Cтраница 2
На колонке длиной 7 5 м, заполненной активированным углем с размером частиц 20 / 48 меш при 20, и скорости потока гелия 100 мл / мин [48] кислород элю-ируется первым со временем удерживания около 13 - 15 мин. Азот выходит из колонки на 2 - 3 мин позже. Отмечено небольшое размытие хвостов пиков, но пики хорошо разделены. [16]
Размытие хвоста пика обычно вызывается адсорбцией растворенного вещества твердым носителем, на который нанесена неподвижная фаза. Таким образом, при хроматографическом анализе этанола на набивке, состоящей из целита и силикона, асимметрия пика должна вызываться не взаимодействием между этанолом и силиконом, а адсорбцией этанола на целите. Основная масса растворенного вещества непрочно связывается с распределяющей жидкостью, но небольшие количества его крепко удерживаются целитом и элюируются медленно. Из-за этого и происходит размытие хвоста пика. Найт [68] обнаружил, что размытие хвоста пика можно уменьшить, избегая тех концентраций, при которых адсорбционная изотерма сильно искривляется. Практически этого легче всего достигнуть, поддерживая все время низкую концентрацию вещества на колонке. [17]
Джемс и др. [ 631 наблюдали, что твердый носитель, использованный ими ( целит 545), не является инертным и поглощает амины, приводя к размытию хвоста каждого пика. Предварительная обработка носителя раствором едкого натра в метаноле уменьшает, но не исключает полностью размытие хвоста пика. Это размытие обычно происходит при хроматографическом разделении таких полярных соединений, как спирты и амины, когда носитель полностью не дезактивирован. Интересно бы выяснить, не удастся -, ли уменьшить размытие хвостов пиков, наблюдающееся при разделении метиламинов, применяя специальным образом дезактивированные носители, использованные при разделении жирных аминов, или неорганические соли, использованные при разделении производных пиридина ( см. гл. Джемс и др. [63] утверждают, что наименьшее количество амина, еще обнаруживаемое с помощью титрационной ячейки, равно 0 3 мкг-экв. Это составляет 2 мкг для аммиака, 4 мкг для метиламина, 7 мкг для диметиламина и 8 мкг для триметиламина. [18]
Размытие хвоста пика обычно вызывается адсорбцией растворенного вещества твердым носителем, на который нанесена неподвижная фаза. Таким образом, при хроматографическом анализе этанола на набивке, состоящей из целита и силикона, асимметрия пика должна вызываться не взаимодействием между этанолом и силиконом, а адсорбцией этанола на целите. Основная масса растворенного вещества непрочно связывается с распределяющей жидкостью, но небольшие количества его крепко удерживаются целитом и элюируются медленно. Из-за этого и происходит размытие хвоста пика. Найт [68] обнаружил, что размытие хвоста пика можно уменьшить, избегая тех концентраций, при которых адсорбционная изотерма сильно искривляется. Практически этого легче всего достигнуть, поддерживая все время низкую концентрацию вещества на колонке. [19]
К этим аминокислотам относятся лейцин, изолейцин, норлейцин, валин, норва-лин, а-амино-и-масляная кислота и аланин. При окислении глицина образуется формальдегид, который в условиях эксперимента полимеризуется и не может быть определен. Альдегиды, полученные из фенилаланина и метионина, требуют для элюирования более высокой температуры колонки, чем применяемая в этом методе. Тем не менее получают хорошее разделение изучаемых соединений при слабом размытии хвостов пиков, а производные лейцина и изолейцина отделяются друг от друга. [20]
До настоящего времени не существует ни одной набивки, которая позволила бы разделить углекислый газ, азот и кислород при комнатной температуре. Поэтому в большинстве методов для такой цели используют две колонки, сменные или соединенные либо последовательно, либо параллельно. Во всех методах с двумя сменными колонками для разделения кислорода и азота применяют молекулярное сито в сочетании с колонкой для ГАХ или ГЖХ для отделения углекислого газа от сложного воздушного пика. Слой огнеупорного кирпича расположен ближе к отверстию дозатора. Огнеупорный кирпич увеличивает длину колонки, благодаря чему она лучше соответствует прибору, а также уменьшает скорость потока, что приводит к лучшему разделению. Более длинная угольная колонка оказывает слишком большое сопротивление потоку, вызывая размытие хвоста пика. Следует отметить, что в продаже имеются различные сорта активированного угля - с высокой, низкой и средней активностью. [21]
