Cтраница 3
Во-вторых, комплекс фермент - субстрат соединяется с цианистым водородом и декарбоксилирование при этом прекращается. В-третьих, боргидрид натрия, представляющий собой мягкий восстанавливающий агент, реагирующий с С N ( но не С - N), кетонной или амидной карбонильными группами, восстанавливает комплекс фермент-субстрат, полученный из меченного С14 аце-тоацетата. В результате образуется продукт, не обладающий ферментативной активностью, в котором при диализе сохраняется практически все количество С1, и регенерации фермента не происходит. Действие боргидрида натрия на комплекс фермент - субстрат - цианистый водород с последующим диализом приводит к регенерации фермента, полностью сохранившего свою активность. [31]
Во-вторых, комплекс фермент - субстрат соединяется с цианистым водородом и декарбоксилирование при этом прекращается. В-третьих, боргидрид натрия, представляющий собой мягкий восстанавливающий агент, реагирующий с С N ( но не С - N), кетонной или амидной карбонильными группами, восстанавливает комплекс фермент-субстрат, полученный из меченного С14 аце-тоацетата. В результате образуется продукт, не обладающий ферментативной активностью, в котором при диализе сохраняется практически все количество С1, и регенерации фермента не происходит. Действие боргидрида натрия на комплекс фермент - субстрат - цианистый водород с последующим диализом приводит к регенерации фермента, полностью сохранившего свою активность. [32]
Одним из путей решения этой проблемы служит регенерация целлюлолитических ферментов и повторное их использование после осуществления одного цикла гидролиза. При гидролизе ЦСМ даже при достижении высоко - степени их конверсии в реакционой смеси остается в нерастворенном виде определенная часть субстрата с прочно адсорбированными на нем целлюлолитическими ферментами. Одновременно слабо адсорбирующиеся ферменты находятся в растворимой форме в смеси с продуктами гидролиза. Поэтому процесс регенерации ферментов разделяется на два этапа: регенерация их из раствора и регенерация адсорбированных ферментов. [33]
В реакторе колонного типа возможно использование больших концентраций субстрата - до 300 - 400 г / л ( для сравнения, в реакторе с перемешиванием - только до 80 - 100 г / л), что приводит к существенному увеличению производительности процесса. Постоянное удаление продуктов из зоны гидролиза позволяет уменьшить их ингибирующее влияние на целлюлазы и в итоге достичь более высокой степени конверсии целлюлозы и продуктивности. В колонном реакторе можно применять для гидролиза культуральную жидкость продуцентов цел-люлаз даже со сравнительно небольшой активностью, поскольку принцип работы реактора позволяет концентрировать ферменты на поверхности целлюлозы за счет их селективной ( аффинной) сорбции. При этом происходит также очистка от содержащихся в культуральной жидкости примесей, что в итоге приводит к получению боле чистых гидролизатов. Десорбирующиеся в процессе гидролиза и выходящие вместе с продуктами ферменты можно повторно адсорбировать на свежих порциях сырья, подаваемых в реактор по принципу противотока. Таким образом, осуществляется авто регенерация ферментов, и процесс гидролиза является непрерывным, что дает дополнительные технологические преимущества. [34]
Опыты были проведены с четырьмя кроликами. Двое из них были иммунизированы автолизованным соком, инактивировашшм путем нагревания на водяной бане при 68 в течение 30 минут. Для иммунизации двух последних кроликов применялся автолизованный сок, который был поставлен на 40 мин. Осадок, образовавшийся после кипячения, был отфильтрован. Контрольные опыты показывают в обоих случаях полное отсутствие активности препаратов как в начале, так и в конце иммунизации. Это следует отметить, так как в литературе приводятся данные о регенерации инактивированных ферментов. [35]
Одним из путей решения этой проблемы служит регенерация целлюлолитических ферментов и повторное их использование после осуществления одного цикла гидролиза. При гидролизе ЦСМ даже при достижении высоко - степени их конверсии в реакционой смеси остается в нерастворенном виде определенная часть субстрата с прочно адсорбированными на нем целлюлолитическими ферментами. Одновременно слабо адсорбирующиеся ферменты находятся в растворимой форме в смеси с продуктами гидролиза. Поэтому процесс регенерации ферментов разделяется на два этапа: регенерация их из раствора и регенерация адсорбированных ферментов. [36]