Cтраница 3
Так, у транспозона ТпЗ имеется два гена, необходимых для его перемещения, tnpA и tnpR один из которых, tnpA, кодирует транспозазу со свойствами, похожими на свойства фермента фага Ми. В результате действия транспозазы ТпЗ почти всегда обрузуются коинтеграты. Оказалось, что этот фермент проводит типичную реакцию сайт-специфической рекомбинации по специальным последовательностям ДНК, имеющимся в составе транспозона и называемым res. [31]
Сайт-специфическая рекомбинация - это рекомбинация, которая в отличие от гомологичной не требует протяженных участков гомологии, но для протекания которой необходимы строго определенные последовательности ДНК и специальный ферментативный аппарат. В каждом конкретном случае сайт-специфическая рекомбинация выполняет свою частную функцию, последовательности ДНК для каждого случая также различны, отличаются и ферменты, поэтому имеет смысл рассматривать по отдельности различные системы сайт-специфической рекомбинации. Однако из дальнейшего будет ясно, что в общих чертах механизм сайт-специфической рекомбинации всегда одинаков. [32]
Фаг Р1 эффективно обходит эту сложность за счет кодируемой им системы сайт-специфической рекомбинации. Продукт фагового гена ere с высокой частотой проводит рекомбинацию между двумя специальными последовательностями loxP, находящимися на одной молекуле ДНК. In vitro очищенный Сге-белок может осуществлять всю реакцию без каких-либо дополнительных факторов и без доноров энергии. Как н другие белки сайт-специфической рекомбинации, он напоминает топоизомеразы в том отношении, что в ходе рекомбинации вносит разрывы в ДНК и ковалентно связывается с одним из образовавшихся концов, запасая тем самым энергию разорванной связи. [33]
Фаг Р1 эффективно обходит эту сложность за счет кодируемой им системы сайт-специфической рекомбинации. Продукт фагового гена ere с высокой частотой проводит рекомбинацию между двумя специальными последовательностями loxP, находящимися на одной молекуле ДНК. ДНК фага Р1 содержит одну последовательность loxP, но димер, возникший в результате гомологичной рекомбинации между двумя молекулами фаговой ДНК, содержит две последовательности / о. Сге-белок может осуществлять всю реакцию без каких-либо дополнительных факторов и без доноров энергии Как и другие белки сайт-специфической рекомбинации, он напоминает топоизомеразы в том отношении, что в ходе рекомбинации вносит разрывы в ДНК и ковалентно связывается с одним из образовавшихся концов, запасая тем самым энергию разорванной связи. [34]
Фаг Р1 эффективно обходит эту сложность за счет кодируемой им системы сайт-специфической рекомбинации. Продукт фагового гена ere с высокой частотой проводит рекомбинацию между двумя специальными последовательностями / охР, находящимися на одной молекуле ДНК. ДНК фага Р1 содержит одну последовательность loxP, но димер, возникший в результате гомологичной рекомбинации между двумя молекулами фаговой ДНК, содержит две последовательности loxP в прямой ориентации друг относительно друга. In vitro очищенный Сге-белок может осуществлять всю реакцию без каких-либо дополнительных факторов и без доноров энергии. Как и другие белки сайт-специфической рекомбинации, он напоминает топоизомеразы в том отношении, что в ходе рекомбинации вносит разрывы в ДНК и ковалентно связывается с одним из образовавшихся концов, запасая тем самым энергию разорванной связи. [35]