Цифровое разрешение
Cтраница 2
Это действительно так, но здесь возникают две проблемы. Если в эксперименте сильно различается цифровое разрешение по обеим координатам, а также если он содержит противофазные сигналы, то симметризация сушественно понизит чувствительность за счет того, что менее интенсивные сигналы по V. Данное обстоятельство исключает использование симметризации для экспериментов СО5У, проводимых в соответствии с рекомендациями, предложенными в этой главе. Однако эта процедура может оказаться полезной, если цифровое разрешение по обеим координатам почти не различается, или для экспериментов, в которых сигналы имеют одинаковую фазу ( как в ТЧОЕЗУ, описанном в разд. [16]
Если хотя бы по одной координате цифровое разрешение является адекватным, то эксперимент СО8У представляет собой удобный метод определения величины расщепления для тех случаев, когда нз-за сильного перекрывания сигналов возникают сложности с их интерпретацией. При этом мы используем то обстоятельство, что сигналы распределены по двум координатам, а это увеличивает вероятность разделения перекрывающихся мультиплетов. Измерения могут быть просто проведены для сечений по V2 при условии, что линии отстоят одна от другой на величину, большую, чем эффективная ширина линии. В тех спектрах, в которых ЛИНни имеют ту же самую фазу ( т.е. в обычных одномерных спектрах), линии вовсе не разрешаются, если они отстоят одна от другой на величину, значительно меньшую ширины линнн. Однако для противофазных дублетов, как мы уже знаем, линии остаются разрешенными, и только их интенсивность падает. [17]
Все этн параметры являются практически достижимыми для спектрометров, оснащенных современными системами обработки данных. Если мы попытаемся провести описанный выше двумерный эксперимент с использованием такой же полосы частот и такого же цифрового разрешения в обоих измерениях, то для этого потребуется 50000 слов для представления переменной 12 и дважды по 25000 слов для ( 1; что в целом составит 2500000000 слов. Очевидно, нам необходимо уточнить наши представления об оцифровке спектров, когда мы приступаем к двумерным ЯМР-экспериментам. [18]
 |
Слабопольная часть спектра, приведенного на а. [19] |
В и С в слабом поле, которые могут быть отнесены к амидным НН-протонам. В принципе, можно было бы провести эксперимент СОЗУ так, чтобы включить все сигналы спектра, но при этом возникнут определенные проблемы. При этом либо придется выполнять эксперимент с очень низким цифровым разрешением, что в этом случае никак нельзя считать приемлемым, либо он займет много времени и в ходе него возникнет громоздкий массив данных. От мощности имеющегося в распоряжении компьютера зависит, составит или не составит проблему размер массива данных; однако большое время регистрации спектра - это фундаментальное препятствие. [20]
Однако ширины протонных линий в спектрах небольших молекул могут быть 0 1 Гц и меньше. Поэтому, если мы хотим наблюдать н интерпретировать тонкую структуру в протонном спектре, нам необходимо улучшить цифровое разрешение, поскольку, для того чтобы правильно воспроизвести форму линии в спектре, л должно быть заметно меньше ширины линии. [22]
 |
Дополнение нулями данных во временной области увеличивает число точек в частотном спектре, улучшая его вид. [23] |
Это вполне естественно, так как обычно в первую очередь приходится заботиться о чувствительности. Многие гетероядра имеют низкое природное содержание, а тонкая структура в их спектрах отсутствует. Среды обычных ядер заслуживающее упоминания исключение составляет 31Р, В ЯМР 31Р высокая резонансная частота сочетается с большим диапазоном химических сдвигов и наличием расщеплений за счет гомоядерного спин-спннового взаимодействия, поэтому достижение адекватного цифрового разрешения может оказаться трудным делом. [24]
Это действительно так, но здесь возникают две проблемы. Если в эксперименте сильно различается цифровое разрешение по обеим координатам, а также если он содержит противофазные сигналы, то симметризация сушественно понизит чувствительность за счет того, что менее интенсивные сигналы по V. Данное обстоятельство исключает использование симметризации для экспериментов СО5У, проводимых в соответствии с рекомендациями, предложенными в этой главе. Однако эта процедура может оказаться полезной, если цифровое разрешение по обеим координатам почти не различается, или для экспериментов, в которых сигналы имеют одинаковую фазу ( как в ТЧОЕЗУ, описанном в разд. [25]
Две оставшиеся главы ( 3 и 7) посвящены экспериментальным методикам. Я думаю, что очень важно уметь запасаться опытом экспериментальной работы е ЯМР всякий раз, когда для этого появляется возможность. Тогда достаточно сухие и абстрактные рассуждения приобретают совершенно другую окраску. Тот, кто сам постоянно работает на импульсном фуръе-спектрометре, без большого труда может понять важность цифрового разрешения, времени ре: истрации данных, функций фильтра и т.п. Невозможно дать исчерпывающее руководство по всему экспериментальному ЯМР [1] в двух главах, поэтому я вынужден был провести отбор материала. Я сознаю, что мой выбор может показаться довольно странным. Он основан на моих личных наблюдениях за многими исследователями, которые начинали осваивать спектрометры с высокими магнитными полями, и на анализе тех трудностей, с которыми сталкивались такие новички. [26]
Эти выкладки предназначены только для того, чтобы проиллюстрировать ход мысли при задании параметров эксперимента. Легко представить мотивы, на основании которых следует уменьшать или увеличивать параметры. Например, форма линии редко бывает лоренцева, потому что даже для фазочувствнтельных спектров вероятно использование в каком-либо виде гауссова окна. Во всяком случае, при решении практических задач наши оценки приемлемого ослабления и минимально возможного расщепления могут быть переосмыслены. Для образцов, дающих интенсивный спектр, может быть вполне приемлемым ослабление более чем в 2 раза. Важно заранее представить себе то, что мы хотим зарегистрировать, и попытаться оценить необходимое цифровое разрешение. На практике обычно хотят побыстрее записать возможный спектр в качестве стартовой точки исследования. Более тонкие эксперименты, возможно, на более узких полосах частот, можно провести позднее, учитывая результаты, полученные в первом эксперименте. [27]
Страницы: 1 2