Cтраница 3
Имеется ряд приемов массовой обработки точек роста молодых растений с предохранением корней от контакта с колхицином. В простейшем случае проростки в фазе развернутых семядолей связывают пучками и, перевернув корнями вверх, погружают гипокотили в раствор колхицина. Остающиеся вне раствора корешки покрывают влажной фильтровальной бумагой. Этим способом получены тетраплоидные формы у льна, сахарной свеклы, хлопчатника. [31]
Эти препятствия устраняются при применении частичной этиоляции перед обработкой колхицином и добавлении гиббе-релловой кислоты к раствору колхицина. Благоприятное действие гибберелловой кислоты заключается в ускорении - темпов клеточного деления и в удлинении клеток, благодаря чему клеточные стенки становятся более проницаемыми для раствора колхицина. При этиоляции также происходит удлинение клеток, что в комбинации с увеличением количества делящихся клеток при внезапном выставлении на солнечный свет, в свою очередь, может способствовать успешному воздействию колхицина. [32]
Существует и другой способ. Семена проращивают в чашках Петри на фильтровальной бумаге, а когда корни врастут в бумагу, ее вынимают и опрокидывают в другую чашку, наполненную раствором колхицина, так что точки роста погружаются в него, а корни остаются свободными. По окончании обработки проростки промывают водой и высаживают. Сходным приемом получены тетраплоиды у клевера и кукурузы. Молодые растения можно раскладывать на полоску бумаги, сложенную гармошкой, при этом корни кладут на гребень бумаги, а в раствор колхицина погружают другую сторону сложенной бумаги, в которую заложены верхние части проростков. Чтобы корни не подсыхали, растения накрывают стеклянным колпаком. [33]
Концы побегов или опускались в пробирки с водным раствором колхицина, причем у части из них листья, находящиеся в растворе, подрезались ( для лучшего проникновения колхицина внутрь тканей), или смачивались раствором колхицина в агар-агаре, причем смазывание повторялось несколько раз. [34]
Сухие семена погружают в раствор колхицина обычно с концентрацией от 0 1 до 0 2 % при экспозиции от трех часов до десяти суток. Однако у некоторых видов растений погружение семян в раствор колхицина на длительный срок сильно задерживает прорастание, поэтому перед обработкой семена рекомендуется помещать в чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу и лишь после их набухания подливать раствор колхицина. После окончания воздействия перед посевом семена тщательно промывают в проточной воде. У растений, высокочувствительных к колхицину, например у гороха, положительные результаты при обработке семян могут быть достигнуты при использовании лишь очень низких концентраций. [35]
Нанесение капель является одним из самых надежных способов обработки двудольных растений. Однако этот прием имеет ряд недостатков: скатывясь по гипокотилю и просачиваясь в почву, капли раствора могут вызвать задержку в развитии корней; при быстром испарении воды колхицин влияет на точку роста очень короткое время, и, наконец, при поливе растений раствор колхицина смывается. Эти недостатки до некоторой степени устранимы при применении водных растворов колхицина в смеси с агаром и глицерином. [36]
Метод инъекции успешно был применен для удвоения числа хромосом у пшеницы и кукурузы. У кукурузы обработку этим способом проводят в фазе 1 - 2 листочков в утренние часы. Раствор колхицина ( 0 1 - 0 2 %) вводят в центральную часть стебелька на уровне корневой шейки. Впрыскивание заканчивают, когда вверху, в раструбе развивающегося листа, появляется капля раствора. На следующий день инъекцию повторяют. [37]
Колхицин-агаровая среда наносится на почки в подогретом состоянии. Колхицин действует на растение, пока раствор не подсохнет. Широко применяются более жидкие колхицин-агаровые смеси ( раствор колхицина нужной концентрации в 0 4 % - ном водном растворе агара), которые наносятся на верхушечную точку роста каплями по способу, описанному выше. Специфика воздействия в данном случае определяется условиями, которые необходимо соблюдать, чтобы обеспечить у взрослого растения развитие обработанных почек или побегов. [38]
Удвоение числа хромосом было получено при помощи колхицина. Семена проращивали на его 0 5 - 0 7 % - ном водном растворе. А у видов самостерильных и триплоидных воздействию раствора колхицина подвергаются клубни в вакуум-эксикаторе. [39]
Положительные результаты дает обработка органов взрослых растений методом инъекций. Для пшеницы разработан метод полиплоидизации путем инъекции 0 1 - 1 0 % - ного раствора колхицина в цветки на трех стадиях развития: до опыления, во время опыления и после опыления. Тетраплоидные формы у винограда получены при введении раствора колхицина в побеги на различных стадиях развития, начиная от только что раскрывшихся почек до молодых побегов длиной 5 см. Инъекция раствора колхицина в почки маточных растений капусты на самых ранних стадиях их развития оказалась очень эффективным приемом в индуцировании полиплоидии у этой культуры, позволившим значительно повысить образование полностью тет-раплоидных, не химерных растений. Для инъекции в этом случае применяют 0 25 % - ный раствор колхицина. [40]
Известны приемы обработки водным раствором колхицина с помощью шерстяной нити, продернутой через побег растения. Нижний конец нити погружают в маленький сосуд с раствором, укрепленный на растении. Рекомендуется также использование хлопковых нитей, пропитанных раствором колхицина и ростовых веществ в определенной концентрации. Нити высушивают и хранят в стеклянном сосуде. [41]
У винограда на почках, которые только что начинают прорастать, раздвигают молодые листочки, покрывающие конус нарастания, и удаляют покров волосков. Затем на точку роста накладывают ватный тампон, пропитанный раствором колхицина. Обработку повторяют на протяжении трех дней, пропитывая тампон раствором колхицина несколько раз ежедневно. [42]
Обработку начинают, когда корешки углубятся в почву и незадолго до того, как первый листочек пробивает колеоптиле. Влажную подстилку удаляют и колеоптиле отрезают лезвием бритвы на расстоянии около 1 5 см над зерном. Оставшийся чех-лик побега сбоку царапают иглой, чтобы облегчить попадание раствора колхицина. Затем в чашку наливают раствор колхицина с таким расчетом, чтобы он покрыл кончики проростков, но не достигал корешков. В этом случае надобность в надавливании стеклянной пластинкой отпадает, так как точки роста погружаются в раствор под тяжестью зерен. [43]
Тетрашюидные формы винограда получают, обрабатывая пазушные почки вязкой, долго не высыхающей смесью, способной проникать в складки молодых листочков и между защитными волосками. Она состоит из 0 5 % - ного раствора колхицина в 10 % - ном водном растворе глицерина с добавлением смачивающего реактива сантомераза. Однако этот метод недостаточно результативен, что объясняется плохим прониканием раствора колхицина через клеточные стенки и медленным темпом клеточного деления в обрабатываемых почках. [44]
Приготовленные таким образом растения на Здня закрывают горшками, снимая их только на ночь. На четвертый день горшки снимают, и растения получают нормальное солнечное освещение. На следующий день почки обрабатывают 0 5 % - ным раствором колхицина в 10 % - ном водном растворе глицерина с добавлением гиббереллина из расчета 10 мг на 1 л раствора. [45]