Регистрация - хроматограмма
Cтраница 3
Как только на диаграммной ленте начинает проявляться сигнал, соответствующий анализируемому компоненту, немедленно гасят пламя и сразу же присоединяют ловушку к пламенному соплу через короткую тефлоновую трубку. По прошествии времени, соответствующего ширине пика, отсоединяют ловушку от сопла. После повторного поджига пламени детектора регистрация хроматограммы может быть продолжена для выделения последующих компонентов. [31]
Напротив, для сравнительно недорогих микроколоночных хроматографов со шприцевым насосом среднего давления и упрощенной тем самым конструкцией ( хроматографы серии Милихром и Обь) свойства растворителей, влияющие на механическую рабочу хроматографа, приобретают решающее зз ( ачепие. Токсичность, воспламеняемость, темпсрспури кипения и стоимость растворителей хв-ляются критическим моментом при выборе растворителей для препа-ратипнойи полупрепаративной ВЭЖХ, Микруколоночные хроматографы, наоборот, экономичны и относительно безопасны, благодаря малому расходу ПФ. При использовании спектрофотометрических детекторов ( СФД) безразличен показатель преломления, при регистрации хроматограмм рефрактометрическим детектором ( РМД) ипю-рируется поглощение ПФ в УФ свете. Совместимость с разбавителем ( гидрофильностъ или липофильностъ) важна при выборе режима хро матографии - НФХ или ОФХ, при составлении бинарных или многокомпонентных ПФ, при градиентном режиме элюции. Не последнее значение имеет хорошая растворимость аналитов в растворителе. Ни один индивидуальный растворитель не обладает универсальными хро-матографическими свойствами. Идеальный гипотетический растворитель для ВЭЖХ ( тепх1тит ипмета1е) должен сочетать в себе свойства нескольких растворителей совершенно различной природы. [32]
В частности, вводить иглу микрошприца в камеру испарителя, вводить пробу и выводить иглу микрошприца из камеры испарителя необходимо как можно быстрее, но без излишней суеты. Отклонение от установившегося ритма в чередовании этих стадий может привести не только к изменению абсолютной величины дозы, но, главное ( из-за увеличенной продолжительности нахождения иглы микрошприца в камере испарителя), к нарушению соответствия между составом пара и жидкости. Для приобретения необходимых навыков следует попрактиковаться в дозировании искусственных 2 - 3-компонентных смесей с целью добиться регистрации воспроизводимых хроматограмм. [33]
 |
Хроматограммы летучих компонентов мочи здорового человека ( а и пациента, больного диабетом ( б. [34] |
Капиллярная колонка из нержавеющей стали длиной 100 ж и диаметром 0 5 мм с эмуль-фором ON-870 ( фирма Супелко, США); скорость газа-носителя азота Ьмл / мин. Применяли криогенный ввод пробы, температуру колонки поддерживали 16 мин. С, затем повышали со скоростью 2 град / мин до 175 С и далее поддерживали постоянной до окончания регистрации хроматограммы. [35]
При непосредственном присоединении сепараторов двух других типов происходит проскок высокого вакуума в разделительную колонку со всеми нежелательными последствиями, о которых уже говорилось в разд. Поэтому рекомендуется между молекулярным сепаратором и хроматографической колонкой вставлять устройство для дросселирования газового потока, которое обеспечило бы нормальное давление на выходе колонки. Кроме того, при этом имеется возможность отвода части элюи-руемой фракции для записи хроматограммы с использованием пламенно-ионизационного детектора параллельно с регистрацией хроматограммы по полному ионному току. В последнем случае благодаря плавной регулировке удается подбирать оптимальные условия для потока газа-носителя, для соотношения газа-носителя и анализируемых компонентов и для давления в ионном источнике. Эффективность действия молекулярных сепараторов оценивают в общем случае по коэффициенту обогащения и выходу. [36]
Один из авторов успешно использует простую газовую схему [7], которая позволяет одновременно на трех колонках различной полярности получать и правильно соотносить параметры удерживания индивидуальных соединений, входящих в состав анализируемой смеси. Схему легко собрать в термостате хроматографа любого типа, она включает в себя последовательно колонку с фазой средней полярности, детектор, делитель потока, две параллельные колонки ( одну с полярной и другую с малополярной фазами), два детектора, установленные на выходе каждой колонки. Для регистрации хроматограмм используют многоперьевые или несколько отдельных самописцев. Схема не содержит переключателей потоков внутри термостата и поэтому надежна в работе. На обводную линию следует установить пневматическое сопротивление, равное сопротивлению первой хроматографической колонки. В качестве сопротивления может быть использована параллельная колонка. [37]
