Cтраница 2
Ткань ( 200 г) измельчают с водой ( 200 мл) в смесителе Уоринга в течение 5 мин и пульпу осветляют центрифугированием. Отбирают известное количество ( 100 мл) прозрачного водного раствора и добавляют к нему насыщенный раствор карбоната калия до щелочной реакции. Затем экстракт разливают в три кругло-донные колбы на 100 мл и замораживают в сухом льде. Воду, амины и нейтральные соединения удаляют посредством лиофилизации при давлении 10 - 50 мк рт, ст. в течение 6 - 10 час. Затем раствор замораживают и лиофили-зируют снова для удаления нейтральных компонентов. В результате получают осадок - белое кристаллическое твердое вещество - в количестве 6 - 25 мг. [16]
Этот способ был применен для конденсации хлоральгидрата с нитроалканами. К подкисленному соляной кислотой водному раствору хлоральгидрата прибавлялся в небольшом избытке ни-трометан, затем к смеси прибавлялся насыщенный раствор карбоната калия до щелочной реакции. Для достижения 36 % выхода второго потребовалось шестичасовое нагревание, по-видимому связанное с понижением активности 1-нитропропана. В отсутствие воды выход 1, 1, 1-трихлор - 3-нитробутанола - 2 резко увеличивался. [17]
Перед аэрацией все пробирки соединяют в надлежащей последовательности. При аэрации проб, содержащих аммиак или обработанных уреазой ( 1 - й и 2 - й случай), добавляют 3 - 5 мл насыщенного раствора карбоната калия. При аэрации раствора после кьельдализации ( 3 - й случай) добавляют 3 - 5 мл насыщенного раствора гидроокиси натрия в зависимости от количества взятой кислоты. Щелочь вводят по стенке пробирки так, чтобы на дне образовались два четко разделенных слоя. Реакционную пробирку снова плотно закрывают пробкой и систему соединяют с водяным насосом. В течение первой минуты ток воздуха пропускают с небольшой скоростью, затем скорость постепенно увеличивают в течение следующих 2 мин. С этого времени в течение последующих 30 мин ток воздуха пропускают при максимально допустимой безопасной скорости. Время, необходимое для аэрации, зависит от типа насоса, и для применяемой аппаратуры его надо установить путем проведения контрольных опытов, проверяя полноту извлечения азота через определенные промежутки времени. После удаления всего аммиака скорость тока воздуха уменьшают и пробирки отъединяют, начиная с той, которая расположена дальше от насоса. [18]
Реакционную смесь нагревают на кипящей водяной бане 3 часа. Затем заменяют обратный холодильник на нисходящий и отгоняют большую часть растворителя. К остатку приливают 150 - 200 мл насыщенного раствора карбоната калия и 50 мл серного эфира. Смесь встряхивают, эфирный слой отделяют, а водный экстрагируют эфиром 3 - 4 раза порциями по 30 - 40 мл. [19]
Помещают 1 00 - 2 00 мл мочи здорового организма или меньше в случае ацидоза в реакционную пробирку установки для аэрации. Разбавляют до 5 мл дистиллированной водой, не содержащей аммиака. Открытой остается только реакционная пробирка. Добавляют 5 мл насыщенного раствора карбоната калия в реакционную пробирку и немедленно закрывают пробкой во избежание потерь аммиака. Начинают аэрацию в соответствии с описанием, данным на стр. [20]
Реакционную смесь нагревают на кипящей водяной бане 3 часа. Затем заменяют обратный холодильник на нисходящий и отгоняют большую часть растворителя. К остатку приливают 150 - 200 мл насыщенного раствора карбоната калия и 50 мл серного эфира. Смесь встряхивают, эфирный слой отделяют, а водный экстрагируют эфиром 3 - 4 раза порциями по 30 - 40 мл. [21]
Анализируемый раствор может с самого начала не содержать белка или должен быть освобожден от белка с помощью специальных методов, описанных в гл. IV, и, наконец, может быть подвергнут анализу в присутствии белка, как это делают, например, при анализе цельной крови. Рядом с анализируемым раствором добавляют приблизительно 50 X раствора уреазы. С противоположной стороны внешней камеры помещают 0 1 мл насыщенного раствора карбоната калия. Необходимо очень внимательно следить за тем, чтобы все три раствора, введенные во внешнюю камеру диффузионной кюветы, не соединялись. Кювету не совсем плотно закрывают, нагревают в сушильном шкафу до 30 - 40, герметично закрывают с помощью приема, используемого при определении аммиака, и легким ударом кольца соединяют капли анализируемого раствора и уреазы. После этого кювету выдерживают в сушильном шкафу при 37 в течение приблизительно 45 - 60 мин. Дальнейший ход анализа точно соответствует методике определения аммиака, описанной на стр. Количество мочевины, которое может быть определено с помощью описанного метода, а также его точность, определяются возможностями описанного выше метода определения аммиака. [22]