Cтраница 1
Зерна гелей микросферические, поставляются в набухшем состоянии. Хранить рекомендуется в холодильнике. [1]
Объем колонки заполнен зернами геля, растворителем, находящимся в порах геля и, следовательно, связанным с гелем, и растворителем, занимающим пространство между зернами геля и свободно протекающим вдоль слоя. [2]
Коэффициент распределения растворенного вещества внутри зерен геля и окружающей его воды обозначим К. При / ( 0 вещество не поступает в зерна геля или исключается из него. Если К, лежит в пределах от 0 до 1, то вещество частично исключается из геля сефадекса, а если значение / С превышает 1, то это указывает на адсорбцию между матрицей геля и сорбируемым веществом. [3]
Необходимо отметить, что часть воды в зернах геля находится в связанном состоянии ( гидратационная) и вследствие этого не может служить растворителем. [4]
Вода в колонке с сефадексом заполняет как внутренние поры зерен геля, так и межзерновое пространство. [5]
Разделение смеси веществ происходит вследствие того, что размеры молекул этих веществ различны и зерна геля с порами определенного диаметра пропускают только молекулы, диаметр которых меньше. При пропускании анализируемой смеси более мелкие молекулы проникают в поры и поэтому движутся вдоль зерен геля медленнее, чем крупные молекулы, не проникающие в поры. [6]
Разделение смеси веществ происходит в том случае, если размеры молекул этих веществ различны, а диаметр пор зерен геля постоянен и может пропускать лишь те молекулы, размеры которых меньше диаметра отверстий пор геля. При фильтровании раствора анализируемой смеси более мелкие молекулы, проникая в поры геля, задерживаются в растворителе, содержащемся в этих порах, и движутся вдоль слоя геля медленнее, чем крупные молекулы, не способные проникнуть в поры. Таким образом, гель-хроматография позволяет разделять смесь веществ в зависимости от размеров и молекулярной массы частиц этих веществ. Этот метод разделения достаточно прост, быстр и, что самое главное, он позволяет разделять смеси веществ в более мягких условиях, чем другие хроматографические методы. [7]
В гель-хроматографии ( ситовая хроматография) происходит разделение компонентов по размерам в результате того, что поры в зернах геля способны пропускать лишь молекулы меньше критического размера. [8]
Объем колонки заполнен зернами геля, растворителем, находящимся в порах геля и, следовательно, связанным с гелем, и растворителем, занимающим пространство между зернами геля и свободно протекающим вдоль слоя. [9]
Через 10 - 15 мин наступает коагуляция. Желательно иметь зерна геля размером 4 - 6 мм, поэтому следует избегать перемешивания при промывании. Промытый гель наносят тонким слоем на стекло и высушивают в сушильном шкафу при частом перемешивании 18 - 30 ч при 40 - 50 С, затем 10 - 12 ч при 50 - 100 С. Препарат отсеивают от пыли и мелочи, просушивают при 120 - 130 С в течение 4 - 5 ч, а затем прокаливают при 300 - 320 С в течение 2 ч в муфельной печи. Регенерацию производят высушиванием при 150 С до постоянной массы. [10]
Через 10 - 15 мин наступает коагуляция. Желательно иметь зерна геля размером 4 - 6 мм, поэтому следует избегать перемешивания при промывании. Промытый гель наносят тонким слоем на стекло и высушивают в сушильном шкафу при частом перемешивании 18 - 30 ч при 40 - 50 С, затем 10 - 12 ч при 50 - 100 С. Препарат отсеивают от пыли и мелочи, просушивают при 120 - 130 С в течение 4 - 5 ч, а затем прокаливают при 300 - 320 С в течение 2 ч в муфельной печи. [11]
По возможности избегают перемешивания. Желательно, чтобы после промывания зерна геля имели размер 4 - 6 мм. [12]
Гели были впервые применены для разделения жидких смесей Поратом и Флодином в 1959 г. В гель-хроматографии подвижной и неподвижной фазами служит одна и та же жидкость, т.е. растворитель. Часть жидкости, протекающая вдоль зерен геля ( твердого носителя), выполняет роль подвижной фазы и переносит компоненты смеси вдоль колонки. Но другая часть жидкости проникает в поры зерен геля и играет роль неподвижной фазы. [13]
Коэффициент распределения растворенного вещества внутри зерен геля и окружающей его воды обозначим К. При / ( 0 вещество не поступает в зерна геля или исключается из него. Если К, лежит в пределах от 0 до 1, то вещество частично исключается из геля сефадекса, а если значение / С превышает 1, то это указывает на адсорбцию между матрицей геля и сорбируемым веществом. [14]
При высушивании на воздухе слой се-фадекса утрачивает влажный блеск. Сефадекс следует сушить так, чтобы оставались различимыми зерна геля. [15]