ДР может регистрировать все соединения, входящие в состав нефтепродуктов, при правильном подборе подвижной фазы. При использовании в качестве элюента парафиновых углеводородов чувствительность детектора повышается при переходе от насыщенных к моно -, би - и полиароматическим углеводородам. Поскольку средний показатель преломления группы, выделяемой при разделении нефтепродукта, является суммой показателей преломления компонентов, входящих в ее состав, этот усредненный показатель преломления и, следовательно, отклик детектора зависят от химического состава группы, и для одной и той же группы коэффициент чувствительности детектора изменяется в зависимости от исходной нефти, фракционного состава, способа получения анализируемого нефтепродукта. Другая трудность заключается в необходимости ступенчатого ( градиентного) элюирования при хрома-тографическом разделении нефтепродуктов, особенно тяжелых. Постепенное изменение состава подвижной фазы при градиентном элюировакии приводит к нестабильности в работе ДР, а ступенчатое изменение подвижной фазы создает дополнительные трудности применения ДР для регистрации хроматограммы нефтепродуктов, так как фронтальная зона нового растворителя ( и следовательно, изменение базовой линии детектора) будет совпадать с выходом основной массы выделяемой группы. [38]
ДР может регистрировать все соединения, входящие в состав нефтепродуктов, при правильном подборе подвижной фазы. При использовании в качестве элюента парафиновых углеводородов чувствительность детектора повышается при переходе от насыщенных к моно -, би - и полиароматическим углеводородам. Поскольку средний показатель преломления группы, выделяемой при разделении нефтепродукта, является суммой показателей преломления компонентов, входящих в ее состав, этот усредненный показатель преломления и, следовательно, отклик детектора зависят от химического состава группы, и для одной и той же группы коэффициент чувствительности детектора изменяется в зависимости от исходной нефти, фракционного состава, способа получения анализируемого нефтепродукта. Другая трудность заключается в необходимости ступенчатого ( градиентного) элюирования при хрома-юграфическом разделении нефтепродуктов, особенно тяжелых. Постепенное изменение состава подвижной фазы при градиентном элюировании приводит к нестабильности в работе ДР, а ступенчатое изменение подвижной фазы создает дополнительные трудности применения ДР для регистрации хроматограммы нефтепродуктов, так как фронтальная зона нового растворителя ( и следовательно, изменение базовой линии детектора) будет совпадать с выходом основной массы выделяемой группы. [39]
В газовой хроматографии все более широкое применение находят микронасадочные колонки. Наиболее подробно изучено размывание для газо-жидкостных микронасадочных колонок. Поэтому по заполнению она отличается от обычных колонок вследствие спекания материала набивки со стенками колонки. В работе [1] показаны кривые размывания, но не сделано подробного анализа коэффициентов уравнения Ван-Деемтера. Использование микронасадочных колонок характеризуется рядом особенностей по сравнению с обычными насадочными: сведение к минимуму объемов дозатора, соединительных линий и рабочего объема детектора; применением делителя потока; использованием быстродействующей электронной аппаратуры для регистрации хроматограмм. [40]
Выбор методики анализа фракций определяется природой анализируемого материала; причем выбрать методику анализа, а в некоторых случаях и испытать необходимо перед началом хроматографирования. Применяют физические, химические и биологические методики. Чаще всего измеряют показатель преломления. Пользуются также различными колориметрическими методами, а также тонкослойной или бумажной хроматографией и электрофорезом. Идеальным способом является детектирование радиоактивных изотопов. Измеряя рН и электропроводность отбираемых фракций, можно контролировать условия элюирования. Именно такой контроль позволяет воспроизводить условия градиентного элюирования. В ряде случаев очень полезно комбинировать несколько методов детектирования. Полезны также непрерывное автоматическое детектирование ( с достаточно высокой чувствительностью) разделенных соединений и регистрация хроматограмм ( см. разд. Результаты измерений записывают в виде кривой зависимости измеряемой величины от объема элюата или номера фракции. [41]
Страницы: 1 2 3