Cтраница 2
Выделение антибиотика из отфильтрованного раствора и его очистку в настоящее время осуществляют ионообменным методом. Нативный раствор поступает на сорбцию стрептомицина катионитом, например сополимером метакриловой кислоты с ди-винилбензолом. Этот сополимер обладает высокой избирательностью сорбционного действия по отношению к стрептомицину, что обеспечивает элюат с большим содержанием антибиотика. [16]
Температуру в чане / поддерживают путем циркуляции рассола через змеевик, расположенный внутри чана. С помощью центробежного насоса 2 нативный раствор подают на колонну со стеклянной ватой 3 для отделения белковых веществ, вызывающих помутнение раствора. Из спускного штуцера колонны 3 раствор поступает сверху на первую головную колонну 7 через ротаметр 4 и гребенку 6, на которой находятся материальные линии для подаваемых растворов. [17]
При использовании радиоактивного предшественника ( ацетат натрия 1C - 14 и 2С - 14) было показано ( табл. 53), что продуцент леворина, выращиваемый в нативных растворах разного возраста, более интенсивно включает меченый ацетат в жирные кислоты и леворин, чем продуцент, выращенный на исходной среде. Это, по мнению авторов, может свидетельствовать о наличии в нативных растворах факторов, ускоряющих синтез леворина и жирных кислот, но не позволяет рассматривать активацию синтеза леворина в нативных растворах разного возраста как следствие подавления в этих условиях синтеза жирных кислот. [18]
Наиболее широко в микробиологической промышленности и родственных отраслях применяются методы прямого фильтрования, однако с их помощью не всегда удается достичь полной очистки культуральных жидкостей. Например, в производстве антибиотиков барабанные вакуум-фильтры хорошо отделяют грубодисперсный мицелий грибов, но не обеспечивают должной очистки нативных растворов от примесей коллоидной природы, затрудняющих последующее выделение антибиотиков. [19]
Раствор из колонны с насыщенной смолой выдавливают при помощи сжатого воздуха настолько, чтобы над смолой оставался слой раствора в 10 - 15 см, затем вытесняют оставшийся раствор, пропуская через колонну 150 л дистиллированной воды. Отдавливаемые из колонны раствор и воду пропускают через остальные колонны, находящиеся на сорбции, в той же последовательности, что и нативный раствор. После этого отключают головную колонну и возобновляют подачу сорбируемого раствора на вторую колонну, которая становится головной. [20]
При использовании радиоактивного предшественника ( ацетат натрия 1C - 14 и 2С - 14) было показано ( табл. 53), что продуцент леворина, выращиваемый в нативных растворах разного возраста, более интенсивно включает меченый ацетат в жирные кислоты и леворин, чем продуцент, выращенный на исходной среде. Это, по мнению авторов, может свидетельствовать о наличии в нативных растворах факторов, ускоряющих синтез леворина и жирных кислот, но не позволяет рассматривать активацию синтеза леворина в нативных растворах разного возраста как следствие подавления в этих условиях синтеза жирных кислот. [21]
Обычно рН культу-ральной жидкости доводят до 9 75 и экстрагируют ее СНС13, АсОАт или АсОВи. Затем антибиотики переводят в водную фазу при рН 4 5 - 5 0, водный экстракт частично упаривают в вакууме, подщелачивают, экстрагируют СНС1з и хлороформный экстракт упаривают в вакууме до / з первоначального объема. По другому методу30 нативный раствор подщелачивают до рН 9 0 и экстрагируют АсОАт. Амилацетатный раствор экстрагируют НС1, водный экстракт упаривают в вакууме, из остатка перекристаллизацией из водного ацетона выделяют эритромицин. По патентным данным разделение эритромицина и эритромицина В может быть осуществлено также фракционированной кристаллизацией из нитрометана. [22]
Ионообмен в последнее время широко используется для очистки пенициллина, стрептомицина, ауреоми-цина и других антибиотиков; для этого могут применяться различные катиониты. Примером может служить очистка и получение стрептомицина высокой степени чистоты по схеме, разработанной Институтом высокомолекулярных соединений АН СССР и Всесоюзного института антибиотиков. Согласно этой схеме нативный раствор вначале пропускают через карбоксильный Na-катионит типа КБ-4П2, стрептомицин поглощается на катионите, после чего его элюируют из катионита раствором соляной кислоты; полученный раствор пропускают через Н - катионит СБС-1, с помощью которого катионы примесей отделяются от стрептомицина. После этого раствор пропускают через ОН-анионит ЭДЭ-Юп для удаления кислоты из очищенного раствора. [23]
Катионит КБ-2 - высокомолекулярное соединение пространственного строения, нерастворимое в воде, в растворах минеральных кислот, щелочей и органических растворителях. Содержит ионогенные группы слабокислотного характера, способные к катионному обмену. Применяют для сорбции антибиотиков из нативных растворов и для других реакций катионного обмена. [24]
Флокулянты на основе поливинилпиридинов находят применение при осветлении культуральных жидкостей ряда биотехнологических производств. Флокулянты на основе винилпиридинов полезны при выделении клубеньковых бактерий рода Rizobium. Показано, что флокулянты этого типа могут найти применение при очистке нативных растворов антибиотиков, осветление которых обычными методами представляет немалые трудности. [25]