Cтраница 1
Раствор колхицина не требуется вводить непосредственно в сосуды, но необходимо производить инъекцию с некоторым давлением, чтобы впрыскиваемая жидкость, разрывая клеточные стенки, проникала в проводящую систему растения. За несколько дней до обработки полив растений прекращают с тем, чтобы к моменту инъекции они были слегка привядшими. Повреждения, наносимые шприцем и разрывами клеточных стенок, в общем являются незначительными и у большинства растений легко заживают. [1]
Раствор колхицина хорошо всасывается корнями. Хотя при воздействии на корни наблюдается большая задержка в развитии и нередко значительная гибель обработанных растений, многие исследователи применяли этот метод для колхицинирования различных растений. Тетраплоиды гречихи получены при всасывании корневой системой молодых растений 0 05 - 0 1 % - ного раствора колхицина на протяжении 24 - 48 часов. Сходным образом у томата кончики корней четырехнедельных проростков погружают в 0 4 % - ный раствор колхицина на 96 - 144 часа. [2]
Раствор колхицина лучше проникает в ткани растений в разреженной атмосфере. Поэтому обработка прорастающих семян и молодых ростков в условиях вакуума проходит более успешно и требует для своего завершения значительно меньше времени по сравнению с обработкой в обычных условиях. Так, тетраплойды красного клевера были получены при погружении проростков в раствор колхицина в условиях вакуума в течение 40 минут. Обрабатывая проростки красного клевера раствором колхицина в течение одного часа с применением трех последовательных снижений давления, удалось значительно повысить выход тетраплоидных форм. Тетрашюидные формы спаржи оказалось возможным получить при обработке пятидневных проростков в условиях вакуума всего в течение 10 минут. [3]
Растворы колхицина в разбавленных минеральных кислотах окрашены в интенсивный желтый цвет. При растворении колхицина в концентрированной серной кислоте получается желтая окраска, переходящая при умеренном нагревании в гранатово-красную; концентрированная азотная кислота ( р 1 4) окрашивается в фиолетовый цвет, вскоре переходящий в желтый. После добавления к этому желтому раствору избытка раствора щелочи окраска становится оранжево-красной. [4]
Обработка молодых растений раствором колхицина увеличивает количество наследственных структурных элементов ядра клетки - хромосом, вызывая так называемую полиплоидию, в результате чего получаются новые, более урожайные формы растений. [5]
Сухие семена погружают в раствор колхицина обычно с концентрацией от 0 1 до 0 2 % при экспозиции от трех часов до десяти суток. Однако у некоторых видов растений погружение семян в раствор колхицина на длительный срок сильно задерживает прорастание, поэтому перед обработкой семена рекомендуется помещать в чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу и лишь после их набухания подливать раствор колхицина. После окончания воздействия перед посевом семена тщательно промывают в проточной воде. У растений, высокочувствительных к колхицину, например у гороха, положительные результаты при обработке семян могут быть достигнуты при использовании лишь очень низких концентраций. [6]
При набухании семян в растворе колхицина были получены полиплоидные формы у табака, райграса, красного перца, разновидностей капусты. В работе с картофелем семена проращивают в чашках Петри на субстрате, состоящем из равных частей 0 5 % - ного колхицина и 2 % - ного агара. После прорастания семена промывают и высаживают. [7]
Предобработка в 0 2 % - ном растворе колхицина в течение двух часов. [8]
Для определения оптимальной концентрации и продолжительности обработки рекомендуется взять растворы колхицина четырех концентраций ( 0 05; 0 1; 0 2; 0 5 %) и каждый из них испытать при трех экспозициях ( 12, 24 и 48 часов), для чего требуется провести опыт в 12 вариантах. [9]
Хорошие результаты достигаются также при использовании ватных тампонов, смоченных раствором колхицина, которые накладывают на самые молодые зачатки листьев в непосредственной близости от конуса нарастания. Эту операцию повторяют в течение 2 - 5 дней, причем ватные тампоны ежедневно по нескольку раз пропитывают раствором колхицина. Многочисленные литературные данные свидетельствуют об эффективности этого метода в применении к различным растениям. У злаков, в частности у риса, ватный тампон, пропитанный раствором колхицина, вставляют в продольный разрез ростка, достигшего длины 3 - 5 см. Обработанные проростки содержат при высокой влажности и обработку повторяют. Через день после второй обработки растения промывают водой и высаживают. У кукурузы проростки, достигшие 2 - 3 см длины, обрезают на 0 7 - 0 8 см от верхушки и, удалив препаровальной иглой часть листочков, вставляют, в образовавшуюся трубку тампон, который 2 - 3 раза в сутки смачивают раствором колхицина. [10]
Последовательная множественная предобработка - объекты обрабатывают 0 2 % - ным раствором колхицина в течение часа, а затем 0 002-молярным раствором 8-оксихинолина с охлаждением до 10 - 14 С в течение одного часа. [11]
Одновременная множественная предобработка: объекты обрабатываются 0 5 % - ным раствором колхицина в насыщенном водном растворе парадихлорбензола в течение часа. [12]
Эти препятствия устраняются при применении частичной этиоляции перед обработкой колхицином и добавлении гиббе-релловой кислоты к раствору колхицина. Благоприятное действие гибберелловой кислоты заключается в ускорении - темпов клеточного деления и в удлинении клеток, благодаря чему клеточные стенки становятся более проницаемыми для раствора колхицина. При этиоляции также происходит удлинение клеток, что в комбинации с увеличением количества делящихся клеток при внезапном выставлении на солнечный свет, в свою очередь, может способствовать успешному воздействию колхицина. [13]
Проросшие семена с длиной корешков 1 - 1 5 см заливают 0 2 % - ным раствором колхицина на 2 часа, после этого корешки отрезают и помещают в смесь из 0 002-молярного раствора 8-оксихинолина и насыщенного раствора парадихлорбензола ( 1: 1) на 3 часа. [14]
Самым простым приемом является погружение проростков в водные растворы колхицина или помещение их на фильтровальную бумагу, смоченную раствором колхицина. [15]