Большинство исследователей на практике используют набивки, содержащие 15 - 40 % жидкости. Вероятно, оптимум зависит от исследуемой комбинации растворенное вещество - растворитель, а также и от других причин. Так, при необходимости улавливать фракции элюируемых веществ для химического анализа в хро-матографическую колонку вводят относительно большие пробы, что требует ( во избежание перегрузки) высоких отношений жидкость - твердое тело. В то же время для осуществления быстрого разделения рекомендуется применять низкое отношение жидкость - твердое тело для уменьшения удерживаемых объемов. Если, однако, твердый носитель обладает адсорбционной способностью, низкие отношения будут приводить к размытию хвоста пика. В заключение можно сказать, что высокие отношения жидкость - твердое тело вызывают некоторое снижение эффективности тарелки и увеличение удерживаемых объемов; они необходимы при хроматографическом анализе больших проб. [22]
С-22 с нанесенными на него 3Q % нингидрина. Набивку в реакционном сосуде а можно эффективно использовать для пяти отдельных проб. При более низкой температуре реакция обычно не завершается. Хроматографическая колонка б подробно описана ниже при изложении условий для хроматографического разделения. Реакционный сосуд в служит для гидрокрекинга альдегидов до метана и воды. Катализатор сохраняет активность после анализа 50 проб. При работе при пониженных температурах наблюдается значительное размытие хвоста пиков. Осушительная колонка г служит для удаления из газового потока введенной воды и воды, образовавшейся в результате реакции. Набивку следует сменять после пяти опытов. [23]
Хроматографическое разделение низших спиртов затрудняется обычно присутствием в пробе воды, часто в виде основного компонента. Это затруднение связано с тем, что спирты труднее отделить от воды, чем соединения, содержащие другие функциональные группы, из-за близости упругостей их паров, расторимостей и реакционной способности. В некоторых случаях спирты концентрируют путем перегонки с паром и экстракции или выделяют в виде 3 5-динитробензоатов, но, как правило, их приходится хроматогра-фически разделять в присутствии воды, а иногда требуется также определять количество воды. При хроматографическом разделении водных растворов низших спиртов используют три основные методики. По первой из них применяют неполярную жидкую фазу, так что вода элюируется первой, а затем элюируются спирты в порядке увеличения числа атомов углерода в молекуле. Трудность, связанная с использованием этой методики, состоит в том, что вода на большинстве хроматограмм выходит в виде большого асимметричного пика с размытым хвостом. Это весьма усложняет количественный анализ соединений, пики которых следуют непосредственно за пиком воды, поскольку они могут оказаться на хвосте пика воды. По второй методике применяют высокополярную неподвижную жидкость, например глицерин или полиэтиленгликоль; такие жидкости удерживают воду втечение длительного времени, так что низшие спирты элюируются до нее. Здесь, следовательно, устраняются осложнения, связанные с размытием хвоста пика воды. Третья методика, используемая в ряде случаев, связана с выбором детектора. Например, пламенный водородный детектор дает небольшой положительный сигнал по отношению к воде, тогда как сигнал по отношению к спирту бывает значительно выше ( фиг. [24]
До настоящего времени не существует ни одной набивки, которая позволила бы разделить углекислый газ, азот и кислород при комнатной температуре. Поэтому в большинстве методов для такой цели используют две колонки, сменные или соединенные либо последовательно, либо параллельно. Во всех методах с двумя сменными колонками для разделения кислорода и азота применяют молекулярное сито в сочетании с колонкой для ГАХ или ГЖХ для отделения углекислого газа от сложного воздушного пика. Слой огнеупорного кирпича расположен ближе к отверстию дозатора. Огнеупорный кирпич увеличивает длину колонки, благодаря чему она лучше соответствует прибору, а также уменьшает скорость потока, что приводит к лучшему разделению. Более длинная угольная колонка оказывает слишком большое сопротивление потоку, вызывая размытие хвоста пика. Следует отметить, что в продаже имеются различные сорта активированного угля - с высокой, низкой и средней активностью. Необходимо также учитывать возможность обработки активированного угля материалами, уменьшающими размытие хвоста пиков. Эгерстен и др. [24], например, нашли, что добавление 1 5 % ( по весу) сквалена практически исключает размытие хвоста пиков-углеводородов с 6 и 7 атомами углерода при разделении их на печной саже. [25]