знать природу отдельных углеводов. ТСХ и ионный обме ] применяют главным образом в сочетании с колориметрически определением. Для разделения Сахаров в будущем несомненно бу дет использована высокоскоростная ЖХ. [50]
В табл. 5.1 - 5.15 приведены опубликованные в различных работах данные о времени удерживания некоторых О-метилированных Сахаров и их производных. Для расчета величин относительного времени удерживания авторы использовали различные стандарты, поэтому, чтобы можно было сравнивать результаты, полученные значения относительного времени удерживания, там где это было возможно, пересчитаны на определенный стандарт, выбранный для каждого типа производных. Помимо ссылки на работу, в которой приведено время удерживания данного соединения или из которой взяты данные для расчета этой величины, даны ссылки и на другие работы, в которых имеются аналогичные сведения. В большинстве использованных статей и обзоров приведены копии хроматограмм разделения О-метилированных Сахаров, а не таблицы с величинами их времени удерживания. [51]
Сорбированная в верхней части колонки смесь веществ может быть разделена на отдельные компоненты хромато-графическим - методом либо в процессе вытеснения, либо при элютивном хроматографическом процессе. Идея вытеснения сводится к тому, что в колонку вводится раствор компонента, существенно десорбирующего ранее адсорбированные вещества. Адсорбция вытеснителя и разделяемых веществ должна при этом происходить на одних и тех же активных центрах сорбента. В процессе движения вытесняемой с колонки смеси веществ может происходить взаимное их вытеснение с образованием зон чистых веществ. При вытеснительной адсорбционной хроматографии, многократно использованной для разделения Сахаров [9,11,12], на выходе из колонки в момент появления первого компонента концентрация резко поднималась до некоторой величины и далее не менялась вплоть до появления зоны следующего компонента. Подобный стационарный режим вытеснения наступает при достаточной высоте колонки. Каждая зона содержит только один компонент с постоянной концентрацией вдоль колонки. [52]
Как уже было отмечено в теоретической части ( стр. Джермин и Ишервуд установили, что подвижность Сахаров на бумаге зависит от молярной доли воды в применяемом органическом растворителе. Однако при хроматографии на бумаге наиболее важным является отношение значений Rf веществ, так как от этого зависит возможность их разделения. Из отношения величин Rr например, рам-нозы и ксилозы или глюкозы следует, что максимум этого отношения достигается при определенной величине молярной доли воды. Этот максимум находится при содержании воды 0 45 и при величинах R, порядка 0 2; отсюда вытекает необходимость применения растворителей, в которых R, для обычных Сахаров составляет около 0 2, а также разделения Сахаров с перетеканием или многократного хроматографирования. [53]
Амины можно подвергать диазогированию и сочетанию. Для открытия соединений, способных сочетаться с солями диааония, эта реакция может быть использована при хроматографировании с таким же успехом, как при колориметрировании. Эстрон, эстрадиол и эстриол были разделены после сочетания с солью диазония. Для разделения Сахаров ( и стеринов) была использована хроматография эфиров n - фенилазобензойной кислоты. Метиловые эфиры аминокислот были разделены методом хроматографической адсорбции N-азобензол-я - сульфонильных производных на окиси алюминия, обработанной 10 % - ным раствором уксусной кислоты в метиловом спирте. Холевая и дезоксихолевая кислоты были разделены после этерификации с помощью w - бром-я-метилазобензола. Этиловые эфиры аминокислот дают с азобензол-п-изоцианатом окрашенные производные, разделяющиеся на окиси алюминия. [54]
Страницы: 1 2 3 4