Cтраница 2
Фаг Р1 эффективно обходит эту сложность за счет кодируемой им системы сайт-специфической рекомбинации. Продукт фагового гена ere с высокой частотой проводит рекомбинацию между двумя специальными последовательностями loxP, находящимися на одной молекуле ДНК. ДНК фага Р1 содержит одну последовательность loxP, но димер, возникший в результате гомологичной рекомбинации между двумя молекулами фаговой ДНК, содержит две последовательности / о. Сге-белок может осуществлять всю реакцию без каких-либо дополнительных факторов и без доноров энергии Как и другие белки сайт-специфической рекомбинации, он напоминает топоизомеразы в том отношении, что в ходе рекомбинации вносит разрывы в ДНК и ковалентно связывается с одним из образовавшихся концов, запасая тем самым энергию разорванной связи. [17]
Поскольку в рекомбинацию в данном случае вовлечены, как правило, совершенно определенные участки фагового и бактериального геномов ( att Р и att В соответственно), принято говорить, что имеет место сайт-специфическая рекомбинация. Роль этих белков двоякая. [18]
В настоящее время известны по меньшей мере три разных механизма рекомбинации попавшей в бактериальную клетку чужеродной ДНК с бактериальной хромосомой ( или с плазмидой) in vivo: 1) общая гомологичная рекомбинация, 2) сайт-специфическая рекомбинация и 3) негомологичная рекомбинация. [19]
Сайт-специфическая рекомбинация всегда играет ту или иную вполне конкретную частную роль. Гомологичная рекомбинация тоже имеет впсще конкретные непосредственные функции, например обеспе-чеще пострепликативной репарации или осуществление спарива-нш гомологов, необходимого для правильного расхождения хро-моом в мейозе. Но кроме этих непосредственных функций рекомби-нагия играет очень важную роль в эволюции живой природы. [20]
Сайт-специфическая рекомбинация всегда играет ту или иную вполне коркретную частную роль. Гомологичная рекомбинация тоже имеет вшлне конкретные непосредственные функции, например обеспе-пострепликативной репарации или осуществление спарива-гомологов, необходимого для правильного расхождения хро-моом в мейозе. [21]
Число различных D-сегментов неизвестно, однако у мыши их не менее десятка. В результате серии сайт-специфических рекомбинаций D-сегмент соединяется с каким-либо из VH - и с каким-либо из JH-сегментов, что приводит к созданию функционального Ун-гена. Существо-ванне отдельных D-сегментов еще по меньшей мере в 10 раз увеличивает число различных Ун-областей, которые могут образоваться у мыши. [22]
Сайт-специфическая рекомбинация - это рекомбинация, которая в отличие от гомологичной не требует протяженных участков гомологии, но для протекания которой необходимы строго определенные последовательности ДНК и специальный ферментативный аппарат. В каждом конкретном случае сайт-специфическая рекомбинация выполняет свою частную функцию, последовательности ДНК для каждого случая также различны, отличаются и ферменты, поэтому имеет смысл рассматривать по отдельности различные системы сайт-специфической рекомбинации. Однако из дальнейшего будет ясно, что в общих чертах механизм сайт-специфической рекомбинации всегда одинаков. [23]
Рекомбинационные процессы, в которых участвуют сегменты ДНК, не обнаруживающие заметной генетической гомологии, называют негомологичной рекомбинацией. Так же как и сайт-специфическая рекомбинация, она представляет собой интеграционную форму рекомбинации, т.е. не обмен, а соединение ДНК. Негомологичная рекомбинация независима от гена гее А. Молекулярный механизм негомологичной рекомбинации еще не вполне выяснен. [25]
ДНК происходит под действием ферментов, которые напоминают рестриктирующие эндонуклеазы и которые специфичны к данным сайтам. Тот же механизм может лежать в основе сайт-специфической рекомбинации. [26]
В результате действия транспозазы ТпЗ почти всегда обрузуются коинтеграты. Оказалось, что этот фермент проводит типичную реакцию сайт-специфической рекомбинации по специальным последовательностям ДНК, имеющимся в составе транспозона и называемым res. [27]
Антитела синтезируются при участии трех независимых генных пулов, кодирующих соответственно У. В каждом Пуле отдельные генные сегменты, кодирующие разные части вариабельных областей L - и Н - цепей, могут соединяться путем сайт-специфической рекомбинации в процессе диффе-ренцировки В-клеток. [29]
Сайт-специфическая рекомбинация - это рекомбинация, которая в отличие от гомологичной не требует протяженных участков гомологии, но для протекания которой необходимы строго определенные последовательности ДНК и специальный ферментативный аппарат. В каждом конкретном случае сайт-специфическая рекомбинация выполняет свою частную функцию, последовательности ДНК для каждого случая также различны, отличаются и ферменты, поэтому имеет смысл рассматривать по отдельности различные системы сайт-специфической рекомбинации. Однако из дальнейшего будет ясно, что в общих чертах механизм сайт-специфической рекомбинации всегда одинаков. [30]